Amaliy qism
Kerakli reagentlar:
bug‘doy urug‘i
kvars qumi
atseton
dietilefir
sul'fat kislota
distillangan suv
o’yuvchi kaliy (KOH) 0.1 n
eritmasi;
atsetatbuferi (pH -4.7)
etil spirti
fenolftalein 1% eritma
o’simlik yog‘i
Kerakli jihozlar va idishlar:
chinni hovoncha
sentrifuga
vakuum eksikator
konussimon kolba
magnit aralashtirgich
Tajriba uchun 10-12g bug‘doy urug‘ini kvars qumi
bilan gomogen massa xosil
bo’lguncha xavonchada eziladi. Gomogenmassaniustiga 5 qismatsetonqo’shib 10
daqiqaichidayaxshilabezibaralashtiriladi. So’ngra massa sentrifugalanadi. Ajralgan
qoldiq dietilefir
bilan ishlov beriladi, keyinchalik sulfat kislotasi ustida vakuum
eksikatorida 12 soat
davomida
quritiladi.
Quritilganmassaxovonchadaeziladi.
Tajribaoldidanfermentpreparatidistillangansuvda 1:10 nisbatdaeritiladi.
Tajribauchun
a) 0.1-0.5 mlsuspenziya;
b) o’yuvchi kaliy (KOH) 0.1 n eritmasi;
v)
atsetatbuferi
(pH
-4.7)
olinadi.
Birhilxajmdagisirkakislotasivanatriy
atsetatninormaleritmalariaralashtiriladi.
d) etilspirtinidietilefirliaralashmasi (1:1) nisbatdaishlatisholdidantayyorlanibolinadi.
g) fenolftaleinni 1% lieritmasiolinadi.
50mlli konussimon kolbaga tarozida 2.0-2.5 g o’simlik yog‘i o’lchab
solinadi.Uning ustiga 2 ml atsetat buferi aralashmasidan solib yaxshilab aralashtiriladi
va ustiga 0.1-0.5ml ferment preparatini suspenziyasi 3
ml suv bilan aralashtirilib
qo’shiladi. Kolbadagi aralashmani umumiy xajmigacha 8 ml suv bilan to’ldiriladi va
kolbani og‘zi yopib 1 soat davomida 20
0
C temperaturada aralashtirgich apparatida
aralashtiriladi.
So’ngkattaxajmdagikolbagasolib
60mlneytrallanganspirtefirliaralashmaniqo’shiladi.
O’simlik yog‘ini gidrolitik parchalanishi oqibatida hosil bo’lgan
erkin
kislotalarni 0.1n KJ eritmasi yordamida titrlanadi (indikator fenolftalein).
Birvaqtnio’zidashutitrlashsuvdaeritilganfermentpreparatidaxamo’tkaziladi.
Lipazani faolligi
x
1g yog‘ni gidrolitik parchalanishidan xosil bo’lgan erkin
kislotalarni neytrlash uchun ketgan ishqor ( 0.1n eritmasini millilitrdagi)
miqdori bilan
belgilanadi.
Dostları ilə paylaş: