Oqsil muhandisligi

3.2 Birlashtiruvchi oqsillardagi reportyor oqsillar

Boshqa holatda termoyadroviy oqsillar, bu peptidlarning termoyadroviy oqsillar ichida barqarorlashishi tufayli bakterial hujayralardagi qisqa peptidlarning yuqori darajadagi ifodasini olish uchun ishlatiladi. Birlashtiruvchi oqsillar ko'pincha aniqlash qiyin bo'lgan rekombinant oqsillarni aniqlash va tozalash uchun ishlatiladi. Masalan, o‘rganilayotgan oqsilning C-uchiga galaktosidazani reportyor oqsil sifatida biriktirish orqali rekombinant oqsilni galaktozidaza faolligi bilan tozalash, uning antigen determinantlarini immunokimyoviy usullar bilan aniqlash mumkin. Ochiq o'qish ramkalarini (ORFs) o'z ichiga olgan DNK fragmentlarini muxbir oqsili genlari bilan bog'lash orqali bunday termoyadroviy oqsillarni reportyor oqsil faolligi uchun tozalash va ularni laboratoriya hayvonlarini immunizatsiya qilish uchun ishlatish mumkin. Olingan antikorlar ORF tomonidan kodlangan rekombinant polipeptidni o'z ichiga olgan mahalliy proteinni tozalash va shu bilan klonlangan gen fragmentini aniqlash uchun ishlatiladi [17].

Gibrid oqsillar yordamida oqsil mahsulotiga antitellar mavjud bo'lgan noma'lum genni klonlashning teskari muammosi ham hal qilinadi. Bunday holda, noma'lum genlarning ORFlarini ifodalovchi nukleotidlar ketma-ketliklarining klon kutubxonasi klonlangan ORFni reportyor geni bilan bir xil o'qish ramkasida bog'lash imkonini beruvchi vektorlarda qurilgan. Ushbu rekombinant genlarning ifodalanishi natijasida hosil bo'lgan gibrid oqsillar ferment immunoassay usullari bilan antikorlar yordamida aniqlanadi. Sekretsiyalangan oqsillarni va reportyor oqsillarni birlashtirgan gibrid genlar sekretsiya mexanizmlarini, shuningdek, to'qimalarda ajratilgan oqsillarning joylashishi va harakatini yangi usulda o'rganish imkonini beradi [6].