O`zbekiston respublikasi oliy va o`rta maxsus ta'lim vazirligi

5.2.  Mexanik inokulatsiya yordamida viruslarni 

o`simlikka yuqtirish 

 

---

 

24 

 

 

Ishdan   maqsad:   Virus   namunasini sog`   o`simlikka yuqtirish malakasini 

hosil qilish. 

 

Kerakli  materillar:  viruslar,  o`simliklar.  1      Indikator      o`simliklar:   

Nicotiana   glutinosa,   yoki   N. sylvestris, Chenopodium amaranticolor yoki Ch. 

quenea. 

2  Virus namunasi: TMV ni tomat shtammi bilan kasallangan tomat  yoki tamaki 

barglari (5-10 gramm). 

3. Korund (300-600 mesh) yoki "selit" (diatom tuprogi), 

4.  Shisha tayoqcha, shpatel. 

5.  Chinni xavoncha (25 - 50 ml). 

6.  Eksikator (xajmi 20 litr). 

7.  Ip. 

8  Plastilin. 

 

Ishning  borishi.  Viruslar  bilan  ishlaganda  har  bir  qilinadigan  amallardan 

avval  qo`llarni,  ish  joyini,  ish  asboblarini  yaxshilab  yuvish,  tozalash,  ba'zilarini 

steril - lash zarur. Ish toza filtr qog`ozi ustida bajariladi. 

 

Virusli  namunadan  virusli  shira  ajratish:  TMV  bilan  kasallantirilgan  tomat 

yoki  tamaki  bargini  (5-10  gr)  chinni  xavonchada  0,1  M  fosfat  buferi  (1  gr 

namunaga 1 ml bufer miqdorida) (rN 7,8) ishtirokida ezib maydalaniladi. Yanada 

yaxshiroq  maydalash  uchun  gomogenizatordan  (1-2  minut)  foydalansa  5  xam 

bo`ladi.  Gomogenatni  2  -  3  qavatli  dokadan  o`tkaziladi,  so`ngra  1  minutda  6  -

8ming  aylanish  tezligida  10  minut  davomida  sentrifuga  qilinadi.  Cho`kmaga 

yaxshi ezilmagan o`simlik qoldiqlari, hujayrani yirik birikmalari tushadi, virus esa 

cho`kmaning ustida bo`ladi. 

 

Virus yuqtirish. Kasal o`simlikdan ajratib olingan shirani 2 - 3 tomchisini sog` 

o`simlik  bargiga  tomiziladi  va  igna  bilan  barg  sathi  tirnaladi.  Ammo  bu  usullar 

kam  natija  beradi.  Hozirgi  vaqtda  esa  bu  usul  sal  o`zgartirilgan,  barg  sathiga 

ozgina obraziv sepiladi, 2 - 3 tomchi shirani tomiziladi va toza barmoq yoki shisha 

tayyoqcha  yoki  shpatel  yordamida  ohistalik  bilan  surtiladi.  Surtishning  kuchi 

bargning  holatiga,  yoshiga,  o`simlikni,  abrazivni  sifatiga  bog`liq  bo`ladi,  10-15 

minutdan  so`ng  virus  preparati  va  abrazivlarni  ortiqchalari  distillangan  suv  bilan 

yuvib  tashlanadi  Virus  barg  to`klari  va  epidermisidagi  mikro-jarohatlari  orqali 

kiradi. 

 

Virus  yuqtirilgan  barglarga  virus  nomi,      sana  va  hokozolar  yozilgan 

etiketkalar bog`lanadi. So`ngra ularni nam solingan katta eksikator yoki shishadan 

yasalgan 15-20 l hajmli usti zich yopiledigan idishlarda saqlanadi. Buning uchun 

eksikatorni  ustki  qismiga  3  -  4  qator  ip  tortiladi  va  ipning  ikki  uchi  eksikator 

devorlariga  plastilin  yoki  yopishqoq  lentalar  yordamida  yopishtiriladi.  Virus 

yuqtirilgan  barglar  ana  shu  iplarga  bog`lanib  osib  qo`yiladi.  Virusning  yuqish 

kuchini  oshirish  uchun  virus  yuqtirilgan  barglar  qorong`iroq  va  nam  joyga 

qo`yiladi. 

 

Virus  yuqtirilgan  barglarda  kasallik  alomatlari  paydo  bo`lishi  ishlatiladigan 

indikator o`simlikning turiga (Nicotiana glutinosa da 48 soat, N. sylvestris da 76 - 

80 soatda  nekroz hosil bo`ladi), virusning turiga, haroratga va shu kabi faktorlarga 

bog`liq bo`ladi. 

 

Virus yuqtirilgandan so`ng 48 soat (N. glutinosa), 76 - 80 soat (N. sylvestris), 

ikki  hafta  (Ch  amaranticoior,  Ch.  quenea),  1  -  2  oy  va  yillar  mobaynida 

(daraxtlarda) kuzatilib boriladi. Indikator o`simliklarda paydo bo`lgan simptomlar 

48 - 72 soatdan so’ng hisobga olinadi va nazorat bargdagi (yoki bargni yarmidagi) 

---

 

25 

 

hamda  tajriba  barglardagi  simptomlar  sanaladi  (nekroz  yoki  dog`,  xalqa  bo`lsa), 

diametri o`lchanadi, ya'ni tasvirlanadi.