Reja: Yuqori samarali suyuqlik xromotografiyasi haqida tushuncha

Yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (HPLC) , shuningdek, yuqori bosimli suyuqlik xromatografiyasi deb ham ataladi, zamonaviy asboblarda klassik ustunli xromatografiyaning eng istiqbolli analitik versiyasidir. HPLC bir vaqtning o'zida murakkab namunalarni ularning tarkibiy qismlariga ajratish , ko'pchilik komponentlarni aniqlash , kontsentratsiyani o'lchash imkonini beradi.bir yoki bir nechta birikmalar (aniq analitik vazifalarga va mos yozuvlar materiallari mavjudligiga qarab). HPLC usuli ekologiya, sanitariya-gigiyena va veterinariya tadqiqotlarida, oziq-ovqat va qishloq xo'jaligi mahsulotlari sifatini nazorat qilish va sertifikatlashda, tibbiyotda, farmatsevtikada, neft-kimyoda, sud-tibbiyotda va boshqalarda miqdoriy kimyoviy tahlil maqsadlarida keng qo'llaniladi.
HPLC blok-modulli xromatografik tizim yordamida amalga oshiriladi - suyuq xromatograf , unda ma'lum bir tarkibdagi (2-3 komponentdan) suyuq harakatlanuvchi faza (eluent) yuqori bosim ostida (odatda 50-200 atmosfera) nasos agregati yordamida amalga oshiriladi. ma'lum bir doimiy tezlik (100-1000 µl/min) xromatografik ustun orqali doimiy ravishda uzatiladi - uzunligi 50-250 mm, ichki diametri 2-5 mm, zich va bir xilda 3-10 mkm bir hil sorbent zarralari bilan to'ldirilgan po'lat quvur. diametri. Sorbent sifatida rivojlangan sirtga ega adsorbentlar yoki qattiq tashuvchining yuzasiga payvandlangan statsionar suyuqlik fazalari (kimyoviy modifikatsiyalangan sorbentlar) ishlatilishi mumkin.Tegishli namunani tayyorlashdan so'ng, aniqlanishi kerak bo'lgan komponentlar tahlil qilinadigan namunaning bir qismi sifatida 10-100 µl hajmdagi maxsus dozalash moslamasi yordamida xromatografik ustunga kiritiladi .
Mobil faza oqimida sorbent qatlami bo'ylab harakatlanish jarayonida namuna komponentlari statsionar faza tomonidan qayta-qayta sorblanadi va keyin yana desorbsiyalanadi. Sorbentga teng bo'lmagan yaqinlik tufayli turli birikmalar ustun bo'ylab turli tezliklarda harakatlanadi va detektorga etib boradi.xromatografik ustunning chiqishiga ulangan, ketma-ket, turli vaqtlarda. Aniqlash ko'pincha UV yoki ko'rinadigan absorbansni qayd etish yoki floresansni o'lchash yo'li bilan amalga oshiriladi (tahlillanuvchining o'z floresansi yoki tahlil qilinadigan moddaning o'zi floresan bo'lmasa, tegishli hosilalarning floresansi). 
Ma'lumotlarni yig'ish va qayta ishlash uchun kompyuter tizimidan foydalangan holda, tahlil qilinadigan aralashmaning tarkibiy qismlari ushlab turish vaqti va ularning miqdoriy aniqlanishi analitik signalning kattaligi (xromatogrammadagi tepalikning balandligi yoki maydoni) bilan aniqlanadi.Eng murakkab analitik muammolarni hal qilishda, murakkab tarkibli haqiqiy namunalardagi (oziq-ovqat mahsulotlari, tuproqlar) past MPC qiymatlariga ega bo'lgan birikmalarning past konsentratsiyasini (politsiklik aromatik uglevodorodlar, toksinlar) aniqlash kerak bo'lganda, analitik tahlilning eng muhim tavsiflari. HPLC uchun uskunalar quyidagilar:
– xromatografik ajratishning samaradorligi va selektivligi , shu bilan birga xromatografik ustunning xarakteristikalarini (sorbentning tabiati, ustun uzunligi) va xromatografiya sharoitlarini (harakatlanuvchi fazaning tarkibi, kolonna orqali etkazib berishning hajmli oqim tezligi) to'g'ri tanlash tufayli; gradient elutsiya texnikasidan foydalanish), tahlil qilinadigan birikmalarni matritsadan zarur ajratish va tegishli namuna komponentlariga erishiladi;
- mos keladigan xromatografik detektordan (ftorimetrik, spektrofluorimetrik yoki spektrofotometrik) optimal aniqlash parametrlarini (qo'zg'alish, floresans yoki yutilish to'lqin uzunliklari) o'rnatish bilan birgalikda foydalanish aniqlashning selektivligi va sezgirligi (agar bo'lsa) aniqlash chegarasining past qiymatlarini ta'minlasa. zarur, tahlil qilinadigan moddalarni fon matritsasi va tegishli namuna komponentlariga nisbatan tanlab ro'yxatga olish).
Xromatografik ajratish samaradorligini oshirish va tahlil qilish muddatini qisqartirish uchun 60 ° S gacha bo'lgan haroratda ustunli termostatni qo'llash tavsiya etiladi.
Qurilishning blok-modulli printsipi foydalanuvchining ma'lum bir analitik vazifasini hal qilish uchun buyurtma asosida tayyorlangan xromatografik tizimlarni yakunlash imkonini beradi.