Translated from Russian to Uzbek

Ilovalar

O'simlik materialini sun'iy oziqlantiruvchi muhitda etishtirish texnikasi

Biotexnologik laboratoriyani tashkil etish
Biotexnologiya laboratoriyasini tashkil qilish uchun sizga keng izolyatsiya qilingan xonalar, shuningdek, zamonaviy uskunalar va yuqori sifatli reaktivlar kerak.
Dezinfektsiyaning qulayligi uchun binolardagi pol va devorlar plitka bilan qoplangan, shiftini oqlash kerak.
Kir yuvish xonasi jihozlari: issiq va sovuq suvli lavabolar; distillangan suv; distillashlar va qayta distillashlar; idishlarni quritish uchun ish rejimiga ega quritish shkaflari - 100-130 ° S gacha, asboblar uchun - 170 ° S gacha; toza idish-tovoq va asboblarni saqlash uchun shkaflar, yuvish vositalarini saqlash uchun idishlar, quritgichli dudbo'ronlar. Ozuqa muhitini tayyorlash xonasining jihozlari: laboratoriya jadvallari; tuzlar, gormonlar va vitaminlarning zaxira eritmalarini saqlash uchun muzlatgichlar; analitik va buralish shkalasi; ionomer; magnit aralashtirgichlar; pechlar, gaz pechlari; idish-tovoqlar majmuasi (kolbalar, stakanlar, gradusli silindrlar, stakanlar, probirkalar va boshqalar), tegishli tozalik darajasidagi kimyoviy reagentlarning zarur to'plami (kimyoviy toza, analitik nav, analitik nav).
Sterilizatsiya uchun xonaning jihozlari: ish rejimiga ega avtoklavlar - bosim 1-2 atmosfera va harorat 120 ° S; oziqlantiruvchi vositalar bilan tokchalar uchun tokchalar; steril materiallarni saqlash uchun shkaflar. Bu xona ta'minot va egzoz ventilyatsiyasi bilan jihozlangan bo'lishi va avtoklavdan kondensatni to'kish uchun kanalizatsiya drenajiga ega bo'lishi kerak.
O'simlik ekspansiyalarini ozuqa muhitiga ekish (ko'chirish) uchun xona jihozlari: laminar qutilar, laboratoriya stollari, javonlar, bakteritsid lampalar, materiallar va jihozlar uchun shkaflar.
Madaniyat xonalarining jihozlari: yorug'lik bo'limi - kunduzgi yorug'lik spektriga yaqin bo'lgan yorug'lik manbalari (3 dan 10 kLx gacha), haroratni (25+ - 2 ° C) va havo namligini (70%) tartibga solish uchun konditsioner, stendlar yetishtirilgan material bilan stendlar; qorong'u bo'linma - yorug'lik manbalaridan tashqari bir xil jihozlar bilan. Eksplantlarni ozuqaviy muhitda etishtirish uchun belgilangan harorat va havo namligi sharoitlarini aniq ushlab turadigan termostatlar yoki sovuq termostatlardan foydalanish tavsiya etiladi.
Biotexnologiya laboratoriyasida zarur shisha idishlar, asboblar va materiallar to'plami: o'lchov kolbalari, Erlenmeyer kolbalari, stakanlar, gradusli tsilindrlar, Petri idishlari, probirkalar, butilkalar, pipetkalar, shisha tayoqchalar, shisha va membrana filtrlari, lansetkalar (shu jumladan oftalmik, jarrohlik, anatomik ), qaychi, pinset, pichoqlar, ustara pichoqlari, kesish ignalari, spatulalar, qog'oz (o'rash, pergament, filtr qog'ozi), alyuminiy folga, paxta momig'i, doka, ip.
Hujayra va to'qimalarni in vitroda etishtirish uchun ozuqa muhitini tayyorlash.
O'simlik hujayralari va to'qimalarini o'stirish uchun muhitning tarkibiy qismlarini 6 ta asosiy guruhga bo'lish mumkin, bu odatda konsentrlangan zahira eritmalarini tayyorlash tartibini aks ettiradi: makroelementlar, mikroelementlar, temir manbalari, vitaminlar, uglerod manbalari, fitohormonlar.
O'simlik ekplantlarini etishtirish uchun barcha ozuqaviy muhitlar uchun asos mineral tuzlar aralashmasidir. Bular nitratlar, nitritlar, ammoniy tuzlari shaklidagi azotli birikmalar; fosfor - fosfatlar shaklida; oltingugurt - sulfatlar shaklida; shuningdek, eruvchan tuzlar K+, Na+, Ca2+, Mg2+. Temir xelatlar shaklida ishlatiladi [FeO4 yoki Fe2O4 + EDTA (etilendiamintetraasetik kislota) yoki uning natriy tuzi Na EDTA (Trilon B)] - o'simlik to'qimalari tomonidan so'rilishi uchun eng qulay shakl.
Azot, fosfor, oltingugurt organik birikmalar tarkibiga kiradi: oqsillar, yog'lar, nuklein kislotalar. Temir, rux, marganets, molibden, kobalt porfirinlar bilan birgalikda fotosintez pigmentlarining (xlorofill), oksidlanish-qaytarilish fermentlarining (katalaza, peroksidaza, polifenoloksidaza) makromolekulalarini hosil qiladi. Binobarin, bu birikmalarning barchasi hujayralar va to'qimalarda strukturaviy funktsiyani bajaradi. Shu bilan birga, K+, Na+, Ca2+, Cl–, H+ ionlari muhitning pH darajasini tartibga solish va hujayraning fiziologik gradientlarini (turgor, osmotik bosim, qutblanish) saqlash uchun zarurdir.
Biologik makromolekulalar uchun uglerod manbai sifatida, shuningdek, geterotrof to'qimalarni (kalli va suspenziyalar) o'stirishda uglevodlar 20-60 g / l konsentratsiyada ozuqa muhitiga qo'shiladi. Odatda bu disaxaridlar (saxaroza), monosaxaridlar (geksozalar: glyukoza va fruktoza, pentozalar: ksiloza va boshqalar). Polisaxaridlar ozuqaviy muhitda amalda qo'llanilmaydi. Faqat kraxmal, rafinoza (tabiiy trisaxarid) va sellobioza bo'lgan muhitda gidrolitik fermentlarni o'z ichiga olgan to'qimalarning (o'smaning) ma'lum turlari o'stiriladi.
Hujayradagi biokimyoviy reaktsiyalarni rag'batlantirish uchun biologik katalizatorlar qo'llaniladi - B vitaminlari: B1, B6, B12; C (askorbin kislotasi), PP (nikotinik kislota), mezoinositol (vitaminga o'xshash birikma).
Tiamin (B1) piruvat dekarboksilaza tarkibiga kiradi va uglevodlarni o'zgartirishda ishtirok etadi. Tiamin pirofosfat keto kislotalarning oksidlovchi dekarboksillanishi (piruvik va ketoglutar) fermentlarining bir qismidir va transketolazaning koenzimi (pentoza monofosfat yo'lining fermenti) hisoblanadi.
Fosfat esteri shaklidagi piridoksin (B6) aminokislotalarning dekarboksillanishi va transaminatsiyasi uchun fermentlarning bir qismidir.
Amid ko'rinishidagi nikotin kislotasi (NA) NAD va NADP dehidrogenazalarining bir qismi bo'lib, ular H+ donor-akseptor elektr transport zanjirini katalizlaydi (organik moddalar molekulalaridan H + ni olib tashlash).
To'qimalar madaniyatida morfogenez jarayonlarini boshqarish uchun o'sish va rivojlanishning biologik regulyatorlari - fitohormonlar kerak. Ushbu moddalar hujayralar va to'qimalarning differentsiatsiyasi va dedifferentsiyasiga ta'sir qiladi, gistogenezni boshlaydi, hujayra bo'linishi va cho'zilishini qo'zg'atadi, qarish va etilish jarayonlarida ishtirok etadi, hujayra kulturalarining o'sishi va rivojlanishini rag'batlantiradi yoki inhibe qiladi, jinsning shakllanishini belgilaydi. Biotexnologik tadqiqotlarda o'sish va rivojlanishni rag'batlantiruvchi gormonlar ko'proq qo'llaniladi: auksinlar, sitokininlar, gibberellinlar.
Oksinlar: IAA – -indolil-3-sirka kislotasi, IBA – indolil-3-butir kislotasi, NAA – -naftilsirka kislotasi, 2,4-D – 2,4-diklorfenoksiasetik kislota.
Sitokininlar: kinetin - 6-furfurilaminopurin, zeatin, NN-difeniluriya, 6-BAP - 6-benzilaminopurin.
Gibberellinlar: gibberel kislotasi.
Birlamchi kallusni qo'zg'atish uchun biologik qo'shimchalar sifatida siz o'simlik ekstraktlaridan (muhitning umumiy hajmining 10-15%) foydalanishingiz mumkin: hindiston yong'og'i suti (kokosning suyuq endospermi), pishmagan makkajo'xori donalaridan olingan ekstraktlar (afzallik davrida). sut pishganligi), sitokininlar - kinetin va zeatin (6-almashtirilgan aminopurinlar) va NN-difenilurea mavjud.
In vitro kultura suyuq va agar (qattiq) muhitdan foydalanadi. Suyuq muhitlar suspenziyalar, kalluslar, ajratilgan organlar va to'qimalar, qayta tiklangan o'simliklarni etishtirish uchun ishlatiladi. Shu bilan birga, eksplantlarni saqlash uchun filtr qog'ozidan yoki sintetik g'ovakli materiallardan tayyorlangan muhit - tayanchlar bo'lgan probirkalarga maxsus ko'priklar joylashtiriladi.
Agar muhiti dengiz o'tlarida joylashgan polisaxarid bo'lgan agar-agar asosida tayyorlanadi, u pH 5,6-6,0 da suv bilan jel hosil qiladi. ba'zan plomba va agar-agar o'rnini bosuvchi sifatida P10 va P200 poliakrilamid jellari (biojellar) ishlatiladi.
Sun'iy oziqlantiruvchi muhitlar uchun makro va mikrotuzlarning eritmalari oldindan tayyorlanadi va qayta-qayta qo'llaniladi. Bu bachadon (konsentrlangan) eritmalardir. Ular maxsus sharoitlarda saqlanadi: makro- va mikrotuzlar muzlatgichda 0...+4°C haroratda maydalangan tiqinlar bilan idishlarda; vitaminlar, fitohormonlar, fermentlar, o'simlik ekstraktlari - -20 ° C da tiqinlar bilan 5-10 ml kichik idishlarda (penitsilium shishalari).
Makro tuzlarning zahiraviy eritmalari odatda konsentratsiyadagi ishchi eritmalardan 10-40 marta, mikrotuzlardan 100-1000 marta, vitaminlardan 1000 marta oshadi.
Fitohormonlar eritmalarini ommaviy axborot vositalari bilan ishlashdan oldin darhol tayyorlash tavsiya etiladi.
Makro va mikro tuzlarning ona eritmasini tayyorlash uchun har bir tuz qizdirilganda alohida stakanda eritiladi, so'ngra drenajlanadi va kerakli hajmga sozlanadi. Sovutilgan mikrotuzlar aralashmasiga molibden tuzlarining eritmasi, so'l tuzlarga esa magniy tuzlari eritmasi qo'shiladi (cho'kmaning oldini olish uchun).
Kaltsiy xlorid va temir xelatining zaxira eritmalari (temir sulfat + EDTA yoki Na EDTA - Trilon B) boshqa tuzlardan alohida tayyorlanadi va saqlanadi.
Vitaminlarning konsentrlangan eritmalari quyidagicha tayyorlanadi: 10 marta tortilgan qismlar 10 ml distillangan suvda, har biri alohida eritiladi.
Fitohormonlar suvda yomon eriydigan moddalardir. Shuning uchun 100 mg modda avval oz miqdorda (0,5-2,0 ml) spirt (auksinlar, gibberellinlar), 0,5-1 n HCl yoki KOH (sitokininlar)da eritiladi, so'ngra to'liq eriguncha qizdiriladi (abtsiz kislota va kinetindan tashqari). ) va 100 ml hajmga keltiring (1 ml 1 mg moddani o'z ichiga oladi).
Jadvalda eng ko'p ishlatiladigan madaniyat vositalarining tarkibi ko'rsatilgan. Qoida tariqasida, yangi ob'ekt bilan ishlashni boshlaganda, tadqiqotchilar standart muhitning tarkibini o'zgartiradilar, ayniqsa organik komponentlarning konsentratsiyasi va to'plamini o'zgartiradilar.

Madaniy ommaviy axborot vositalarining alohida misollari.

Murashige-Skoog muhiti uchun stok eritmalarini tayyorlash.

Element raqami.	Atrof-muhit komponenti	Moddaning miqdori
	Makro tuzlarning zaxira eritmasi (1 litr eritma uchun g)
1. 2. 3. 4.	KNO3 NH4NO3 KH2PO4 MgSO4. 7H2O yoki MgSO4 suvsiz	38 33 3.4 7.4 3.6
5.	CaCl2. 2H2O yoki CaCl2 suvsiz	8.8 6.65
	Mikro tuz eritmasi (100 ml eritma uchun mg)
6. 7. 8. 9. 10. o'n bir. 12.	Na2MoO4. 2H2O CuSO4. 5H2O H3BO3 MnSO4. 5H2O yoki MnSO4. 4H2O ZnSO4. 7H2O KJ CoCl2. 6H2O	25 2.5 620 2410 2230 860 83 2.5
13.	FeSO4 Na2 EDTA	557 745

Hujayra va to'qimalar madaniyati uchun Murashige-Skoog (MS) muhiti

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaCl2 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl Nikotinik kislota Mezoinositol Glitsin saxaroza	50 ml/l 1 ml/l 5 ml/l 50 ml/l 0,1 mg/l 0,5 mg/l 0,5 mg/l 100 mg/l 2 mg/l 30 g/l
pH 5,6-5,8

Kultiviro uchun o'zgartirilgan Murashige-Skoog ozuqa muhitikartoshka apikal meristemalarini hosil qilish

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaCl2 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl B12 vitamini Nikotinik kislota Foliy kislotasi Mezoinositol Kazein gidrolizat Adenin Pantotenat Ca Riboflavin Biotin Faollashgan uglerod GK Kinetin saxaroza Glyukoza Agar-agar	50 ml/l 1 ml/l 5 ml/l 50 ml/l 1 mg/l 1 mg/l 0,015 mg/l 2 mg/l 0,5 mg/l 100 mg/l 1 g/l 40 mg/l 10 mg/l 0,5 mg/l 1 mg/l 10 g/l 2 mg/l 0,5 mg/l 20 g/l 20 g/l 7 g/l
pH 5,7-5,8

Mikroraz uchun o'zgartirilgan Murashige-Skoog ozuqa muhitikartoshkani surgun so'qmoqlari bilan ko'paytirish

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaCl2 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl Nikotinik kislota Adenin Kinetin Gibberel kislotasi Pantotenat Ca	50 ml/l 1 ml/l 5 ml/l 50 ml/l 1 mg/l 1 mg/l 2 mg/l 40 mg/l 0,5 mg/l 2 mg/l 10 mg/l
Faollashgan uglerod saxaroza Agar-agar	10 g/l 30 g/l 7 g/l
pH 5,8

Gamborg-Eveleg muhiti uchun stok eritmalarini tayyorlash.

Element raqami.	Atrof-muhit komponenti	Moddaning miqdori
	Makro tuzlarning zaxira eritmasi (1 litr eritma uchun g)
1. 2. 3. 4.	KNO3 (NH4)2SO4 MgSO4. 7H2O NaH2PO4. H2O	60 2.68 10.0 3.0
5.	CaCl2. 2H2O	3.0
	Mikro tuz eritmasi (100 ml eritma uchun mg)
6. 7. 8. 9. 10. o'n bir.	Na2MoO4. 2H2O CuSO4. 5H2O H3BO3 MnSO4. H2O ZnSO4. 7H2O CoCl2. 6H2O	25 7.5 300 1000 200 2.5
12.	FeSO4 Na2 EDTA	557 745

Gamborg-Eveleg muhiti

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaCl2 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl Nikotinik kislota Mezoinositol 2,4-D saxaroza	50 ml/l 1 ml/l 5 ml/l 50 ml/l 10 mg/l 1 mg/l 1 mg/l 100 mg/l 2 mg/l 20 g/l
pH 5,8

Tup ekinlari uchun modifikatsiyalangan Murashige-Skoog ozuqa muhitikartoshkani chaqirish.

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaCl2 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl Nikotinik kislota Askorbin kislotasi Kinetin saxaroza Agar-agar	50 ml/l 1 ml/l 5 ml/l 50 ml/l 1 mg/l 0,5 mg/l 0,5 mg/l 1 mg/l 0,5 mg/l 50 g/l 7 g/l
pH 5,8-6,0

Blades muhiti uchun stok eritmalarini tayyorlash.

Element raqami.	Atrof-muhit komponenti	Moddaning miqdori
	Makro tuzlarning zaxira eritmasi (1 litr eritma uchun g)
1. 2. 3. 4. 5.	KNO3 KCl KH2PO4 NH4NO3 MgSO4. 7H2O yoki MgSO4 suvsiz	20 1.3 6 20 1.44 0,7
6.	Ca(NO3)2. 4H2O	10.28
	Mikro tuz eritmasi (100 ml eritma uchun mg)
7. 8. 9. 10.	H3BO3 MnSO4. H2O yoki MnSO4. 5H2O ZnSO4. 7H2O KJ	160 440 627 150 80
o'n bir.	FeSO4 Na2 EDTA	557 745

Kallusogenez uchun pichoqlar muhiti.

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaNO3 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl Nikotinik kislota Askorbin kislotasi Mezoinositol 2,4-D saxaroza Agar-agar	50 ml/l 1 ml/l 5 ml/l 50 ml/l 0,5 mg/l 0,5 mg/l 1 mg/l 1 mg/l 0,1 g/l 2 mg/l 20 g/l 7 g/l
pH 6,0

Somatik ebriogenez uchun pichoqlar muhiti.

Madaniy muhitning tarkibiy qismlari
Makro tuzli eritma Mikro tuz eritmasi Fe-xelat CaNO3 Tiamin-HCl Piridoksin-HCl Nikotinik kislota Askorbin kislotasi Mezoinositol IUC Kinetin ABK saxaroza Agar-agar	50 ml/l 1 ml/l 2,5 ml/l 50 ml/l 0,5 mg/l 0,5 mg/l 1 mg/l 1 mg/l 0,1 g/l 0,2 mg/l 0,2 mg/l 0,05 mg/l 20 g/l 7 g/l
pH 6,0

Biotexnologiyada sterilizatsiya usullari

In vitro hujayra va to'qimalar madaniyati bilan barcha ishlar steril (aseptik) sharoitda steril qutida yoki laminar oqim qopqog'ida, steril asboblar bilan, steril idishlarda, steril oziqlantiruvchi muhitda amalga oshiriladi. Axborot vositalarida bepushtlik buzilgan taqdirda, mikroorganizmlar (zamburug'lar, bakteriyalar) yaxshi rivojlanadi, muhit tarkibini buzadi va o'simlik eksplantlarining o'sishini bostiradi.
Ko'pincha xonalarni sterilizatsiya qilish uchun (to'qimalarni transplantatsiya qilish uchun qutilar, madaniyat xonalari) ultrabinafsha nurlanish 0,5-2 soat davomida (xonaning maydoniga qarab) qo'llaniladi. Nurlangan xonada ish bakteritsid lampalar o'chirilgandan 15-20 minut o'tgach boshlanadi, chunki ultrabinafsha nurlanish ta'sirida havodagi ikki atomli kislorod odamlar uchun zaharli gaz bo'lgan uch atomli ozonga aylanadi. Maksimal sterillikka erishish uchun UV bilan ishlov berishdan oldin barcha sirtlar yuvish vositalari, suv va xlor o'z ichiga olgan moddalarning eritmalari bilan yaxshilab yuviladi va laminar qutining sirtlari 96% spirt bilan ishlanadi.
Idishlar, xalatlar, paxta, qog‘oz, distillangan suv, oziq moddalar sterilizatsiya qilinayotgan material hajmiga qarab avtoklavlarda 1-2 atmosfera bug‘ bosimi va 120°S haroratda 20-60 minut davomida sterillanadi.
Avtoklavlashdan oldin kolbalar, o'rta, paxta momig'i, qog'oz va xalatlar selofan qog'ozga o'raladi yoki shishalarga solinadi.
Metall asboblarni avtoklavlash mumkin emas, chunki bug 'ta'sirida zang paydo bo'ladi. Shuning uchun ular quruq issiqlik bilan 170-250 ° S haroratli termostatlarda 1-2 soat davomida yoki burnerning ochiq olovida sterilizatsiya qilinadi, bu ham samarali emas.
O'simliklar ekplantlarini sterilizatsiya qilish usullari
Kallus va o'simta madaniyati uchun eksplantlar olish, mikroklonal ko'paytirish va gormonal tartibga solishni o'rganish uchun steril ko'chatlar qo'llaniladi. Nihol uchun urug'lar suvga yoki ozuqaviy muhitga sepiladi.
Sterilizatsiya qilishdan oldin o'simlik ob'ektlari oqava suv bilan, ba'zan yuvish vositalari bilan yaxshilab yuviladi va ortiqcha to'qimalardan tozalanadi. Ildiz ekinlari va ildizlardan po'stlog'i olib tashlanadi, po'stlog'i kurtaklardan chiqariladi va kurtaklardan qoplama tarozilari chiqariladi.
O'simlik eksplantlari tarkibida faol xlor (xloramin, Ca va Na gipoxlorit, sublimat), brom (bromli suv), vodorod peroksid, spirt, kumush nitrat, diatsid, antibiotiklar bo'lgan moddalar eritmalari bilan sterilizatsiya qilinadi.
Etil spirti ko'pincha u bilan materialning sirtini artib yoki materialni bir necha soniya davomida mutlaq spirtga botirib, oldindan sterilizatsiya qilish uchun ishlatiladi. Ba'zida bunday sterilizatsiya etarli bo'ladi, u mevalar, urug'lar, kurtaklar va tuxumdonlar bilan ishlashda qo'llaniladi.
Kaltsiy gipoxlorit (oqartirgich) 5-8 daqiqa davomida kurtaklar, tuxumdonlar, gullar, urug'lar va asirlarni davolash uchun 5-7% eritma shaklida qo'llaniladi.
Natriy gipoxlorit 1-20 daqiqa davomida har qanday eksplantlarni davolash uchun 0,5-5% eritma sifatida ishlatiladi. Ushbu modda hujayrali zahardir, shuning uchun sterilizatsiya vaqti va konsentratsiyasi eksperimental ravishda tanlanadi. Masalan: ajratilgan embrionlar uchun 2-3% li eritmasidan 10-15 minut, quruq urug’lar uchun esa 1 soat davomida 3-5% li eritmasidan foydalaning. Natriy gipoxlorit qoldiqlari avval 0,01 n HCl bilan chiqariladi va keyin avtoklavlangan distillangan suv bilan 8 marta yuviladi.
Xloramin 1-6% konsentratsiyada ishlatiladi. Anterlar va yosh embrionlar 1-3 daqiqa, quruq urug'lar - 30-60 daqiqa davomida davolanadi, keyin steril distillangan suv bilan 2-3 marta yuviladi.
Sublimat zaharli moddadir va saqlash vaqtida ham, alohida ob'ektlar uchun konsentratsiyalarni tanlashda ham alohida e'tibor talab qiladi. Embrionlarni sterilizatsiya qilish uchun 1-3 daqiqa davomida 0,1% eritma, ildiz va ildiz ekinlari uchun - 10-20 daqiqagacha foydalaning.
Faol xlorni o'z ichiga olgan eritmalar bir marta ishlatiladi va ishdan oldin darhol tayyorlanadi.
Diatsid 0,2% li eritmada ildizlarni, urug'larni, bo'laklarni, to'qimalarni, apikal meristemalarni, izolyatsiya qilingan embrionlarni va anterlarni sterilizatsiya qilish uchun ishlatiladi. Diatsid 330 mg etanolmerkurik xlorid va 660 mg setilpiridinyum xloridni issiq suvda (330 ml) alohida eritib tayyorlanadi, keyin ularni aralashtiramiz va suyuqlik hajmini 1 litrga keltiramiz, bir necha tomchi Tween-80 yuvish vositasi qo'shamiz; Qorong'i joyda mahkam yopiq kolbada saqlang.
Formalin yoki fenolning 5% li eritmasi ham ishlatiladi. Antibiotiklar bakteriyalar bilan kasallangan o'simlik materialini sterilizatsiya qilish uchun ishlatiladi (toj o't o'simtasi to'qimasi). Ko'pincha streptomitsin va tetramitsin 10-80 mg/l, ampitsillin 200-400 mg/l, levomisin, kanomisin va boshqalar ishlatiladi. Urug'larni gazlar (propilen oksidi) bilan davolash mumkin.
Sterilizatsiyani uch bosqichga bo'lish mumkin:
- asl o'simlik materialini oldindan sterilizatsiya qilish. Qayta ishlash shartlari ob'ektga qarab farq qiladi. Saqlangan a'zolar musluk suvi bilan yuviladi, poya, ildiz yoki barg bo'laklari ham oqayotgan suv bilan yuviladi va spirtga solinadi. Urug'larni oldindan sterilizatsiya qilish ifloslanish darajasiga qarab uzoqroq protsedura hisoblanadi.
- haqiqiy sterilizatsiya. Oldindan sterilizatsiya qilingan to'qimalar va organlar sterilizatsiya eritmasiga joylashtiriladi. Sterilizatsiya jarayonining zaruriy sharti ob'ektning etarli darajada tozaligini ta'minlash va uning hayotiyligini saqlab qolishdir.
- Poststerilizatsiya. Ob'ektni sterilizatsiya eritmasidan distillat qismlari bilan yuvish.