Singampattiana bedd leaves in alloxan induced diabetic rats



Yüklə 270,51 Kb.
Pdf görüntüsü
tarix07.08.2017
ölçüsü270,51 Kb.

 

 

ANTIOXIDANT, ANTIHYPERLIPIDAEMIC AND ANTIDIABETIC ACTIVITY OF EUGENIA 



SINGAMPATTIANA BEDD LEAVES IN ALLOXAN INDUCED DIABETIC RATS 

Research Article

 

 



S. MARY JELASTIN KALA

1

, P.S. TRESINA

2

 AND V.R. MOHAN

2*

 

1

Department of Chemistry, St. Xavier’s College, Palayamkottai, 

2

Ethnopharmacology Unit, Research Department of Botany, 

V.O.Chidambaram College, Tuticorin-628008, Tamil Nadu, India. Email: vrmohan_2005@yahoo.com 

Received: 23 Jan 2012, Revised and Accepted: 21 Mar 2012

 

ABSTRACT 

The ethanol extract of  Eugenia  singampattiana  Bedd (Family: Myrtaceae) leaf was investigated for its antioxidant, antihyperlipidaemic and 

antidiabetic effect in Wistar Albino rats. Diabetes was induced in Albino rats by administration of alloxan monohydrate (150mg/kg, i.p). The ethanol 

extracts of E. singampattiana at a dose of 150 and 300mg/kg of body weight were administered at single dose per day to diabetes induced rats for a 

period of 14 days. The effect  of ethanol extract of E.  singampattiana  leaf extract on blood glucose, plasma insulin, creatinine, glycosylated 

haemoglobin, urea serum lipid profile [total cholesterol (TR), triglycerides (TG), low density lipoprotein – cholesterol (LDL-C), very low density 

lipoprotein – cholesterol (VLDL-C), high density lipoprotein – cholesterol (HDL-C) and phospholipid (PL)] serum protein, albumin, globulin, serum 

enzymes [serum glutamate pyruvate transaminases (SGPT), and serum glutamate oxaloacetate transaminases (SGOT), and alkaline phosphatase 

(ALP)], lipoprotein peroxidation (LPO) antioxidant enzymes (catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), reduced glutathione (GSH) and 

glutathione peroxidase (GPx) were measured in the diabetic rats. The ethanol extract of Eugenia singampattiana leaf elicited significant reductions 

of blood glucose (P<0.05), lipid parameters except HDL-C, serum enzymes and significantly increased HDL-C and antioxidant enzymes. The extracts 

also caused significant increase in plasma insulin (P<0.05) in the diabetic rats. From the above results, it is concluded that ethanol extract of Eugenia 

singampattiana 

possesses significant antidiabetic, antihyperlipidaemic and antioxidant effects in alloxan induced diabetic rats. 



Keywords: 

Antioxidant, Antihyperlipidaemic, Antidiabetic, E. singampattiana, Alloxan. 



 

INTRODUCTION 

Diabetes mellitus is a metabolic disorder characterized by 

hyperglycemia resulting from defects in insulin secretion, insulin 

action or both

1

. The presence of diabetes mellitus confers increased 



risk of many devastating complications such as cardiovascular 

diseases (CVD), peripheral vascular disease (PVD), complications 

such as coronary artery disease (CAD), stroke, neuropathy, renal 

failure, retinopathy amputations and blindness

2, 3

.  Several drugs 



such as biguanides and sulfonylureas are presently available to 

reduce hyperglycaemic in diabetes mellitus. The main disadvantages 

of the currently available drugs are that,  they have to be given 

throughout the life and produce side effects

4

. Medicinal plants and 



their bioactive constituents are used for the treatment of diabetes 

mellitus throughout the world. Although several medicinal plants 

have gained importance for the treatment of diabetes, many remain 

to be scientifically investigated

5

E. singampattiana 

Bedd belong to the family Myrtaceae. It is 

commonly known as  “Kattukorandi” by  Kanikkar  tribals of 

Agasthiarmalai, Biosphere Reserve, Western Ghats, Tamil Nadu, 

India. The paste prepared from the leaf of E. singampattiana is given 

to treat asthma and giddiness. Paste prepared from equal quantity of 

leaves and flowers is consumed by Kanikkar  tribals to cure body 

pain and throat pain. Paste prepared from equal quantity of leaves, 

flowers and tender fruits are consumed by the Kanikkars  to relief 

from leg sores and rheumatism. Paste prepared from equal quantity 

of stems, leaves and flowers is consumed with palm sugar to get 

relief from gastric complaints

6

.  The ethanol extract  of  E. 



singampattiana

 leaf has been reported for its antitumour activity

7

MATERIALS AND METHODS 

. In 


view of the above medicinal properties, the present study was 

designed to investigate  the antidiabetic, antihyperlipidaemic and 

antioxidant activity of ethanol, extract of E.  singampattiana  leaf in 

alloxan induced diabetic rats. 



Plant Material 

The leaves of Eugenia singampattiana  Bedd were freshly collected 

from the well grown healthy plants inhabiting the natural forests of 

Karaiyar, Agasthiarmalai Biosphere Reserve, Western Ghats, Tamil 

Nadu. The plant were  identified and authenticated in  Botanical 

Survey of India, Southern Circle, Coimbatore, Tamil Nadu, India. A 

voucher specimen was deposited in Ethnopharmacology Unit, 

Research Department of Botany, V.O.Chidambaram College, 

Tuticorin, Tamil Nadu.  

Preparation of plant extract for phytochemical screening and 

antidiabetic studies 

The E. singampattiana leaves were shade dried at room temperature 

and the dried leaves were powdered in a Wiley mill. Hundred grams 

of powdered E. singampattiana leaves was packed in a Soxhlet 

apparatus and extracted with ethanol The extract were subjected to 

qualitative test for the identification of various phytochemical 

constituents as per  the standard procedures

8, 9, 10


Animals 

.The ethanol 

extracts were concentrated in a rotary evaporator. The concentrated 

ethanol extract were used for antidiabetic studies. 

Normal healthy male Wistar albino rats (180-  240g) were housed 

under standard environmental conditions at temperature (25±2º C) 

and light and dark (12: 12 h). Rats were fed with standard pellet diet 

(Goldmohur brand, MS Hindustan lever Ltd., Mumbai, India) and 

water ad libitum

Acute Toxicity Study 

Acute oral toxicity study was performed as per OECD – 423 guidelines 

(acute toxic class method), albino rats (n=6) of either sex selected by 

random sampling were used for acute toxicity study 

11

Induction of Experimental Diabetes 

. The animals 

were kept fasting for overnight and provided only with water, after 

which the extracts were administered orally at 5mg/kg body weight 

by gastric intubations and observed for 14 days. If mortality was 

observed in two out of three animals, then the dose administered was 

assigned as toxic dose. If mortality was observed in one animal, then 

the same dose was repeated again to confirm the toxic dose. If 

mortality was not observed, the procedure was repeated for higher 

doses such as 50,100, and 2000 mg/kg body weight. 

Rats were induced diabetes by the administration of simple 

intraperitoneal dose of alloxan monohydrate (150 mg/kg)

  12

. Two 


days after alloxan injection, rats screened for diabetes having 

glycosuria and hypoglycemia with blood glucose level of 200-260 

mg/100 ml were taken for the study. All animals were allowed free 

International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 

ISSN- 0975-1491 

 

 



 

 

    



      Vol 4, Suppl 3, 2012 

A

A



c

c

a



a

d

d



e

e

m



m

i

i



c

c

 



 

S

S



c

c

i



i

e

e



n

n

c



c

e

e



s

s

 



 

Mohan et al. 

Int J Pharm Pharm Sci, Vol 4, Suppl 3, 412-416

 

413 



access to water and pellet diet and maintained at room temperature 

in plastic cages. 



Experimental Design 

In the present investigation, a total of 30 rats (24 diabetic surviving 

rats and 6 normal rats) were taken and divided into five groups of 6 

rats each. 

Group I: Normal untreated rats 

Group II: Diabetic control rats 

Group III: Diabetic rats given ethanol extract of E.  singampattiana 

leaf (150mg/kg body weight) 

Group IV: Diabetic rats given ethanol extract of E.  singampattiana 

leaf (300mg/kg body weight) 

Group V: Diabetic rats given standard drug glibenclamide 

(600mg/kg body weight). 



Biochemical analysis 

The animals were sacrificed at the end of experimental period of 14 

days by decapitation. Blood was collected, sera separated by 

centrifugation at 3000g for 10 minutes. Serum glucose was 

measured by the O-toluidine method

13

. Insulin level was assayed by 



Enzyme Linked Immunosorbant Assay (ELISA) kit

14

. Urea estimation 



was carried  out by the method of Varley

15

; serum creatinine was 



estimated by the method of Owen et al

16

. Glycosylated haemoglobin 



(HBA

1

C)  estimation was carried out by a modified colorimetric 



method of Karunanayake and Chandrasekharan

17

.  Serum total 



cholesterol (TC)

 18


, total triglycerides (TG)

19

, low density lipoprotein 



cholesterol (LDL-C), very low density lipoprotein cholesterol (VLDL- 

C)

20



, high density lipoprotein cholesterol (HDL-C)

21

  and 



phospholipids

22 


were analyzed. Serum protein

23

 and serum albumins 



was determined by quantitative colorimetrically method by using 

bromocresol green. The total protein minus the albumin gives the 

globulin, serum glutamate pyruvate transaminase (SGPT) and serum 

glutamate oxaloacetate  transaminase (SGOT) was measured 

spectrophotometrically by utilizing the method of Reitman and 

Frankel


24

. Serum alkaline phosphatase (ALP) was measured by the 

method of King and  Armstrong 

25

. Catalase (CAT)



26

, superoxide 

dismutase (SOD)

27

, lipid peroxidation (LPO) 



28

, reduced glutathione 

(GSH)

29

  and  glutathione peroxidase (GPx) 



30

The data were analyzed using student’s t-test statistical methods. 

For the statistical tests a p values of less than 0.01 and 0.05 was 

taken as significant. 

  were analyzed in the 

normal, diabetic induced and drug treated rats. 



Statistical Analysis 

RESULTS AND DISCUSSION 

The phytochemical screening of ethanol extract of E. singampattiana 

leaf revealed the presence of alkaloid, catechin, coumarin, tannin, 

saponin, steroid, flavonoid, phenol, sugar, glycoside, xanthoprotein 

and fixed oil. Acute toxicity study revealed the non-toxic nature of 

the ethanol extract of E.  singampattiana  leaf. Table 1 shows the 

levels of blood glucose, plasma insulin, urea,  creatinine and 

glycosylated haemoglobin of normal, diabetic rats and drug treated 

rats.  The alloxan induced diabetic rats elicited significant rise in 

blood glucose from 69.50 to 201.00mg/dl (p<0.05) and a significant 

decrease in plasma insulin level from 24.50 to 5.40 (p<0.01). On the 

contrary, diabetic rats treated with ethanol extract of E. 



singampattiana

  leaf exhibited decrease in blood glucose and 

increase in plasma insulin significantly at a dose of 150 mg/kg and 

300 mg/kg body weight. It was observed that ethanol extract of E. 



singampattiana

  reversed these effects in diabetic animals. The 

possible mechanism by which ethanol extract brings about its 

hyperglycemic action may be by induction of pancreatic insulin 

secretion  from  β  cells  of  islets  of  langerhans  or  due  to  enhanced 

transport of blood glucose to peripheral tissue

31

. Earlier many plants 



have been studied for their hypoglycemic and insulin release 

stimulatory effects

32, 33, 34, 35, 36, 37, 38,39

A significant elevation in serum constituents, urea and creatinine 

were observed in alloxan induced diabetic rats (Group II), when 

compared to control rats. The ethanol extracts of E. singampattiana 

leaves were administered orally (150 mg/kg body weight- Group III 

and 300mg/kg body weight-  Group IV) to rats for fourteen days, 

reversed the urea and creatinine level to near normal. The 

administration of glibenclamide (Group V) also decreased the levels 

of urea and creatinine to some extent. Alloxan is taken as indications 

of an abnormal glomerular fraction  where a simple injection of 

cisplation at a dose of 5mg/kg body weight in rabbits caused a 

marked reduction in the glomerular filtration rates, which was 

accompanied by an increase in the creatinine level, indicating the 

induction of acute renal failure. It is confirmed that there is a 

significant increase in serum creatinine in albino rats 14 days after 

alloxan administration. The present results show that, the treatment 

with ethanol extract of E.  singampattiana  leaf was effective in 

preventing alloxan induced increase in serum creatinine level when 

compared with the control. Alloxan induced diabetic rats showed 

significant increase (p<0.05) glycosylated haemoglobin (HBA

. 

1

C) 



level compared with normal rats. The ethanol extract of E. 

singampattiana

  leaf treated rats showed a significant decrease 

(p<0.05) in the content of glycosylated haemoglobin. Glycosylated 

haemoglobin determinations are self monitoring of blood glucose 

therefore play an important complementary roles for the 

management of diabetes mellitus

40

 



Table 1: Effect of ethanol extracts of E. singampattiana leaves on the serum insulin, glucose, urea, creatinine and 

HBA

1

Parameter 



C level of normal, 

diabetic induced and drug treated adult albino rats. 

Insulin (MIu/ml) 

Glucose (mg/dl) 

 Urea (mg/dl) 

Creatinine (mg/dl) 

Glycosylated Hb (%) 

Group I 


24.50±1.4 

69.50±1.2 

11.50±1.9 

0.61±0.8 

3.60±0.05 

Group II 

05.40±0.6** 

201.00 ±11.2* 

39.50±5.6* 

1.72±0.7 

12.50±1.1* 

Group III 

10.90 ±0.7*

103.50±4.6* 

a

 

28.40 ±2.1* 



0.72 ± 0.4 

9.10±0.91* 

Group IV 

19.20±0.9* 

81.60±5.4*

14.20±5.6

a

 

0.69±0.7 



a

 

8.30±0.8* 



Group V 

22.50±0.8* 

91.50±6.9

12.70±1.9

aa

 

0.81±0.5 



a

 

4.90±0.7 



Each value is SEM of 6 animals. Comparison made between normal control to diabetic control and drug treated groups * p < 0.05;**p<0.01 and 

comparison made between diabetic control to drug treated groups 

a

p<0.05; 



aa

 

p<0.01 



The levels of serum protein, albumin and globulin of control, 

alloxan induced diabetic rats and drug treated rats were 

presented in Table 2.  A significant reduction in serum protein, 

albumin and globulin were observed in alloxan induced diabetic 

rats (Group II) when compared to control (Group I) and 

glibenclamide treated rats (Group V). On administration of 

ethanol extract of  E.  singampattiana  to the diabetic rats, the 

levels of protein, albumin and globulin were found to be restored 

in normal. These results were in accordance with the effects of 

Wattakaka volubilis

 

36



,  Senna auriculata

41

  and  Pterocarpus 



marsupium

 

37



Table 2 summarized the effect of alloxan on the activity of the 

hepatic marker enzymes in serum. In the present study, the levels of 

SGPT and SGOT in alloxan induced diabetic rats were elevated. It 

may be due to leaking out of enzymes from the tissues and migrating 

into the circulation by the adverse effect of alloxan 

 in diabetic rats. 

34

. AST and ALT 



were used as markers to assess the extent of liver damage in 

streptozotocin induced diabetic rats

42

.  In this study, the ethanol 



extract of E. singampattiana regulated the activity of SGPT and SGOT 

in liver of rats intoxicated with alloxan. The effect of glibenclamide 

on the recovery of hepatic enzyme activity in serum was very similar 

to that of the earlier study

43



Mohan et al. 

Int J Pharm Pharm Sci, Vol 4, Suppl 3, 412-416

 

414 



Table 2: Effect of ethanol extracts of E. singampattiana leaves on the serum protein, albumin, globulin, SGOT, SGPT and ALP level of 

normal, diabetic induced and drug treated adult albino rats 

Parameter 

Protein (g/dl) 

Albumin (g/dl) 

Globulin(g/dl) 

SGPT (u/l) 

SGOT (u/l) 

ALP (u/l) 

Group I 


8.94±0.11 

4.14±0.64 

4.87±0.11 

19.20±3.2 

21.40±3.3 

164.55±5.4 

Group II 

6.51±0.71* 

3.91±0.35 

2.65±0.08* 

35.40±6.2* 

35.30±5.9* 

196.65±3.4 

Group III 

6.11±0.43* 

3.91±0.24 

3.21±0.02 

32.40±5.1 

25.40±5.9 

172.40±5.4 

Group IV 

7.14±0.30 

4.06±0.19 

4.28±0.04 

26.30±4.8 

24.50±4.2 

162.53±7.2 

Group V 


7.94±0.30* 

4.11±0.32 

3.83±0.04 

16.50±4.8* 

28.40±2.2 

147.33±5.7 

Each value is SEM of 6 animals. Comparison made between normal control to diabetic control and drug treated groups * 

p

 

The restorations of SGPT and SGOT to their respective normal levels 



after treatment with both glibenclamide and ethanol extract of E. 

singampattiana

, further strengthen the antidiabegenic effect of this 

extract. Moreover, SGPT and SGOT levels also act as indicators of 

liver function and restoration of normal levels of these parameters 

indicate normal functioning of liver. Since the alloxan can also affect 

the liver by free radical mechanism. 

 < 0.05 

In addition to the assessment of SGPT and SGOT levels during 

diabetes the measurement of enzymatic activities of 

phosphatases such as acid phosphatase (ACP) and alkaline 

phosphatase (ALP) is of clinical and toxicological importance as 

changes in their activities are indicative of tissue damage by 

toxicants. In the present study, serum ALP increased in alloxan 

induced diabetic rats (Table 2). Elevated level of this enzyme in 

diabetes may be due to extensive damage to liver in the 

experimental animal by alloxan. Treatment with ethanol extract 

of E. singampattiana in alloxan induced diabetic rats produces a 

decline in ALP level. 



 

Table 3: Effect of ethanol extracts of E. singampattiana leaves on the serum lipid profiles of normal, diabetic induced and drug treated 

adult albino rats 

Parameter 

TC (mg/dl) 

TG(mg/dl) 

LDL-C (mg/dl) 

VLDL (mg/dl) 

HDL (mg/dl) 

PL (mg/dl) 

Group I 


104.51±3.56 

88.51±2.84 

52.59±2.05 

17.70±1.22 

34.21±0.52 

161.01±13.91 

Group II 

184.53±8.42* 

206.55±8.41*** 

116.69±6.25* 

41.31±3.45* 

26.53±3.84* 

232.23±12.17* 

Group III 

156.23±5.91* 

182.53±6.42* 

91.56±6.27* 

36.50±2.12* 

28.16±3.22 

207.04±15.47* 

Group IV 

122.51±4.83 

119.33±5.8** 

65.41±3.25 

23.86±2.33* 

31.23±5.38 

174.83±12.33 

Group V 


113.56±4.52 

109.53±7.3* 

62.34±4.12 

a

 



21.90±1.98*

 29.31 ±4.23 

a

 

169.06±13.84



aa

 

Each value is SEM of 6 animals. Comparison made between normal control to diabetic control and drug treated groups * p < 0.05;**p<0.01 *** 



p

<0.001 and comparison made between diabetic control to drug treated groups 

a

p<0.05 ;



aa

 

 p<0.01  



The levels of serum lipid profile, total cholesterol (TC), triglycerides 

(TG), LDL-C, VLDL-C and HDL-C in control, diabetic induced and 

drug treated rats were presented in Table 3. Alloxan induced rats 

showed significant increase in serum lipid profiles except HDL-C 

when compared with normal rats. The glibenclamide (Group V) and 

ethanol extract of E. singampattiana (Group III and IV) treated rats 

showed a significant decrease in the content of lipid profiles when 

compared with diabetic induced rats. Similarly HDL-C level 

decreased in alloxan induced diabetic  rats when compared to 

normal rats. On administration of  ethanol extract of E. 



singampattiana

 and glibenclamide to the diabetic rats, HDL-C level 

was found to be restored to normal. The level of serum lipid profiles 

are usually raised in diabetic rats in the present study and such 

elevation represents risk factor for coronary heart diseases 

44

. The 



hypolipidemic effect may be due to inhibition of fatty acid 

synthesis

45

. In normal metabolism insulin activates the enzyme 



lipoprotein lipase and hydrolyses triglycerides and the deficiency in 

insulin results in inactivation of these enzymes thereby causing 

hypertriglyceridemia. The significant reduction of serum lipid levels 

in diabetic rats after E.  singampattiana  treatment may be directly 

attributed to improvements in insulin levels. Phospholipids are 

present in cell membrane and make up vast majority of the surface 

lipoprotein forming a lipid bilayer that acts as an interface with both 

polar plasma environment and non-polar lipoprotein of lipoprotein 

core 

46

. Increased phospholipids levels in tissues were reported by 



Venkateswaran  et al 

47

; Pari  and Satheesh



48

 

  in streptozotocin 

diabetic rats. Administration of ethanol extract of E. singampattiana 

leaf and glibenclamide decreased the levels of phospholipids. 



Table 4: Effect of ethanol extracts of E. singampattiana leaves on the LPO and activities of SOD, CAT, GPX and GSH enzymes in the plasma 

of normal, diabetic induced, and drug treated adult albino rats 

Parameter 

LPO (mmole/dl) 

SOD (unit x/mg protein) 

CAT (unit y/mg protein) 

GPX (unit z/mg protein) 

GSH (mg/dl) 

Group I 


0.83± 0.34 

6.93± 0.74 

1.49± 0.31 

7.36± 0.81 

91.54± 3.05 

Group II 

3.11± 0.98* 

4.56± 0.54** 

0.96± 0.88* 

3.23± 0.92** 

27.31± 2.86** 

Group III 

1.56± 1.19* 

5.21± 0.42 

1.36± 0.09* 

6.71± 0.96* 

32.56± 1.35* 

Group IV 

1.31± 0.98 

6.32± 0.15

1.43± 0.31 

a

 



7.23± 0.71 

86.14± 1.85* 

Group V 

0.89± 0.14

7.99± 0.33 

a

 



0.84± 0.14 

8.03± 0.65

87.40± 5.18

a

 



a

 

Each value is SEM of 6 animals. Comparison made between normal control to diabetic control and dry treated groups. * p < 0.05;**p<0.01 and 



comparison made between diabetic control to drug treated groups 

a

 p<0.05. x; One unit of SOD is defined as the enzyme concentration which gives 



50% inhibition of NBT reduction in one minute. y- One unit of CAT is defined as the μ mole of hydrogen peroxide consumed per minute. z- One unit 

of GPx is defined as the μ g of glutathione

The results (Table 4) showed increased lipid peroxidation (LPO) of 

alloxan induced diabetic rats. Earlier studies have reported that, 

there was an increased lipid peroxidation in liver, kidney and brain 

of diabetic rats 

 consumed per minute. 

49, 50


. In the present study, an increase in the levels of 

LPO (p<0.05) was found and these levels were significantly reduced 

after the supplementation of the ethanol extract of E. singampattiana 

and glibenclamide. This indicates  that plant extracts inhibit 

oxidative damage due to the antiperoxidative effect of ingredients 

present in ethanol extract of E.  singampattiana. This could be 

correlated with previous study reported that  Cassia auriculata 

flower


35

,  Scoparia dulcis 

51

,  Wattakaka volubilis 



36

,  Senna 



auriculata

39

and Pterocarpus marsupium 



37

The levels of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), 

glutathione peroxidase (GPx) and reduced glutathione (GSH) (Table 

4) were significantly (p<0.05) reduced in alloxan induced rats. These 

adverse  changes  were reversed to near normal values in ethanol 

extract of E. singampattiana leaf treated. It is well known that CAT, 

SOD and GPx play an important role as protective enzymes against 

free radical formation in tissues 

52

. Enzymatic antioxidant such as 



Mohan et al. 

Int J Pharm Pharm Sci, Vol 4, Suppl 3, 412-416

 

415 



SOD and CAT are considered primary enzymes since they are 

involved in the direct elimination of ROS 

53 

SOD is an important 



defense enzyme  and scavengers O

2

  anion from H



2

O

2



  and hence 

diminishes the toxic effects due to this radical or other free radicals 

derived from secondary reaction 

54

  CAT is a haemoprotein, which 



catalyzes the reduction of hydrogen peroxides

55

. The antioxidant 



enzymes such as SOD and CAT are known to be inhibited in diabetes 

mellitus as a result of non- enzymatic glycosylation and oxidation 

56



In the present study, the activities of SOD and CAT  decreased in 



diabetic rats as reported earlier, which could be due to inactivation 

caused by alloxan generated ROS 

57

In conclusion, the present study has shown that, the ethanol extract 



of E. singampattiana leaf have antidiabetic, antihyperlipidaemic and 

antioxidant effects. The possible antidiabetic activity of the extracts 

might be due to stimulation of residual pancreatic insulin or by 

increasing peripheral utilization of glucose. Glycosides, flavonoids, 

tannins, organic sulphur compounds, catechol and alkaloids are 

active ingredients of hypoglycemic plant 

.  The ethanol extract of E. 

singampattiana

  had reversed the activities of these enzymatic 

antioxidants, which might be due to decreased oxidative stress as 

evidenced by decreased LPO.  

58

. Flavonoids are reported 



to regenerate the damaged pancreatic beta cells 

59

.  Phenols have 



found to be effective antihyperglycemic agents

60

ACKNOWLEDGEMENT 

. In the present 

study, the phytochemical analysis of ethanol extract of E. 



singampattiana

 clearly pointed out the presence of above said active 

phytochemicals. It denotes that,  the antidiabetic effect of ethanol 

extract of E.  singampattiana  may be due to the presence of more 

than one antihyperglycemic principle and their synergistic effects. 

Thanks to Dr. Sampathraj, Honorary Advisor, Samsun Clinical 

Research Laboratory, Tirupur for their assistance in animal studies. 

The last two authors are thankful to University Grants Commission – 

New Delhi, for their financial support (Ref. No: 39-429/2010(SR) 

dated 7


th

REFERENCES 

 JAN 2011). 

1.

 

Amos AF, Mc Carty DJ and Zimmet P The rising global burden of 



diabetes and its complications: estimates and projections to the 

year 2010. Diabet Med 1997; 14: S1-85. 

2.

 

Bajaj JS and Madan R.  Diabetes in tropics and developing 



countries. IDF Bull. 38: 5-6. 

3.

 



David MN. The pathophysiology of diabetic complications; How 

much does the glucose hypothesis explain? Ann Intern Med 

1996; 174: 286-289. 

4.

 



Halim EM. Effect of Coccinia indica L. and Abroma augusta L. on 

glycemic, lipid profile and on indicators of end organ damage in 

streptozotocin induced diabetic rats. Ind J Clin Biochem 2003; 

18: 54-63. 

5.

 

Punitha R, Vasudevan K and Manoharan S. Effect of Pongamia 



pinnata

  flowers on blood glucose and oxidative stress in 

alloxan induced diabetic rats. Ind J Pharmacol 2006; 38: 62-63. 

6.

 



Viswanathan MB, Prem Kumar EH and Ramesh N. Ethnobotany 

of the Kanis (Kalakkad-  Mundanthurai Tiger Reserve in 

Tirunelveli District, Tamil Nadu, India). Bishen Singh Mahendra 

Pal Singh Publishers, Dehra Dun (India.), 2006; pp 87-88. 

7.

 

Kala SMJ, Tresina Soris P. and Mohan VR. Antitumour activity of 



Eugenia floccosa

 Bedd and Eugenia singampattiana Bedd leaves 

against Dalton ascites lymphoma in swiss albino mice. Int J 

PharmTech Res 2011; 3: 1796-1800. 

8.

 

Brinda P, Sasikala P and Purushothaman KK. Pharmacognostic 



studies on Merugan kizhangu. Bull Med Ethnobot Res 1981; 3: 

84-96. 


9.

 

Anonymous.  Phytochemical investigation of certain medicinal 



plants used in Ayurveda. Central Council for Research in 

Ayurveda and Siddha, New Delhi1990. 

10.

 

Lala PK.  Lab manuals of Pharmacognosy CSI Publishers and 



Distributers, Kolkata 1993. 

11.


 

OECD.  Organisation for Economic co-operation and 

Development). OECD guidelines for the testing of 

chemicals/Section 4: Health Effects Test No. 423; Acute oral 

Toxicity- Acute Toxic Class method. OECD. Paris 2002.  

12.


 

Nagappa AN, Thakurdesai PA, Venkat Rao N and Sing J. 

Antidiabetic activity of Terminalia  catappa  Linn. fruits. J 

Ethnopharmacol 2003; 88: 45-50. 

13.

 

Sasaki T,  Masty S and Sonae A.  Effect of acetic acid 



concentration on the colour reaction in the Otoluidine boric 

acid method for blood glucose estimation.  Rinshbo Kagaku 

1972; 1: 346-353. 

14.


 

Anderson L, Dinesen B, Jorgonsen PN, Poulsen F and Roder ME. 

Enzyme immune assay for intact human insulin in serum or 

plasma. Clin Chem 1993; 39: 578-582. 

15.

 

Varley H. Practical clinical biochemistry, Arnold Heinemann 



Publication Pvt. Ltd., 1976; p, 452. 

16.


 

Owen JA, Iggo JB, Scangrett FJ and Steward IP. Determination of 

creatinine in plasma serum, a critical examination. J Biochem 

1954; 58: 426-437. 

17.

 

Karunanayake EH and Chandrasekharan NV. An evaluation of a 



colorimetric procedure for the estimation of glycosylated 

haemoglobin and establishment of reference values for Sri 

Lanka. J Nat Sci Coun Sri Lanka 1985; 13: 235-258. 

18.


 

Parekh AC and Jung.  Cholesterol determination with ferric 

acetate, uranium acetate and sulphuric acid, ferrous sulphate 

reagent. Anal Chem 1970; 112: 1423-1427. 

19.

 

Rice EW. Triglycerides in Serum In: Standard Methods. Clinical 



Chemistry. 9ed Roderick MP, Academic press, New York. 1970; 

215-222. 

20.

 

Friedwald WT, Levy RI and Fredrickson DS. Estimation of the 



concentration of low density lipoprotein cholesterol in plasma, 

without use of the preparative ultra centrifuge. Clin  Chem 

1972; 18: 499-502. 

21.


 

Warnick GR, Nguyan T and Albers AA. Comparison of improved 

precipitation methods for quantification of high density 

lipoprotein cholesterol. Clin Chem 1985; 31: 217. 

22.

 

Takayama M, Itoh S, Nagasaki T and Tanimizu I.  A new 



enzymatic method for determination of serum phospholipids. 

Clin Chem Acta 1977; 79: 93 – 98. 

23.

 

Lowry OH, Rosenbrough NJ, Farr AL and Randall RJ.  Protein 



measurement with the folin’s phenol reagent. J Bio Chem 1951; 

193: 265-275. 

24.

 

Reitman S and Frankel SA.  Colorimetric method for the 



determination of serum glutamic  oxaloacetic and glutamic 

pyruvic transaminases. Amer J Clin Path 1957; 28: 56-63. 

25.

 

King EJ and Armstrong AR . Determination of serum and bile 



phosphatase activity. Cannad Med Assoc J 1934; 31: 56-63. 

26.


 

Bergmayer HU.  UV method of catalase assay. In Methods of 

Enzymatic Analysis, Weiheim Deer field Beach, Florida, Bansal. 

1983; 3: 273. 

27.

 

Madesh M and Balasubramanian KA. Microtitre plate assay for 



superoxide dismutase using MTT reduction by superoxide. Ind 

J Biochem Biophys 1998; 35: 184-188. 

28.

 

Rehman S. Lead – induced regional lipid peroxidation in brain. 



Toxicol Lett 1984; 21: 333-337. 

29.


 

Prins HK and Loos JA. In Glutathione; Biochemical methods in 

red cell genetics, edited by J.J Yunis. Academic Press, New York. 

1969;127-129. 

30.

 

Pagila DE, Valentine WN.  Studies on the quantitative and 



qualitative characterization of erythrocyte glutathione 

peroxidase. J Lab Clin Med 1967; 70: 158-169. 

31.

 

Hakkim FL, Girija S, Senthilkumar R and Jalaludeen MD. Effect 



of aqueous and ethanol extracts of Cassia auriculata L. flowers 

on diabetic using alloxan induced diabetic rats. Int J Diabet 

Matebol 2007; 15: 100-106. 

32.


 

Morrison EY, Smith SA, West M, Brooks EM, Pascoe K and 

Fletcher C. The effect of Bixa orellana on blood sugar levels in 

the anaesthetized dog. West Ind Med J 1985; 34: 38-42. 

33.

 

Al-Hader AA, Haesan ZA and Agel MB.  Hyperglycemic and 



insulin release inhibitory effects of Rosmarinus officinalis.  J 

Ethnopharmacol 1994; 36: 99-103.  

34.

 

Stanely P, Prince M and Menon V.  Hypoglycemic and other 



related actions of Tinospora cordifolia roots in alloxan induced 

diabetic rats. J Ethnopharmacol.1999; 70: 9 – 15. 

35.

 

Pari L and Latha M. Effect of Cassia auriculata flowers on blood 



sugar levels, serum and tissue lipids in Streptozotocin Diabetic 

Rats. Sing Med J 2002; 43: 617-621. 



Mohan et al. 

Int J Pharm Pharm Sci, Vol 4, Suppl 3, 412-416

 

416 



36.

 

Maruthupandian A, Mohan VR, and Sampathraj R. Antidiabetic, 



antihyperlipidaemic and antioxidant activity of Wattakaka 

volubilis 

(L.f) Stapf leaves in alloxan induced diabetic rats. Int J 

Pharmaceut Sci Res 2010; 1: 83-90. 

37.


 

Maruthupandian A and Mohan VR.  Antidiabetic, 

antihyperlipidaemic and antioxidant activity of Pterocarpus 

marsupium 

Roxb. in alloxan induced diabetic rats. Int J 

PharmTech Res 2011; 3: 1681-1687. 

38.


 

Masih M, Banerjee T, Banerjee B and Pal A. Antidiabetic activity 

of Acalypha indica Linn. on normal and alloxan induced diabetic 

rats. Int J Pharm Pharm Sci 2011; 3: 51-54. 

39.

 

Sarasa D, Sridhar S and Prabakaran E. Effect of an antidiabetic 



extract of Trigonella foenum graceum on alloxan induced 

diabetic mice. Int J Pharm Pharm Sci 2012; 4: 63-65. 

40.

 

Thai AC, Yeo PPB, Chan L, Wang KW, Tan BY and Jacobs E. 



Glycosylated haemoglobin and diabetic control. Sing Med  J 

1983; 24: 210-212. 

41.

 

Shanmugasundaram R, Kalpana Devi V, Tresina Soris P, 



Maruthupandian A and Mohan VR  Antidiabetic, 

antihyperlipidaemic and antioxidant activity of Senna 



auriculata

 (L.) Roxb leaves in alloxan induced diabetic rats. Int 

J PharmTech Res 2011; 3: 747-756. 

42.


 

Hwang HJ, Kim SW, Lim JM, Joo JH, Kim HO, Kim HM and Yun 

JW.  Hypoglycemic effect of crude epoxypolysaccharides 

produced by a medicinal mushroom Phellinus baumii in 

streptozotocin induced diabetic rats. Life Science.  2005; 76: 

3069 – 3080. 

43.

 

Preethi KC and Kuttan R. Hepato and reno protective action of 



Calendula officinalis 

L. flower extract. Ind J Exp Biol 2009; 47: 

163 – 168. 

44.


 

Mironova MA, Klein RL, Virella GL and Lopes-Virella MF. Anti-

modified LDL antibodies, LD -containing immune complexes 

and susceptibility of LDL to in vitro oxidation in patients with 

type 2 diabetes. Diabet 2000; 49: 1033-1049. 

45.


 

Chi MS and Koh ET. Effect of garlic on lipid metabolism of rats 

fed with cholesterol or lard. J Nutr 1982; 112: 241-248.  

46.


 

Cohn RM and Roth KS.  Lipid and lipoprotein metabolism In: 



Biochemistry and Diseases,

  Williams and Willkins publishers, 

Baltimore, 1996; p 280. 

47.


 

Venkateswaran S, Pari L. and Saravanan G. Effect of Phaseolus 



vulgaris 

on circulatory antioxidants and lipids in 

streptozotocin-induced diabetic rats. J Med Food.2002; 5: 97 – 

104. 


48.

 

Pari L and Satheesh AM Antidiabetic effect of Boerhavia diffusa



effect on serum and tissue lipids in experimental diabetes. J 

Med Food 2004; 7: 472 – 476. 

49.

 

Latha M  and Pari L.  Antihyperglycaemic effect of Cassia 



auriculata 

in experimental diabetics and its effects on key 

metabolic enzymes involved in carbohydrate metabolism. Clin 

Exp Pharmacol Physiol 2003a ; 30: 38 – 43.  

50.

 

Ananthan R, Latha M, Ramkumar KM, Pari L, Basker L and 



Narmatha Bai V.  Antidiabetic effect of Gymnema montanum 

leaves: effect on lipid peroxidation induced oxidative stress in 

experimental diabetes. Nutr 2004; 6: 379 – 386. 

51.


 

Latha M and Pari L.  Preventive effects of Cassia auriculata L

flowers on brain lipid peroxidation in  rats treated with 

streptozotocin. Mol Cell and Biochem 2003b ; 243: 23-28. 

52.

 

Oberly WR and Buettner RG. Role of superoxide dismutase in 



cancer. Cancer Res 1974; 35: 1141-1149. 

53.


 

Arulselvan P and Subramanian SP. Beneficial effects of Murraya 



koenijii

  leaves on antioxidants defense system and ultra 

structural changes of pancreatic cells in experimental diabetes 

in rats. Chemico-Biol Interac 2007; 165: 155-164. 

54.

 

Manonmani G, Bhavapriya V, Kalpana S, Govindasamy S and 



Apparanantham T.  Antioxidant activity of Cassia fistula  Linn. 

Flowers in alloxan induced diabetics rats.  J  Ethnopharmacol 

2005; 97: 39-42. 

55.


 

Punitha ISR,  Shirwaikar A and Shirwaikar A.  Antidiabetic 

activity of benzyl tetra isoquinoline alkaloid berberine in 

streptozotocin-  nicotinamide induced type 2 diabetic rats. 

Diabetologia Croatica. 2005; 34: 177-128. 

56.


 

Al-Azzawie H and Alhamdani MSS.  Hypoglycemic and 

antioxidant effect of oleuropein in alloxan- diabetic rabbits. Life 

Sci 2006; 78: 1371-1377. 

57.

 

Sepici A, Gurbuz I, Cevik C and Yesilada E. Hypoglycemic effects 



of myrtle oil in normal and alloxan-  diabetic rabbits. J 

Ethnopharmacol 2004; 93: 311-318. 

58.

 

Oliver  B.  Oral hypoglycaemic plants in West Africa.  J. 



Ethnopharmacol 1980; 2: 119-127. 

59.


 

Chakravarthy BK, Gupta S, Gambir SS and Gode KD. Pancreatic beta 

cell regeneration. A novel antidiabetic mechanism of Pterocarpus 

marsupium 

Roxb. Ind J Pharmacol 1980; 12: 123 – 127. 

60.

 

Manickam M, Ramanathan M, Farboodinary Jahromi MA, 



Chansouria JPN and Ray AB.  Antihyperglycemic activity of 

phenolic form Pterocarpus marsupium.  J Nat Prod.  1997;  60: 



609-610.  

 

Yüklə 270,51 Kb.

Dostları ilə paylaş:




Verilənlər bazası müəlliflik hüququ ilə müdafiə olunur ©azkurs.org 2020
rəhbərliyinə müraciət

    Ana səhifə