Ishning borishi. “UV-254” plastinkasini pastki talrafidan 2-2.5 sm o’lchab
olib, oddiy qalam bilan strat chizig’i chiziladi. Tekshirilayotgan oqsil gidrolizatlari
bir-biridan 1.5-2 sm oraliq masofada tomiziladi. So’ng bu oqsil gidrolizatlaridan 10-
20 ml olib, tomchilab tomiziladi va dog’ issiq havo bilan quritiladi- xromatografiya
kamerasiga virtual holatga qo’yiladi. Xromatografiyalanish maxsus kameralarda olib
boriladi, erituvchi sifatida 0.1 M sitrat buferi pH-5.3 ishlatiladi. Erituvchi kameraga
1-1.5 sm qalinlikda qo’yiladi.
Erituvchi plastinka balandligi 4/5 qismgiga ko’tarilganda, plastinka kameradan
olinadi va issiq havoga quritiladi. Shundan so’ngplastinkada ehtiyodkorlik bilan 1% li
ningidrinni asetondagi eritmasidan purkaladi. Plastinkani 105
0
C da termostatda 10
minut davomida qizdiriladi. Natijada aminokislotalar ko’k binafsha dog’lar holida
ko’rinadi. So’ngra har bir aminokislotani yuqori ko’rsatilgan formula yordamida
siljish tezligi koeffisienti (Rf) hisoblanadi.
Tekshirilayotgan oqsil gilrolizati bilan birga kantrol (standart) eritmalar ham
xromatogirafiya qilinadi. Bu tekshirilayotga na’munadagi aminokislotalarni tezda
aniqlashga imkon beradi. Shuni takidlab o’tish kerakgi yupqa qavatli xromotografiya
usulida aminokislotalar sifat jihatdan baholanadi va ularning miqdorini aniqlashga
imkon bo’lmaydi.
Dostları ilə paylaş: |