61
Usulni bir necha kamchiliklari bor. Girazinoliz
natijasida glutamin,
asparagin, tsistein va tsistin parchalanadilar; arginin guanidin guruhini
yo’qotib ornitin hosil qiladi. Serin, treonin va glitsin gidrazidlari
o’zgaruvchan bo’lib osongina erkin aminokislotalarga aylanadilar.
Oksazalon usuli
V.Matsuo
tomonidan birinchi marta tavsiya etilgan.
Oksazalon
usuli odatda
tritiy nishonli usuli
deb atalib,
oxirgi
aminokislotani sirka angidridi ta’sirida halqalanib oksazalon hosil
qilishiga asoslangandir. Ishqoriy muhitda oksazalon halqadagi 4
holatdagi vodorod atomlarini harakatchanligi keskin ravishda ortadi.
Tritiylangan oqsil yoki peptidni gidrolizlanishi
natijasida hosil
bo’ladigan mahsulotlar o’z tarkibida radioaktiv nishonlangan
oxirgi aminokislotaga ega bo’ladi. Gidrolizatni xromatgrafiya
qilish va radioaktivlikni o’lchash orqali
oqsil yoki aminokislotani
oxirgi aminokislotasi qiyoslanib, o’xshashligi aniqlanadi.
.
Ba’zi holatlarda tritiy peptid zanjirini o’rtasida joylashgan asparagin
va glutamin kislotalarni tarkibiga kirib qoladi. Prolinning
oxirgi
aminokislotasi bu sharoitlarda
oksazolon hosil qilmaydi, treonin va
serinning sirka angidrid ta’sirida degradatsiyaga uchrashi natijasida
oxirgi qoldiqlari tarkibiga yetarli
miqdorda radioaktiv nishon
kiritib bo’lmaydi. Aminokislotalarni
oxirgi uchini aniqlash uchun
karboksipeptidazalar bilan fermentli gidroliz usulidan foydalaniladi.
Dostları ilə paylaş: