Bioinformatika

II bob. Odamda neyrodegenerativ kasalliklar va gen terapiysasi va ularni o’rganish metodlari.
2.1. Gen terapiysasi va ularni o’rganish metodlari.
B a'zida genning butun yoki bir qismi nuqsonli yoki tug'ilishdan nuqsonli, yoki kattalar hayotida o'zgarishi yoki mutatsiyaga uchrashi mumkin. Ushbu turdagi o'zgarishlarning barchasi sog'liq muammolari yoki kasalliklarga qanday hissa qo'shishi mumkin bo'lgan oqsillarni qanday tuzatishni buzishi mumkin. Gen terapiyasida olimlar mavjud bo'lgan muammolarga bog'liq holda bir nechta narsalarni qilishlari mumkin. Ular tibbiy muammoni keltirib chiqaradigan, kasallikka qarshi kurashish yoki davolanishga yordam berish uchun genlarni qo'shadigan genlarni almashtirishi yoki muammolarni keltirib chiqaradigan genlarni o'zgartira oladigan genni almashtirishi mumkin. Yangi genlarni to'g'ridan-to'g'ri hujayra ichiga joylashtirish uchun olimlar geni etkazib berish uchun genetik jihatdan yaratilgan "vektor" deb nomlangan vositadan foydalanadilar.
1-rasm
Masalan, viruslar genetik materialni hujayralarga etkazib berishning tabiiy qobiliyatiga ega va shuning uchun vektor sifatida foydalanish mumkin. Virusni terapevtik genlarni inson hujayralariga ko'chirish uchun ishlatishdan oldin, u yuqumli kasallikka sabab bo'lish qobiliyatini yo'qotish uchun o'zgartiriladi. Gen terapiyasi tanadagi yoki tashqarida xujayralarni o'zgartirish uchun ishlatilishi mumkin. Tananing ichki qismida amalga oshirilganda, shifokor genni ko'tarib turgan vektorni bevosita tanadagi hujayralarga ega bo'lgan qismga kiritadi. Tananing tashqarisida hujayralarni o'zgartirish uchun ishlatiladigan gen terapiyasida, qon, suyak iligi yoki boshqa to'qimalarni bemordan olish mumkin va laboratoriyada alohida hujayralarni ajratish mumkin. Kerakli genni o'z ichiga olgan vektor ushbu hujayralarga kiritiladi. Hujayralar, laboratoriyada ko'paytirish uchun qoldiriladi va keyinchalik ko'payib boradi va natijada kerakli ta'sirni ishlab chiqarish davom e tadigan bemorga qaytariladi.
2-rasm Gen terapiyasi bozordagi bozorga chiqmasdan oldin ...
Agar kompaniya odamlarda foydalanish uchun gen terapiyasi mahsulotini sotishdan oldin, gen terapiya mahsuloti xavfsizlik va samaradorlik uchun sinovdan o'tishi kerak, shunda FDA olimlari terapiyani xavflarini foydali tomonga mos deb hisoblashlari mumkin. Gen terapiyasi shifokorni o'zgartirish va qiyin, hatto davolanmagan kasalliklarga duchor bo'lgan bemorlar uchun imkoniyatlar yaratishga va'da beradi. Olimlar ushbu davolashda katta qadamlar qo'yishda davom etar ekan, FDA hayotni saqlab qolish uchun potentsialga ega bo'lgan poydevorli davolashlarni darhol ko'rib chiqish orqali rivojlanishni tezlashtirishga yordam beradi. Gen terapiyasi (shuningdek, deyiladi inson genlarining uzatilishi) a tibbiy terapevtik etkazib berishdan foydalanishga yo'naltirilgan soha nuklein kislotalar a sifatida bemorning hujayralariga dori kasallikni davolash. Insonni o'zgartirishga qaratilgan birinchi urinish DNK tomonidan 1980 yilda ijro etilgan Martin Klayn, ammo odamlar tomonidan tasdiqlangan birinchi muvaffaqiyatli yadro genlarini uzatishi
Milliy sog'liqni saqlash institutlari, 1989 yil may oyida ijro etilgan. Genlarning uzatilishidan birinchi terapevtik foydalanish va inson DNKlarini yadro genomiga birinchi to'g'ridan-to'g'ri kiritish Frantsuz Anderson 1990 yil sentyabr oyida boshlangan sud jarayonida. Ko'pgina genetik kasalliklarni davolash yoki vaqt o'tishi bilan ularni davolash mumkin deb o'ylashadi. 1989 yildan 2018 yil dekabriga qadar 2900 dan ortiq klinik tadqiqotlar o'tkazildi, ularning yarmidan ko'pi o'tkazildi I bosqich. 2017 yildan boshlab Spark Therapeutics ' Luxturna (RPE65 mutatsiyasiga bog'liq bo'lgan ko'rlik) va Novartis ' Kmiriya (Ximerik antigen retseptorlari T hujayrasi terapiya) - bu FDA tomonidan bozorga kirish uchun birinchi tasdiqlangan gen terapiyalari.
O'sha vaqtdan beri Novartis kabi dorilar Zolgensma va Alnylam"s Patisiran boshqa kompaniyalarning gen terapiyasi dori-darmonlaridan tashqari, FDA tomonidan tasdiqlangan. Ushbu yondashuvlarning aksariyati qo'llaniladi adeno bilan bog'liq viruslar (AAVs) va lentiviruslar genlarni kiritish uchun, jonli ravishda va ex vivonavbati bilan. ASO / siRNA kabi yondashuvlar Alnylam va Ionis farmatsevtika virusli bo'lmagan etkazib berish tizimlarini talab qiladi va jigar hujayralariga odam savdosi uchun muqobil mexanizmlardan foydalanadi GalNAc transportchilar. Gen terapiyasining kontseptsiyasi genetik muammoni uning manbasida hal qilishdir. Agar, masalan, irsiy kasallikda (odatda retsessiv ravishda) ma'lum bir genning mutatsiyasi buzilgan oqsil hosil bo'lishiga olib keladigan bo'lsa, bu genning zararli mutatsiyasini o'z ichiga olmagan nusxasini etkazib berish uchun gen terapiyasidan foydalanish mumkin va shu bilan funktsional oqsil ishlab chiqaradi. Ushbu strategiya genlarni almashtirish terapiyasi deb ataladi va irsiy retinal kasalliklarni davolashda qo'llaniladi. Genlarni almashtirish terapiyasi kontseptsiyasi asosan retsessiv kasalliklar uchun mos bo'lsa-da, yangi merosxo'rliklar, shuningdek, merosning ustun turiga ega bo'lgan sharoitlarni davolashga qodir. Kirish CRISPR genlarini tahrirlash gen terapiyasida uni qo'llash va foydalanish uchun yangi eshiklarni ochdi, chunki genni sof almashtirish o'rniga u ma'lum bir genetik nuqsonni tuzatishga imkon beradi.Tibbiy to'siqlarni hal qilish, masalan, yashirin odam immunitet tanqisligi virusini yo'q qilish (OIV) suv omborlari va o'roqsimon hujayra kasalligini keltirib chiqaradigan mutatsiyani tuzatish keyingi ikki yil ichida terapevtik usul sifatida mavjud bo'lishi mumkin.
Protezli gen terapiyasi organizm hujayralariga fiziologik jihatdan bajarmaydigan funktsiyalarni qabul qilishga imkon beradi. Masalan, retinal kasallikning so'nggi bosqichida azob chekayotgan bemorlarda ko'rishni tiklashga qaratilgan ko'rishni tiklash gen terapiyasi deb ataladi. Retinaning so'nggi bosqichidagi kasalliklarida retoresiyaning birlamchi nurga sezgir hujayralari sifatida fotoreseptorlar qaytarib bo'lmaydigan darajada yo'qoladi. Protez gen terapiyasi yordamida nurga sezgir oqsillar retinaning qolgan hujayralariga yuborilib, ularni nurga sezgir qilishlari va shu bilan vizual ma'lumotni miyaga yo'naltirishlari mumkin.
Gen terapiyasi 1972 yilda konsepsiya qilingan bo'lib, mualliflar inson gen terapiyasini o'rganishdan oldin ehtiyot bo'lishga chaqirishgan. Gen terapiyasida birinchi urinish, muvaffaqiyatsiz urinish (shuningdek, chet el genlarini odamga tibbiy yo'l bilan yuqtirish birinchi holat) organ transplantatsiyasi) tomonidan bajarilgan Martin Klayn 1980 yil 10-iyulda. Klin olti oydan so'ng kasallaridagi genlardan biri faol bo'lgan deb da'vo qilmoqda, garchi u bu ma'lumotni hech qachon nashr qilmagan yoki tasdiqlamagan bo'lsa ham va agar u to'g'ri bo'lsa ham, bu foydali ta'sirlarni davolashga olib kelishi ehtimoldan yiroq emas betatalassemiya.[tibbiy ma'lumotnoma kerak] 1980 yillar davomida hayvonlar ustida olib borilgan keng qamrovli tadqiqotlar va 1989 yilda odamlarda bakterial genlarni belgilash bo'yicha o'tkazilgan sinovdan so'ng, muvaffaqiyatli deb qabul qilingan birinchi gen terapiyasi 1990 yil 14 sentyabrda Ashi DeSilva davolanganida boshlangan sinovda namoyish etildi. ADASCID. Doimiy genetik o'zgarishni keltirib chiqargan birinchi somatik davolash 1993 yilda boshlangan edi. Maqsad rekombinant DNK yordamida gen hujayralarini o'simta hujayralarini o'limga olib keladigan dori ta'sirchanligini oshiruvchi genni o'tkazish orqali miyaning xavfli o'smalarini davolash edi. Polimerlar ham tarjima qilingan ichiga oqsillar, maqsadga aralashish gen ekspressioni, yoki ehtimol to'g'ri genetik mutatsiyalar. Eng keng tarqalgan shakl DNK bu funktsional, terapevtikni kodlaydi gen almashtirish a mutatsiyaga uchragan gen. Polimer molekulasi "vektor", molekulani hujayralar ichida olib yuradi.[tibbiy ma'lumotnoma kerakUmuman olganda, zarur bo'lgan oqsilning paydo bo'lishiga olib keladigan genni boshqarishga qaratilgan harakatlar. So'nggi paytlarda, tushunchalar oshdi nukleaz kabi usullardan foydalangan holda DNKni to'g'ridan-to'g'ri tahrirlashga olib keldi sink barmoqli nukleazalar va CRISPR. Vektor xromosomalarga genlarni kiritadi.
Keyin ifoda etilgan nukleazalar xromosomadagi genlarni taqillatadi va almashtiradi. 2014 yildan boshlab ushbu yondashuvlar bemorlardan hujayralarni olib tashlash, xromosomani tahrirlash va o'zgartirilgan hujayralarni bemorlarga qaytarishni o'z ichiga oladi. Genlarni tahrirlash genetik kasalliklarni davolash uchun inson genomini o'zgartirish uchun potentsial yondashuv, virusli kasalliklar, va saraton. 2020 yildan boshlab ushbu yondashuvlar klinik sinovlarda o'rganilmoqda.CrRNK dupleksi va trakrRNK KRNKning yuqori qismida RNK 5 asosida maxsus joylashtirilgan gen modifikatsiyasini joriy qilish uchun RNK qo'llanma vazifasini bajaradi. Cas9 trakrRNKni bog'laydi va DNK bilan bog'lanish ketma-ketligini (5'NGG3 ') talab qiladi, bu protospacer qo'shni motifi (PAM) deb nomlanadi. Bog'lab bo'lgandan so'ng, Cas9 DNKning ikki zanjirli uzilishini taqdim etadi, so'ngra homolog rekombinatsiya (HDR) yoki homolog bo'lmagan qo'shilish (NHEJ) orqali gen modifikatsiyasi amalga oshiriladi. Yilda somatik hujayra gen terapiyasi (SCGT), terapevtik genlar a dan boshqa hujayralarga o'tkaziladi jinsiy hujayralar, jinsiy hujayralar, gametotsityoki farqlanmagan ildiz hujayrasi. Bunday modifikatsiyalar har qanday bemorga ta'sir qiladi va meros qilib olinmaydi nasl. Somatik gen terapiyasi terapevtik DNK (yoki tarkibiga kiritilgan) asosiy va klinik tadqiqotlarni aks ettiradi genom yoki tashqi sifatida epizod yoki plazmid) kasallikni davolash uchun ishlatiladi. 600 dan ortiq klinik sinovlar SCGTdan foydalanish ishlari olib borilmoqda[qachon?
AQShda. Ko'pchilik og'ir genetik kasalliklarga, shu jumladan immunitet tanqisligi, gemofiliya, talassemiyava kistik fibroz. Bunday yagona gen kasalliklari somatik hujayra terapiyasi uchun yaxshi nomzodlardir. Genetik buzuqlikni to'liq tuzatish yoki bir nechta genlarni almashtirish hali mumkin emas. Sinovlarning faqat bir nechtasi rivojlangan bosqichda. Yilda urug'lanish gen terapiyasi (GGT), jinsiy hujayralar (sperma yoki tuxum hujayralari) funktsional genlarni o'z genomlariga kiritish orqali o'zgartiriladi. Jinsiy hujayrani o'zgartirish organizmning barcha hujayralarida o'zgartirilgan genni bo'lishiga olib keladi. O'zgarish shuning uchun merosxo'r va keyingi avlodlarga o'tdi. Avstraliya, Kanada, Germaniya, Isroil, Shveytsariya va Gollandiya texnik va axloqiy sabablarga ko'ra, shu jumladan kelajak avlodlar uchun yuzaga kelishi mumkin bo'lgan xavf-xatarlar to'g'risida etarli ma'lumotga ega bo'lmaganligi sababli odamlarda qo'llanilishini taqiqlash va SCGTga nisbatan yuqori xavf. AQShda insonning genetik modifikatsiyasini (umuman terapiya bo'yicha FDA qoidalaridan tashqari) maxsus ravishda federal nazorat yo'q. DNKni hujayralarga etkazib berish bir necha bor amalga oshirilishi mumkin usullari.
Ikkita asosiy sinflar rekombinant viruslar (ba'zan biologik nanozarralar yoki virusli vektorlar deyiladi) va yalang'och DNK yoki DNK komplekslari (virusli bo'lmagan usullar).[tibbiy ma'lumotnoma kerak] Qilish uchun takrorlash, viruslar o'zlarining genetik materiallarini xujayra xujayrasiga kiritish, xujayraning uyali apparatini aldab, uni virusli oqsillarning rejalari sifatida ishlatish. Retroviruslar ularning genetik materiallarini mezbon hujayraning genomiga nusxalash orqali bir bosqichga o'ting. Olimlar bundan foydalanib, virusning genetik materialini terapevtik DNK bilan almashtirishadi. ("DNK" atamasi haddan ziyod soddalashtirilgan bo'lishi mumkin, chunki ba'zi viruslarda RNK mavjud va gen terapiyasi bu shaklda ham bo'lishi mumkin.) Bir qator viruslar inson gen terapiyasi uchun ishlatilgan, shu jumladan retroviruslar, adenoviruslar, oddiy herpes, emlashva adeno bilan bog'liq virus.
Viruslar tarkibidagi genetik material (DNK yoki RNK) singari, terapevtik DNK ham tabiiy ravishda parchalanadigan yoki (hech bo'lmaganda nazariy jihatdan) xujayraning genomiga kirib boradigan vaqtincha loyiha bo'lib xizmat qilishi va infektsiyalangan xostda DNKning doimiy qismiga aylanishi mumkin. hujayralar. Virusli bo'lmagan usullar virusli usullarga nisbatan katta afzalliklarga ega, masalan, katta hajmdagi ishlab chiqarish va past xost immunogenlik. Biroq, virusli bo'lmagan usullar dastlab past darajalarni hosil qildi transfektsiya va gen ekspressioniva shu bilan terapevtik samaradorlikning pastligi. Yangi texnologiyalar ushbu muammolarni hal qilishga va'da berib, hujayraning o'ziga xos maqsadlari va odam savdosi osti nazorati kuchaygan. Virusli bo'lmagan gen terapiyasining usullari yalang'och DNKning in'ektsiyasini o'z ichiga oladi, elektroporatsiya, gen qurol, sonoporatsiya, magnetektsiya, foydalanish oligonukleotidlar, lipoplekslar, dendrimerlar va noorganik nanozarralar. Kabi kompaniyalar tomonidan amalga oshirilgan yondashuvlar Ligandal, gen terapiyasining turli usullari, shu jumladan RNK, DNK va CRISPR kabi genlarni tahrirlash vositalari uchun hujayralarga xos maqsadli texnologiyalarni yaratish imkoniyatini taklif etamiz.
Kabi boshqa kompaniyalar, masalan Arbutus Biopharma va Arkturus terapiyasi, asosan jigar trofikasini namoyish etadigan virusli bo'lmagan, hujayralarga yo'naltirilgan bo'lmagan usullarni taklif qiladi. So'nggi yillarda, kabi startaplar Sixfold Bio, GenEditva Spotlight terapiyasi virusli bo'lmagan genlarni etkazib berish muammosini hal qila boshladilar. Virusli bo'lmagan usullar takroriy dozalash va genetik foydali yuklarni ko'proq moslashtirish imkoniyatini taklif qiladi, bu kelajakda virusga asoslangan etkazib berish tizimlarini o'z zimmasiga olishi mumkin. Kabi kompaniyalar Editas tibbiyoti, Intellia Terapevtikasi, CRISPR terapevtikasi, Casebia, Aql, Aniq biologiya, bluebird biova Sangamo virusli bo'lmagan genlarni tahrirlash usullarini ishlab chiqqan, ammo genom qo'shilishi natijasida genlarni qo'shilish materiallarini etkazib berish uchun viruslardan tez-tez foydalanadi. nukleazalar. Ushbu kompaniyalar genlarni tahrirlashga e'tibor berishadi va etkazib berishda katta to'siqlarga duch kelishmoqda. BioNTech, Moderna terapiya va CureVac etkazib berishga e'tibor bering mRNA virusli bo'lmagan etkazib berish muammolari bo'lgan foydali yuklar. Alnylam, Dicerna farmatsevtikava Ionis farmatsevtika etkazib berishga e'tibor bering siRNA (antisens oligonukleotidlar) genlarni bostirish uchun, bu ham virusli bo'lmagan etkazib berish tizimlarini talab qiladi.
Akademik sharoitda bir qator laboratoriyalar etkazib berish ustida ishlamoqda PEGillangan zarralar, ular zardob oqsili koronalarini hosil qiladi va asosan hujayralarda LDL retseptorlari vositachiligini o'z ichiga oladi jonli ravishda. Qisqa muddatli tabiat - gen terapiyasi kasallikning doimiy davosiga aylanishidan oldin, maqsadli hujayralarga kiritilgan terapevtik DNK funktsional bo'lib qolishi va terapevtik DNKni o'z ichiga olgan hujayralar barqaror bo'lishi kerak. Terapevtik DNKni integratsiyalashuvi bilan bog'liq muammolar genom va ko'plab hujayralarning tez bo'linib turadigan tabiati uning uzoq muddatli manfaatlarga erishishiga xalaqit beradi.
Bemorlarga bir nechta davolanish kerak. Immunitetga qarshi javob - har qanday vaqtda begona narsa inson to'qimalariga kiritilganda, immunitet tizimi tajovuzkorga hujum qilish uchun rag'batlantiriladi. Immunitet tizimini gen terapiyasi samaradorligini pasaytiradigan tarzda rag'batlantirish mumkin. The immunitet tizimiViruslarga qarshi ilgari ko'rilgan kuchaytirilgan reaktsiya takroriy davolanish samaradorligini pasaytiradi. Virusli vektorlar bilan bog'liq muammolar - Virusli vektorlar toksiklik, yallig'lanish reaktsiyalari va genlarni nazorat qilish va maqsadga yo'naltirish muammolarini keltirib chiqaradi. Multigene buzilishi - Ba'zi tez-tez uchraydigan kasalliklar, masalan yurak kasalligi, yuqori qon bosimi, Altsgeymer kasalligi, artritva diabet, gen terapiyasini murakkablashtiradigan ko'plab genlarning o'zgarishi ta'sir qiladi. Ba'zi davolash usullari buzilishi mumkin Weismann to'sig'i (soma va germ-line o'rtasida) moyaklarni himoya qilish, germinalni o'zgartirishi va oxirgi amaliyotni taqiqlaydigan mamlakatlarda qoidalar buzilishi. Qo'shimcha mutagenez - Agar DNK genomdagi sezgir joyga birlashtirilgan bo'lsa, masalan a o'smani bostiruvchi gen, terapiya a ni keltirib chiqarishi mumkin o'sma. Bu klinik sinovlarda sodir bo'ldi X bilan bog'liq bo'lgan og'ir kombinatsiyalangan immunitet tanqisligi (X-SCID) bemorlar gemopoetik ildiz hujayralari a yordamida tuzatuvchi transgen bilan o'tkazildi retrovirusva bu rivojlanishiga olib keldi T hujayralari leykemiyasi 20 bemorning 3tasida.
Mumkin bo'lgan echimlardan biri DNKga funktsional o'smani bostiruvchi genni qo'shilishi hisoblanadi. Bu muammoli bo'lishi mumkin, chunki DNK qancha uzoq bo'lsa, hujayra genomlariga qo'shilish shunchalik qiyin bo'ladi.[59] CRISPR texnologiya tadqiqotchilarga aniq joylarda genom o'zgarishlarini yanada aniqroq qilishiga imkon beradi. Uchta bemorning o'limi gen terapiyasi bo'yicha o'tkazilgan sinovlarda qayd etilgan bo'lib, bu maydonni diqqat bilan kuzatib bordi. Birinchisi Jessi Gelsinger1999 yilda vafot etgan, chunki immunitetni rad etish javobi.[63][64] Bitta X-SCID kasalligi 2003 yilda leykemiyadan vafot etdi.[18] 2007 yilda, a romatoid artrit bemor infektsiyadan vafot etdi; keyingi tergov o'lim gen terapiyasi bilan bog'liq emas degan xulosaga keldi. Ushbu bo'lim balki juda uzoq va haddan tashqari batafsil. Iltimos, materialni qisqacha bayon qilishni o'ylab ko'ring manbalarga asoslanib kerak bo'lganda. (Noyabr 2018) 1970 va undan oldingi yillar 1972 yilda Fridmann va Roblin o'zlarining maqolalarini yozdilar Ilm-fan sarlavhasi "Inson genetik kasalligi uchun gen terapiyasi?" Buni taklif qilgani uchun Rojers (1970) keltirildi ekzogen yaxshi DNK genetik nuqsonlarga duchor bo'lganlarning nuqsonli DNKlarini almashtirish uchun ishlatiladi.
AQShda birinchi tasdiqlangan gen terapiyasi bo'yicha klinik tadqiqotlar 1990 yil 14 sentyabrda bo'lib o'tdi Milliy sog'liqni saqlash institutlari (NIH), ko'rsatmasi ostida Uilyam Frantsiya Anderson.[69] To'rt yoshli Ashanti DeSilva uni tark etgan genetik nuqsonni davolashdi ADA-SCID, jiddiy immunitet tanqisligi. Bemor qon hujayralarining nuqsonli geni funktsional variant bilan almashtirildi. Terapiya yordamida Ashanti immuniteti qisman tiklandi. Yo'qolgan fermentni ishlab chiqarish vaqtincha rag'batlantirildi, ammo funktsional genlarga ega yangi hujayralar yaratilmadi. U har ikki oyda bir marta amalga oshiriladigan muntazam in'ektsiyalar bilan oddiy hayot kechirdi. Effektlar muvaffaqiyatli, ammo vaqtinchalik edi.Saraton gen terapiyasi 1992/93 yillarda kiritilgan (Trojan va boshq. 1993).[71] Glyoblastomani davolash, natijasi har doim o'limga olib keladigan xavfli miya shishi, antisens IGF-I RNKni ifodalovchi vektor yordamida amalga oshirildi (klinik sinov 1602 NIH № 1602 protokoli bilan tasdiqlangan 1993 yil,[72] va FDA tomonidan 1994 yilda). Ushbu terapiya, shuningdek, IGF-I antisensining o'smaga qarshi mexanizmi tufayli kuchli immun va apoptotik hodisalar bilan bog'liq bo'lgan samaradorligini isbotlovchi saraton immunogen terapiyasining boshlanishini anglatadi. 1992 yilda Klaudio Bordinyon, da ishlash Vita-Salute San Raffaele universiteti, yordamida birinchi genoterapiya protsedurasini amalga oshirdi gematopoetik ildiz hujayralari tuzatish uchun mo'ljallangan genlarni etkazib beradigan vektor sifatida irsiy kasalliklar.[73] 2002 yilda ushbu ish birinchi muvaffaqiyatli terapiya bo'yicha gen terapiyasini e'lon qildi adenozin deaminaz etishmovchiligi (ADA-SCID). SCID bilan kasallangan bolalarni davolash bo'yicha ko'p markazli sinovning muvaffaqiyati (og'ir birlashtirilgan immunitet tanqisligi yoki "qabariq bola" kasalligi) 2000 va 2002 yillarda, sudning Parij markazida davolangan o'nta boladan ikkitasida leykemiyaga o'xshash kasallik paydo bo'lganda so'roq qilingan. Klinik sinovlar 2002 yilda vaqtincha to'xtatilgan, ammo AQSh, Buyuk Britaniya, Frantsiya, Italiya va Germaniyada protokol normativ ko'rib chiqilgandan so'ng qayta tiklangan. 1993 yilda Endryu Gobea tug'ruqdan keyingi SCID bilan tug'ilgan genetik skrining. Uning onasidan qon chiqarildi platsenta va kindik ichakchasi tug'ilgandan so'ng darhol ildiz hujayralarini olish. The allel uchun kodlar adenozin deaminaz (ADA) olingan va retrovirusga kiritilgan. Retroviruslar va ildiz hujayralari aralashtirildi, shundan so'ng viruslar ildiz hujayrasi xromosomalariga genni kiritdi. Ishlaydigan ADA genini o'z ichiga olgan ildiz hujayralari Endryu qoniga kiritildi. ADA fermentining in'ektsiyalari ham haftada berildi. To'rt yil davomida T hujayralari (oq qon hujayralari), ildiz hujayralari tomonidan ishlab chiqarilgan, ADA geni yordamida ADA fermentlarini hosil qilgan. To'rt yildan keyin yana davolanish kerak edi. Antisens IGF-I RNK (NIH n˚ 1602) ning o'zgartirilgan saraton gen terapiyasi strategiyasi[72] antisens / uch karra spiralga qarshi IGF-I yondashuvi 2002 yilda Wiley genoterapiyasi bilan ro'yxatga olingan - n˚ 635 va 636. Ushbu yondashuv olti xil xavfli o'smalarni davolashda umidvor natijalarni ko'rsatdi: glioblastoma, jigar saratoni, yo'g'on ichak , prostata, bachadon va tuxumdon (AQShning gen terapiyasi bo'yicha hamkorlikdagi NATO ilmiy dasturi, Frantsiya, Polsha nT LST 980517 J. Trojan tomonidan olib borilgan) (Trojan va boshq., 2012). Ushbu anti-gen antisens / uch karra spiral terapiyasi samaradorligi isbotlandi, chunki mexanizm tarjima va transkripsiya darajalarida IGF-I ekspressionini bir vaqtning o'zida to'xtatib, o'smalarga qarshi immunitet va apoptotik hodisalarni kuchaytiradi. O'roqsimon hujayralar kasalligi sichqonlar bilan davolash mumkin Sichqonlar, aslida odamlarning kasalligini keltirib chiqaradigan bir xil nuqsonga ega - ishlab chiqarishni boshlash uchun virusli vektordan foydalanganlar xomilalik gemoglobin (HbF), odatda tug'ilishdan ko'p o'tmay ishlab chiqarishni to'xtatadi. Odamlarda gidroksiüre HbF ishlab chiqarishni rag'batlantirish uchun o'roqsimon hujayra semptomlarini vaqtincha engillashtiradi. Tadqiqotchilar ushbu muolajani terapevtik HbF ishlab chiqarishni ko'paytirish uchun doimiy vosita ekanligini namoyish etdilar. Yangi genoterapiya yondashuvi xatolarni tuzatdi xabarchi RNK nuqsonli genlardan olingan. Ushbu texnikada davolanish imkoniyati mavjud talassemiya, kistik fibroz va ba'zi saraton kasalliklari.Tadqiqotchilar yaratdilar lipozomalar Terapevtik DNKni teshiklari orqali o'tkazadigan 25 nanometr yadro membranasi.2003 2003 yilda tadqiqot guruhi miyaga birinchi marta genlarni kiritdi. Ular foydalangan lipozomalar a bilan qoplangan polimer deb nomlangan polietilen glikol, virusli vektorlardan farqli o'laroq, o'tish uchun etarlicha kichik qon-miya to'sig'i.Ning qisqa qismlari ikki zanjirli RNK (qisqa, aralashuvchi RNKlar yoki siRNAlar) hujayralar tomonidan ma'lum bir ketma-ketlikdagi RNKni parchalash uchun ishlatiladi. Agar siRNA noto'g'ri gendan nusxa ko'chirilgan RNKga mos keladigan tarzda ishlab chiqilgan bo'lsa, u holda ushbu genning g'ayritabiiy protein mahsuloti hosil bo'lmaydi.Genditsin etkazib beradigan saraton gen terapiyasi o'simta supressori gen p53 muhandislik yordamida adenovirus. 2003 yilda uni davolash uchun Xitoyda tasdiqlangan bosh va bo'yin skuamoz hujayrali karsinoma.Mart oyida tadqiqotchilar ikkita kattalardagi bemorlarni X bilan bog'lash uchun davolash uchun gen terapiyasining muvaffaqiyatli qo'llanilishini e'lon qilishdi surunkali granulomatoz kasallik, ta'sir qiladigan kasallik miyeloid hujayralarga zarar etkazadi immunitet tizimi. Tadqiqot birinchi bo'lib gen terapiyasining davolash mumkinligini ko'rsatmoqda miyeloid tizim.May oyida bir guruh immunitet tizimining yangi yuborilgan genni rad etishining oldini olish usuli haqida xabar berishdi.[86] O'xshash organ transplantatsiyasi, gen terapiyasi ushbu muammoga duch keldi. The immunitet tizimi odatda yangi genni begona deb tan oladi va uni olib yuradigan hujayralarni rad etadi. Tadqiqotda ma'lum bo'lgan molekulalar tomonidan boshqariladigan yangi ochilgan genlar tarmog'i ishlatilgan mikroRNKlar. Ushbu tabiiy funktsiya immunitet tizim hujayralarida ularning terapevtik genlarini tanlab qo'ydi va uni kashfiyotlardan himoya qildi. Immun hujayrasi mikroRNK maqsadli ketma-ketligini o'z ichiga olgan gen bilan yuqtirilgan sichqonlar genni rad etmadilar. Avgust oyida olimlar metastatikani muvaffaqiyatli davolashdi melanoma ishlatadigan ikkita bemorda qotil T hujayralari saraton hujayralariga hujum qilish uchun genetik jihatdan qayta yo'naltirilgan. Noyabr oyida tadqiqotchilar genga asoslangan VRX496dan foydalanish to'g'risida xabar berishdi immunoterapiya davolash uchun OIV ishlatadigan lentiviral vektor etkazib berish antisens ga qarshi gen OIV-konvert. A I bosqich klinik sinov, kamida ikkitasiga javob berolmagan surunkali OIV infektsiyasiga chalingan beshta sub'ekt antiretrovirus rejimlar davolandi. Vena ichiga bitta infuzion autolog CD4 VRX496 bilan genetik jihatdan o'zgartirilgan T hujayralari yaxshi muhosaba qilingan. Barcha bemorlarda virus yuki barqaror yoki kamaygan; beshta bemorning to'rttasida CD4 T hujayralari soni barqaror yoki ko'paygan. Besh bemorning hammasida OIVga qarshi immunitetning barqaror yoki ko'payganligi kuzatilgan antijenler va boshqalar patogenlar. Bu AQShda o'tkazilgan klinik sinovda lentiviral vektorning birinchi bahosi edi.May oyida tadqiqotchilar irsiy terapiya bo'yicha birinchi genoterapiya sinovini e'lon qilishdi setchatka kasalligi. Birinchi operatsiya 23 yoshli britaniyalik Robert Jonsonga qarshi 2007 yil boshida amalga oshirildi. Leberning tug'ma amaurozi mutatsiyalar natijasida kelib chiqqan irsiy ko'r-ko'rona kasallikdir RPE65 gen. Bolalarda o'tkazilgan kichik klinik sinov natijalari aprel oyida e'lon qilindi. Rekombinantni etkazib berish adeno bilan bog'liq virus RPE65 tashiydigan (AAV) ijobiy natijalarga erishdi. May oyida yana ikkita guruh ushbu holatni davolash uchun gen terapiyasidan foydalangan holda mustaqil klinik tekshiruvlarda ijobiy natijalar haqida xabar berishdi. Uchala klinik tekshiruvda ham bemorlar funktsional ko'rishni aniq nojo'ya ta'sirlarsiz tikladilar.Sentyabr oyida tadqiqotchilar berishga muvaffaq bo'lishdi trikromatik ko'rish ga sincap maymunlari. 2009 yil noyabr oyida tadqiqotchilar o'limni to'xtatishdi genetik buzilish deb nomlangan adrenoleukodistrofiya a dan foydalangan holda ikkita bolada lentivirus ning ishlaydigan versiyasini etkazib beradigan vektor ABCD1, buzuqlikda mutatsiyaga uchragan gen. Aprel gazetasida gen terapiyasi ko'rib chiqilganligi haqida xabar berilgan axromatopsiya (rangli ko'rlik) itlarda nishonga olish yo'li bilan konus fotoreseptorlar. Konusning funktsiyasi va kunduzgi ko'rish kamida 33 oy davomida ikki yosh namunada tiklandi. Keksa itlar uchun terapiya samarasiz edi. Sentyabr oyida Frantsiyadagi 18 yoshli erkak bemor bilan beta-talassemiya mayor muvaffaqiyatli davolandi.. Beta-talassemiya merosi meros qilib olinadi qon kasalligi unda beta gemoglobin yo'qolgan va bemorlar doimiy hayotga bog'liq qon quyish.Texnika lentiviral vektordan foydalanib, insonning ß-globin genini tozalangan qonga va ilik 2007 yil iyun oyida bemordan olingan hujayralar. Bemorning gemoglobin darajasi 9 dan 10 g / dL gacha barqaror edi. Gemoglobinning uchdan bir qismida virusli vektor tomonidan kiritilgan shakl mavjud va qon quyish kerak emas edi. Keyinchalik klinik sinovlar rejalashtirilgan. Suyak iligi transplantatsiyasi talassemiya kasalligining yagona davosi, ammo bemorlarning 75% mos keladigan donorni topa olmaydi.

Xulosa
O'zgartirilgan antigen, antisense / uch karra spiral yondashuvidan foydalangan holda saraton immunogeni terapiyasi Janubiy Amerikada 2010/11 yillarda Bogota shahridagi La Sabana Universitetida joriy qilingan (Etik Qo'mita 2010 yil 14-dekabr, P-004-10-son). IGF-Iga qaratilgan gen diagnostikasi va gen terapiyasining axloqiy jihatlarini inobatga olgan holda, IGF-I o'smalari, ya'ni o'pka va epidermis saratonlarini davolashdi (Trojan va boshq. 2016). 2007 va 2008 yillarda bir kishi (Timoti Rey Braun) takroran davolash orqali OIV bilan davolandi gematopoetik ildiz hujayrasini transplantatsiyasi (Shuningdek qarang allogeneik ildiz hujayralarini transplantatsiyasi, allogeneik suyak iligi transplantatsiyasi, allotransplantatsiya) ni o'chirib qo'yadigan er-xotin delta-32 mutatsiyasi bilan CCR5 retseptorlari. Ushbu davolash tibbiyot hamjamiyati tomonidan 2011 yilda qabul qilingan.Bu to'liq talab qilindi ablasyon mavjud bo'lgan ilik, bu juda zaiflashadi. Avgust oyida uchuvchi tadqiqotning uchta mavzusidan ikkitasi davolanganligi tasdiqlandi surunkali limfotsitik leykemiya (CLL). Genetik jihatdan o'zgartirilgan terapiya T hujayralari ifoda etgan hujayralarga hujum qilish CD19 kasallik bilan kurashish uchun oqsil. 2013 yilda tadqiqotchilar 59 bemorning 26 nafari to'liq remissiyaga erishganligini va asl bemor o'simsiz qolganligini e'lon qilishdi. Insonning HGF plazmidli DNK terapiyasi ning kardiyomiyotsitlar uchun potentsial davo sifatida tekshirilmoqda koronar arteriya kasalligi shuningdek, keyin yurakda paydo bo'ladigan zararni davolash miokard infarkti. 2011 yilda Neovaskulgen Rossiyada davolash uchun birinchi darajali gen terapevtik dori sifatida ro'yxatdan o'tgan periferik arteriya kasalligi, shu jumladan oyoqqo'llarning muhim ishemiyasi; u genlarni kodlashni ta'minlaydi VEGF.[105][35] Neovasculogen a plazmid kodlash CMV promouteri va 165 ta aminokislota shakli VEGF. FDA tomonidan 1-bosqich klinik sinovlari tasdiqlangan talassemiya Iyul oyida 10 ishtirokchilari uchun AQShdagi asosiy bemorlar. Tadqiqot 2015 yilgacha davom etishi kutilgandi.