O’simliklar gen muxandisligi. Ti-plazmida genetik haritasi
Ma’ruza rejasi
1.
Hujayra biotexnologiyasi
2.
Ўсимлик ҳужайраларини суюқ озуқа муҳитида ўстириш ва унда ген мухандислиги
усулларини қўллаш.
3.
Ўсимликларда ген мухандислиги ва биологик азотфиксация.
4.
Колекцион марказда сақланадиган ўсимликлар генофонди.
5.
Gen muhandisligining asosiy biotexnologik sxemasi
Tayanch sozlar:
Genlar ekspressiyasi, rDNK, Plazmidalar, biotexnologiya, Nuklein
kislotalar, Genom, Ribosoma, Bakyeriofaglar,Gen muhandisligi, r DNK , Transgen o‘simlik
Hujayra biotexnologiyasi
– hujayra, to‘qima va protoplastlarni ishlatishga asoslanadi.
Hujayralarni manipulyasiya (faoliyatiga qandaydir o‘zgarishlar kiritish) qilish uchun, ularni
o‘simlikdan
ajratib olish, o‘simlik organizmidan tashqarida yashashi va ko‘payishi uchun sharoit
tug‘dirib berish lozim. Ajratib olingan hujayra va to‘qimalarni sun’iy oziqa muhitida, steril
sharoitda (
in vitro
) o‘stirish usuli ajratilgan
to‘qimalar kulturasi
deb
nom oldi va ularni
biotexnologiyada ishlatish mumkinligi sababli katta ahamiyat kasb etdi.
Biotexnologik jarayonlar sun’iy oziqa muhitida o‘stirilgan mikroorganizmlar, o‘simlik va
hayvon to‘qimalari, hujayralari va organellalaridan foydalanishga asoslanadi. Hozirgi vaqtda
dunyoni ko‘plab mamlakatlarida biotexnologiyani rivojlanishiga alohida e’tibor berilmoqda. Bunga
asosiy sabab, biotexnologiyani boshqa texnologiyalarga nisbatan bir qator ustunlikka egaligidir.
Masalan, biotexnologik jarayonlar juda kam energiya talab qiladilar, deyarli chiqindisiz, ekologik
toza
va
h.k.SHuning
bilan
bir
qatorda,
biotexnologiya
standart
jihozlardan
va
preparatlardan foydalanadi
va iqlim sharoitiga
qaramasdan hamda ko‘p maydon egallamagan
holda jarayonlarni yil bo‘yi o‘tkazishga asoslanadi.
Aytib o‘tilgan ustunliklar, o‘simliklarni va
hayvonlarni hujayralari, to‘qimalari va organlariga
ham tegishlidir.
O‘simlik hujayrasi orqali in vitro sharoitida
yaratilgan
biologik tizim, shakllangan o‘simlikning
ayrim belgilarini o‘zida saqlaydi. Bunday sun’iy
biologik tizim ikki xili mavjud: biri kallus
ko‘rinishida bo‘lib, ikkinchisi esa hujayralarning
suspenziya holatidadir. Kallus geterogenli bo‘lib,
diffferensiyalanmagan hujayralarning yig‘indisidir.
Mazkur massa, to‘liq o‘simlikka o‘xshash ayrim
metabolitlarning sintezlash faoliyatiga ega.
Hujayralarning suspenziyasi kallusga nisbatan
gomogen bo‘lganligi uchun tezroq o‘sish va
muhitga moslashish qobiliyati yuqori bo‘ladi.
Hujayraning alohida o‘simlikka aylanishi u uchun
juda kuchli stress omili desa bo‘ladi.
Bu jarayonda
hujayra metabolizmini ko‘p tomonlari o‘zgarishga
yuz tutadi. Birinchi navbatda mazkur tizim
genomning
funksional
qirralari
o‘zgaradi.
YAshashga moslashuvchi genlar faollansa, hujayralarning differensirovkasi uchun javob beradigan
genlar repressiyalanadi.
Hujayralar majmuasining bunday holati mikrob hujayrasiga nisbatan metabolitlarni ko‘proq
sintezlaydi. O‘simlik hujayralarrining kallus xolati genetik va biokimyoviy tadqiqot izlanishlari
uchun ajoyib modeldir. Masalan, to‘liq o‘simliklarda individual oqsillarning sintezi va ularning
stabilligini kuzatish juda murakkab bo‘lib, hujayra ekmasida bunday ilmiy ishlarni osonlik bilan
bajarish mumkin. Xujayralarning to‘plami bo‘lgan ekmada ilmiy-amaliy ishlar olib boriladi.
Protoplastlarning qo‘shilishidan hosil bo‘ladigan o‘simlik regenerantlarini tayyorlash mumkin.
O‘simlik hujayra qobig‘ini ferment yordamida gidrolizlab, “kiyimsiz”
hujayra yoki protoplastlari
ajratiladi. “Tashqi qobig‘i” yo‘q hujayralarni bir-birlai bilan qo‘shilishini, o‘simlik hujayralarini
bunday qo‘shilishi hayvon hujayralarini qo‘shilishiga o‘hshasa ham, biroq jiddiy farqlar mavjuddir.
Hayvon hujayralari qo‘shilsa yangi hujayra hosil bo‘ladi, o‘simlik protoplastlari qo‘shilishidan ham
gibrid hujayra hosil bo‘lib, so‘ng o‘simlik shakllandi. Paraseksual gibridlanish asosida felogenetik
bir-biridan uzoq, jinsiy yo‘l bilan chatishtirib bo‘lmaydigan, o‘simlik turlarini gibridlash mumkin.
Mazkur usul orqali gibridlanayotgan ikki tur o‘simliklaridagi genlarni har xil variantlarda
o‘zgartirish mumkin.
Ikki xil protoplastlarni qo‘shilishini ta’minlaydigan induktor polietilenglikol yoki o‘zgaruvchan
elektr maydoni bo‘lishi kerak. Aralashma oynaga tomizilib, 15-20 daqiqadan keyin qo‘shilgan
aralashma ajratilib, maxsus oziqali muhitdao‘stiriladi. Ma’lum vaqtdan so‘ng, hujayra qobig‘i
regeneratsiyaga uchrab, u gibridga aylanadi. SHunday somatik gibridlardan birlamchi va ikkilamchi
metabolitlarni ajratish mumkin. Birlamchi metabolitlardan amaliyot uchun o‘simlik fermentlari
katta ahamiyatga ega.
O‘simlik fermentlarining ba’zilari mikroorganizm fermentlariga
nisbatan kam toksik
hususiyatga ega bo‘lib, toza holda bo‘lmasa ham sanoat va tibbiyotda ishlatish mumkin. O‘simlik
hujayralari turli metabolitlarni sintezlaydi. O‘simlik hujayralari sintezlaydigan ikkilamchi
metabolitlarni ko‘pchiligini laboratoriya sharoitida sintezlab bo‘lmaydi. SHunday qilib, o‘simlik
hujayralari tomonidan sintezlanadigan juda ko‘p metabolitlar sanoat va tibbiyotda keng ishlatiladi.
O‘simlik hujayralarini klonlash, maqsadga muvofiq mutatsiyaga uchatish orqali gen muhandisligi
asosida arzon, sifatli, miqdori ko‘p bo‘lgan metabolitlar olinib, har xil maqsadlarda ishlatilmoqda.
Ikkilamchi modda almashinuvi asosida hosil bo‘ladigan ko‘pchilik mahsulotlar, hozirgi kunda,
o‘simlik hujayrasi ishtirokida laboratoriya va sanoat miqyosida ajratib olinmoqda. Jumladan, yurak
glikozidlari, steroid, alkoloid va boshqa qimmatli dori-darmon yuqorida ko‘rsatilgan
usul asosida,
o‘simlik hujayralaridan ajratish yo‘lga qo‘yilgan. Mazkur sohaning muammolaridan biri shuki,
genetik turg‘un o‘simlik hujayralarini yaratishdir. Ma’lumki, metabolitlar hujayra shirasida yoki
vakuolalarda to‘planadi. Bu o‘rinda shuni aytib o‘tish joizki, hozirgi kunda gen muxandisligi ushbu
metabolitlarni ajratish, tozalash o‘ziga xos qiyinchiliklarga ega ekanligi bilan ancha muammo
tug‘dirmoqda. O‘simlik hujayralarini genetik transformatsiya qilish yaxshi natijalar bermoqda.
Transformatsiyaning mohiyati shundan iboratki, protoplastlarga maqsadli genetik axborot kirgizilib,
keyingi bosqichda klonlash va regeneratsiya asosida to‘liq o‘simlik hujayrasi hosil qilinadi (gen
muhandislik
texnikasi
keyingi
bobda
yozilgan.
Ko‘rsatilgan
rasmda
(42-rasm)
transformatsiyalangan protoplast → hujayra suspenziyasi → kallusli to‘qima → to‘liq o‘simlik
hosil bo‘lishi tasvirlangan. Mazkur usulning o‘tkazish jarayonida birinchi va oxirigi bosqichlar bir
oz murakkab va muhim hisoblanadi. So‘nggi operatsiya qimmatli va samarali bo‘lib, bu jarayonda
yangi maqsadli transgen o‘simlik etishtiriladi.
Dostları ilə paylaş: