Cedia ® Fenobarbital II test Kiti
Yüklə 59,73 Kb. Pdf görüntüsü
|
- Bu səhifədəki naviqasiya:
- Test Özeti ve Açıklaması
- Reaktifl er 1 Enzim Donör Sulandırma Tamponu
- 2 Enzim Akseptör Sulandırma Tamponu
- Reaktif Hazırlama ve Saklama
- R 1 Enzim donör solüsyonu
- R 2 Enzyme acceptor solution
- R1 Solüsyonu
- Kalite Kontrol ve Kalibrasyon
- Kalibrasyon Frekansı
- Spesifi k Performans Özellikleri
- Çalışma içi hassasiyet Toplam hassasiyet
- Deming regresyonu Lineer regresyon
- %Yüksek Numune Beklenen Değer (μg/mL) Test Edilen Değer (μg/mL) %Geri Kazanım
- Spesifi site
- Madde Konsantrasyon Madde Konsantrasyon
|
CEDIA ®
İn Vitro Diyagnostik Kullanım İçin 100003 (17 mL, 17mL Kit) Kullanım Amacı CEDIA
® Fenobarbital II Test Kiti insan serumunda veya plazmasındaki fenobarbital miktar ölçümü için tasarlanmış in vitro diyagnostik tıbbi bir cihazdır.
Fenobarbital özellikle fokal motor veya sensör ve grand mal nöbetler için, epilepsi tedavisi için geniş çapta reçetelenmektedir. 1,2
2 ila 3 mg/kg oral dozlardan sonra, fenobarbital 12 ila 18 saat içinde neredeyse tamamen pik seviyelerinde absorbe edilir. 3 Sirkülasyondaki fenobarbital göreceli olarak düşük ilişki sabitleriyle plazma proteinlerine yaklaşık olarak %40 ila %50 bağlıdır. 4 Fenobarbitalin majör metabolik yolu fenil halkasının, hipnotik aktivitenin devoid bir ajanı olan p-hidroksifenobarbitale hidroksilasyonudur, bundan sonra serbest form ve glukuronik asitle eşlenik formdan eşit miktarlarda idrarda atılır. 4 Serumdaki 15-40 μg/mL fenobarbital konsantrasyonlarının normalde maksimum nöbet kontrolü için terapötik aralık dahilinde olduğu düşünülür. 5
Fenobarbital konsantrasyonlarını izleme ihtiyacı dar terapötik indeks ve ilaç absorpsiyonundaki, metabolizmadaki ve kleransteki bireysel oranlardaki geniş çeşitlilik nedeniyledir. 7 Fenobarbital terapinin toksisitesi sedasyon, nistagmus, ataksiya, paradoksikal heyecan, kan diskrasya (hamilelik sırasında ilaç verilmiş annelerin yeni doğan bebeklerinde görülen koagülasyon defektleri de dahil), non-spesifi k hepatik değişiklikler, isilik (ciddi eksfolyatif formlar dahil), osteomalasya, omuz-el sendromu ve komayı içerir. 3,8,9,10,11 Diğer klinik bilgilerle birlikte, serum veya plazma fenobarbital seviyelerinin izlenmesi, hem subterapötik hem de zararlı toksik ilaç seviyelerinden kaçınırken hekime dozajı ayarlamaya ve optimum terapötik etkiyi elde etmeye yardımcı olan temel bir araç sağlar. CEDIA Fenobarbital II Test Kiti rekombinan DNA teknolojisini (ABD Patent No. 4708929) benzersiz bir homojen enzim immüno test kiti sistemi üretmek için kullanır. 12
Test kiti, genetik olarak iki inaktif bölüme tasarlanmış olan bakteriyel enzim -galaktosiadazı temel alır. Bu bölümler spontan olarak, tam olarak etkin enzim oluşturmak için tekrar birleşir, test kiti formatında, spektrofotometrik olarak ölçülebilen bir renk değişikliği oluşturarak, substratı ayırır. Test kitinde, yer değiştirme biçimi, azalan arkaplan gürültüsü ve sinyal-gürültü oranında beraberinde gelen artış ile arttırılmış duyarlılık ve hassasiyet sağlamak için kullanılır. Test kitinde, numunedeki fenobarbital antikor ED-fenobarbital eşlenik kompleksin fraksiyonunun yerini değiştirir. Dolayısıyla, EA reaktifi eklenir ve reaktanlar, serbest ED-fenobarbital eşleniği ile bütünleşmeyi sağlamak üzere inkübe edilir. Oluşan aktif enzim ve meydana gelen absorbans miktarı, numunede mevcut analit miktarıyla doğru orantılı olarak değişir. 12
koruyucu içerir. 1a Enzim Donör Reaktifi : Fenobarbitale eşlenik 38 μg/L Enzim donörü, 16,1 mg/L fare monoklonal anti-fenobarbital antikoru, 1,64 g/L klorofenol kırmızı- -D-galaktopiranosid, tampon tuzlar ve koruyucu içerir. 2 Enzim Akseptör Sulandırma Tamponu: MOPS (3-[-morfolino-propanesülfonik asit tampon), tampon tuzları, 0,945 g keçi anti-fare antikoru, stabilizörler ve koruyucu içerir. 2a Enzim Akseptör Reaktifi : 0,171 g/L Enzim akseptörü, salım maddesi, tampon tuzları ve koruyucu içerir. Gereken (ancak sağlanmayan) Ek Malzemeler: Kit Açıklaması 100007
CEDIA Core TDM Multi-Cal Ticari Kontrol (ler) – Uygun kontrol malzemesine dair öneriler için Müşteri Teknik Desteği ile iletişim kurun. Önlemler ve Uyarılar Yalnızca İn Vitro Diyagnostik Kullanım İçin. Reaktifl er %1’den az sodyum azit içerir. Deri ve mukoza tabakasıyla temasından kaçının. Etkilenen bölgeleri bol miktarda suyla yıkayın. Göze kaçtığında veya yutma durumunda derhal tıbbi destek alın. Sodyum azit kurşun veya bakır tesisatla reaksiyona girerek potansiyel patlayıcı metal azitler oluşturabilir. Böyle reaktifleri imha ederken, azit birikimini engellemek için her zaman bol miktarda suyla yıkayın. Açıkta olan metal yüzeyleri %10 sodyum hidroksitle temizleyin. Bu ürün Kaliforniya Eyaleti tarafından kansere ve/veya doğum kusurlarına veya diğer üreme risklerine neden olduğu bilinen kimyasal(lar) içerir. Reaktif Hazırlama ve Saklama Aşağıdaki talimatlardan herhangi bir istisna için uygulama sayfasına başvurun. Kiti solüsyonların hazırlanmasından hemen önce soğutulmuş depodan (2-8 °C) çıkarın. Olası kontaminasyonu minimuma indirmek için solüsyonları aşağıdaki sırada hazırlayın: R 1 Enzim donör solüsyonu: Ürünle birlikte verilen adaptörlerden birini kullanarak Şişe 1a’yı (ED Reaktifi) Şişe 1’e (ED Sulandırma Tamponu) bağlayın. Nazikçe ters çevirip Şişe 1a’daki tüm liyofi lize malzemenin Şişe 1’e aktarılmasını sağlayarak, karıştırın. Köpük oluşmamasına dikkat edin. Şişe 1a’yı ve adaptörü Şişe 1’den ayırın ve atın. Şişe 1’in kapağını kapatın ve (15-25 °C) yaklaşık 5 dakika bekletin. Yeniden karıştırın. Sulandırma tarihini şişe üstündeki etikete kaydedin. R 2 Enzyme acceptor solution: Ürünle birlikte verilen adaptörlerden birini kullanarak Şişe 2a’yı (EA Reaktifi ) Şişe 2’ye (EA Sulandırma Tamponu) bağlayın. Nazikçe ters çevirip Şişe 2a’daki tüm liyofi lize malzemenin Şişe 2’ye aktarılmasını sağlayarak, karıştırın. Köpük oluşmamasına dikkat edin. Şişe 2a’yı ve adaptörü Şişe 2’den ayırın ve atın. Şişe 2’nin kapağını kapatın ve (15-25 °C) yaklaşık 5 dakika bekletin. Yeniden karıştırın. Sulandırma tarihini şişe üstündeki etikete kaydedin. NOT 1: Bu kit içinde verilen bileşenler tek bir birim halinde kullanılmak üzere tasarlanmıştır. Farklı lotlardan bileşenleri karıştırmayın. NOT 2: Asıl reaktif şişesine farklı reaktif tapalarını takarak reaktifl erin çapraz kontaminasyonuna yol açmaktan kaçının. R1 Solüsyonunun rengi, sarı-turuncu olmalıdır. Rengin kırmızı veya mor-kırmızı olması reaktifi n kontamine olduğu ve atılması gerektiği anlamına gelir.
gerekir. Daha ayrıntılı bilgi için analizöre özel uygulama sayfasına başvurun. NOT 4: Sulandırılan EA solüsyonu stabilitesini sağlamak için, parlak ışığa uzun süre kesintisiz maruziyetten koruyun. Reaktifl eri 2-8 °C sıcaklıkta saklayın. DONDURMAYIN. Açılmamış bileşenlerin stabilitesini sağlamak için kutu veya şişe etiketleri üzerinde belirtilen son kullanma tarihine bakın.
Serum veya plazma (Na veya Li heparin; Na EDTA) numuneleri CEDIA Fenobarbital II test kiti ile kullanıma uygundur. Toplandığı zamandan test edildiği zamana dek serum veya plazma numunesinin kimyasal bütünlüğünü korumak için özen gösterilmelidir. Numuneleri kapatın, 2-8 °C’de saklayın ve toplanmadan sonraki 24 saat içerisinde test edin. Test 24 saat içerisinde gerçekleştirilemezse veya numune 24 saat içerisinde gönderilecekse numuneyi kapatın ve donmuş bir şekilde saklayın. Numuneleri -20 °C’de saklayın ve 2 hafta içinde test edin. Numunenin bütünlüğünü korumak için, köpüklenmeyi indüklemeyin ve tekrar eden dondurma ve çözmeden kaçının. Partikülat maddesi içeren numuneleri santrifüje sokun. Numune uzun süre (> 2 saat) boyunca separatörde saklandığında bazı terapötik ilaç konsantrasyonları azalır. 13
Sabit bir sıcaklık, pipetleme numuneleri, reaktifleri karıştırma, enzimatik oranlar ve tepkime zamanlamasını doğru bir şekilde sağlayan kimya analizörlerleri bu test kitini çalıştırmak için kullanılabilir. Bu test kiti ile iki (2) nokta kalibrasyonu kullanılır. Hitachi analizörleri durumunda, CEDIA Core TDM Multi-Cal Düşük Kalibratörünü S1 olarak ve CEDIA Core TDM Multi-Cal Yüksek Kalibratörünü S2 olarak kullanın. Tam analizör uygulama parametre ayarları için, Microgenics Corporation’da bulunan her bir cihaza özel uygulama sayfasına başvurun. Hitachi 911 analizörü: Barkod analizör tarafından okunmazsa, barkod etiketindeki numerik sekans klavye yoluyla manuel olarak girilebilir. Kalite Kontrol ve Kalibrasyon İyi laboratuvar uygulaması hasta numunelerinin test edildiği her gün ve bir kalibrasyonun gerçekleştirildiği her an, en azından iki kalite kontrol seviyesinin (düşük ve yüksek tıbbi karar noktası) kontrol edilmesini önerir. Herhangi bir eğilim veya kayma açısından kontrol değerlerini izleyin. Herhangi bir eğilim veya kayma saptanırsa veya kontrol belirtilen aralık dahilinde geri kazanılmazsa, tüm işletim parametrelerini inceleyin. Daha fazla yardım ve uygun kontrol malzemesine dair öneriler için Müşteri Teknik Desteği ile iletişim kurun. Tüm kalite kontrol koşulları yerel, eyalet ve/veya federal yönetmeliklere ve akreditasyon koşullarına uygun olarak gerçekleştirilmelidir. NOT: Kontrol hedeflerini ve aralıkları, bir reaktif lotu değişikliğinin ardından tekrar değerlendirin.
• reaktif şişesi değişikliğinden sonra • reaktif lotu değişikliğinden sonra • aşağıdaki kalite kontrol prosedürleri gerekli kıldıkça Sonuçlar ve Beklenen Değerler Çoğu hastada, 15-40 μg/mL (65-172 μmol/L) aralığında fenobarbital konsantrasyonları ile terapötik bir yanıt elde edilir. 5
Bu yüzden, terapötik aralıklar yalnızca bir rehber olarak sağlanmıştır ve bireysel hasta sonuçları diğer klinik semptomlarla ve bireysel klinik geçmişi ile yorumlanmalıdır. CEDIA Fenobarbital II Test Kiti 1,2 μg/mL ve 80 μg/mL (CEDIA TDM Multi-Cal Yüksek Kalibratör) arasındaki hasta fenobarbital numunelerinin miktarını belirlemek için tasarlanmıştır. Bu aralığın dışındaki numune sonuçları > 80 μg/mL veya < 1,2 μg/mL olarak bildirilmelidir (test kiti duyarlılık sınırı). 80 μg/mL’den fazla miktarda ölçülen numuneler de bir parça Multi-Cal Düşük Kalibratörle seyreltilmiş bir parça numune olarak bildirilir ve tekrar test edilir. Tekrar testte elde edilen değer şöyle türetilmelidir:
Asıl Değer = (2 x seyreltilmiş değer) – Multi-Cal Düşük Kalibratör değeri μg/mL’yi μmol/L’ye çevirmek için aşağıdaki çevirme faktörünü kullanın: μg/mL x 4,31 = μmol/L μmol/L x 0,232 = μg/mL
2 Kısıtlamalar 1. CEDIA Fenobarbital II Test Kiti performansı insan serumu ve plazma dışındaki (Na veya Li heparin; Na EDTA) beden sıvılarıyla sabitlenmemiştir. 2. Antikorlardan E. coli -galaktosidaza sahip hastaların insidansı aşırı derecede düşüktür. Ancak, böyle antikorları içeren bazı numuneler klinik profile uymayan suni olarak yüksek sonuçlarla sonuçlanabilir. Bu meydana gelirse, yardım için Müşteri Teknik Desteği ile iletişim kurun. 3. Bu test kiti entegre bir hücre yıkamasından yararlanan analizörlerde valide edilmiştir. Analizörünüz entegre bir hücre yıkamasına sahip değilse, alternatif bir prosedür için yerel Thermo Fisher Scientifi c temsilcinizle iletişim kurun. Spesifi k Performans Özellikleri Hitachi 911 analizörü üzerinde elde edilen tipik performans verileri aşağıda gösterilmiştir. 13 Laboratuvarınızda elde edilen sonuçlar bu verilerden farklı olabilir. Hassasiyet Paketlenmiş reaktifl er, havuzlu insan serumu ve kontrol serası kullanılarak ölçülen hassasiyet çalışmaları NCCLS tarafından modifi ye edilen replikasyon deney kılavuzları kullanıldığında aşağıdaki Hitachi 911 ile μg/mL sonuçlarını verir:
N 120 120 120
120 120
120 x ¯ (μg/mL) 9,4 25,9
52,7 9,4
25,9 52,7
SD (μg/mL) 0,2
0,5 0,9
0,5 1,0
1,9 CV%
2,1 1,9
1,7 5,3
3,8 3,6
Yöntem Karşılaştırması CEDIA Fenobarbital II Test Kitini (y) ticari fl oresans polarizasyon immün test kiti (x) ile kullanan bir karşılaştırma aşağıdaki korelasyonu vermiştir (μg/mL):
y = -2,01 + 1,08x r = 0,988 Sy.x = 1,79 y = -1,69+1,06x r = 0,988 Sy.x = 2,63 Ölçülen numunelerin sayısı: 126 Numune konsantrasyonları 1,7 ve 73,3 μg/mL arasında olmuştur.
Test kitinin lineerliğini değerlendirmek için, yüksek bir numune Core TDM Multi-Cal Düşük Kalibratörle seyreltilmiştir. Geri kazanım yüzdesi, test edilen değerin beklenen değere bölünmesi ile belirlenmiştir.
100,0
- 84,6
- 90,0
78,4 75,6
96,4 80,0
69,8 66,0
94,6 70,0
61,1 60,4
98,8 60,0
52,5 52,9
101,9 50,0
43,8 44,6
101,9 40,0
35,2 34,7
98,8 30,0
26,5 26,6
100,4 20,0
17,8 14,7
99,1 10,0
9,2 9,1
99,1 0,0
- 0,6
- Geri Kazanım Test kitinin geri kazanımını değerlendirmek için fenobarbital düşük fenobarbital numunesine eklenmiştir ve analitsiz numune ile seyreltilmiştir. Geri kazanım yüzdesi, test edilen değerin beklenen değere bölünmesi ile belirlenmiştir.
100,0
- 85,4
- 90,0
83,0 78,1
94,0 80,0
73,8 71,6
97,1 70,0
64,5 63,5
98,6 60,0
55,3 55,8
100,8 50,0
46,0 46,7
101,4 40,0
36,8 37,0
100,6 30,0
27,6 27,7
100,6 20,0
18,3 17,9
97,7 10,0
9,1 8,9
98,5 0,0
- 0,1
- Spesifi site Aşağıdaki bileşikler CEDIA Fenobarbital II Test Kitinde çapraz reaktivite için test edilmiştir. Bileşik Konsantrasyon test edilmiş (μg /mL) %Çapraz reaktivite 1,3-dimetilbarbiturik asit 1.000
2-Fenil-2-etilmalonamid 1.000
5-(p- Hidroksifenil)-5-fenilhidantoin 1.000
Amitriptilin 1.000
Aporobarbital 1.000 5,3
Barbital 2.000
1,6 Butabarbital 1.000 2,3
Karbamazepin -10, 11-epoksid 1.000
< 0,12 Karbamazepin 1.000
Klorazepat 2.000
Klorpromazin 1.000
Diazepam
1.000 < 0,12 Etotoin
1.000 < 0,12 Etosuksimid 1.000
Glutetimid 1.000
İmipramin 2.000
Mefenitoin 1.000
Metsuksimid 1.000
Pentobarbital 1.000
Fenitoin
400 0,9
p-Hidroksifenobarbital 2.000
< 0,12 Primidon
1.000 0,5
Prometazin 1.000
< 0,12 Sekobarbital 2.000 2,2
Sultiam 1.000
< 0,12 Tiopental 2.000 0,7
Valproik Asit 2.000
0,7 CEDIA Fenobarbital II Test Kiti’nin şunlarla girişimi bulunmamıştır: Madde Konsantrasyon Madde Konsantrasyon Bilirubin ≤ 66 mg/dL Toplam protein ≤ 13 g/dL Hemoglobin ≤ 1.000 mg/dL Trigliserit ≤ 1.000 mg/dL Romatoid faktörü ≤ 180 IU/mL Amobarbital (> %20) ve Mefobarbital (> %100) CEDIA Fenobarbital II Test Kiti ile belirgin girişim gösterir. Duyarlılık CEDIA Fenobarbital II Test Kitinin minimum saptanabilen konsantrasyonu 1,2 μg/mL’dir (5,2 μmol/L). Bu değer Core TDM Multi-Cal Düşük Kalibratörün üzerindeki iki standart sapmaya eşit bir yanıt verecek olan fenobarbital konsantrasyonunu hesaplayarak belirlenmiştir. Microgenics GmbH Spitalhofstrasse 94 D-94032 Passau Germany Tel: +49 (0) 851-88 68 90 Fax: +49 (0) 851-88 68 910 3
1. Buchthal, F. Lennox-Buchthal, M.A.: Relation of Serum Concentration to Control Seizures, in Woodbury, D.M., Pentry, J.K., and Schmidt, K.P. (eds):Antiepileptic Drugs, NY: Raven Press, 1972; 335-343. 2. Hauptmann, A.: Luminal bei Epilepsy, Munch. Med. Wschr.,1912; 59:1907-1909. 3. Penry, J.K., Hewmark, M.E.: The use of anti-epileptic drugs, Annals of Internal Medicine, 1979; 90:207-218. 4. Glazko, A.J.: Antiepileptic Drugs: Biotransformation, Metabolism, and Serum Half life, Epilepsia, 1975;16:367-391. 5. Buchthal, F., Svensmark,O.: Serum Concentrations of Diphenylhydantion (Phenytoin) and Phenobarbital and Their Relation to Therapeutic and Toxic Eff ects, Psychiat. Neurol. Neurochir.,1971; 74:117-135. 6. Kutt, He., Penry, K.: Usefulness of Blood Levels of Anti-Epileptic Drugs, Arch. Neurol., 1974; 3:283-288. 7. Buchthal, F., Svensmark, O.: Aspects of the Pharmacology of Phenytoin (Dilantin) and Phenobarbital Relevent to Their Dosage in the Treatment of Epilepsy, Epilepsia,1960; 1:373-384. 8. Eadie, M.J., Tyrer, J.H.: Anticonvulsant Therapy: Pharmacological Basis and Practice, London: Churchill Livingstone, 1974. 9. Deut, C.E., Richens, A., Rowe, D.J.E., Stamp, T.C.B.: Osteomalacia with long-term anticonvulsant therapy in epilepsy, Brit. Med. J., 1970;4:69-72. 10. Farwell, J.R., Lee, Y.J., Hirtz, D.G., Sulzbacher, S.I., Ellenberg, J.H., Nelson, K.B.: Phenobarbital for febril seizures -eff ects on intelligence and on seizure recurrence, N. Engl. J. Med., 1990; 322: 363-369. 11. Henderson, D.R., Friedman, S.F., Harris, J.D., Manning, W.B. and Zoccoli, M.A.: CEDIA, a New Homogeneous Immunoassay System, Clin. Chem. 1986; 32(9):1637-1641. 12. Dasgupta, A., Dean, R., Saldand, S., Kinnaman G., McLawhon, R.: Absorption of Therapeutic Drugs by Barrier Gels in Serum Separator Blood Collection Tubes. American Journal of Clinical Pathology. 1993:456-461. 13. Thermo Fisher Scientifi c’e bağlı Microgenics dosyalarında kayıtlı bilgiler. Prospektüs güncellemeleri için: www.thermoscientifi c.com
Lütfen yerel Thermo Fisher Scientifi c temsilcinize başvurun. CEDIA Roche Diagnostics’in tescilli ticari markasıdır.
Microgenics Corporation 46500 Kato Road Fremont, CA 94538 USA ABD Müşteri ve Teknik Destek: 1-800-232-3342 10003630-4-TR 2014 08 Yüklə 59,73 Kb. Dostları ilə paylaş:
|