3- FERMENTLARNING FAOLLIGIGA PH MUHITINING TA'SIRI Tushuntirish. Turli fermentlar uchun ma'lum pH qiymatlari (eritmaning kislotaligi) mavjud bo'lib, unda ferment eng faol (optimal pH) hisoblanadi.
Masalan, pepsin uchun, pH optimal pH 1,5–2,5, ishqoriy fosfatazaga pH 9-10, so'lak amilazasi va boshqa fermentlar uchun optimal pH 6,8 bo’lib, kislotali va ishqoriy muhitda amilaza faoliyati kamayadi.
So'lak amilazasi uchun optimal pH ni kraxmalning turli pH qiymatlarida gidroliz darajasini aniqlash yoli bilan aniqlash mumkin. Kraxmalning parchalanishi uning yod eritmasi bilan reaktsiyasi bilan baholanadi.
Ma'lum bir pH qiymatida kraxmalning gidrolizi butunlay sodir bo'ladi, lekin bu pH nuqtadasi kislotali yoki gidroksidi muhitga siljihi bilan kraxmalning bparchalanishi qisman amalga oshadi yoki kraxmal hech qanday gidrolizga uchramay qoladi.
Tadqiqot materiallari va reagentlar. 10– 20 marta suyultiriladi so'lak, 1% kraxmal eritmasi, yod eritmasi, pH 3,0, 7,0 va 9,0 bo’lgan bufer eritmalari.
Asbob uskunalar:Probirkalar solingan shtativ, termostat yoki 37– 40°s bo'lgan suv hammomi. Ishning borishi. 1. Uchta probirkaga 3 ml suyultirilgan so'lak quyiladi. Probirkalarga pH 3,0, 7,0 va 9,0 bo’lgan bufer eritmalarida 1 ml dan qo'shiladi;
2. 3 ml 1 % li kraxmal eritmasi ham solinadi.
3. Probirkalarning ichidagi moddalar aralashtiriladi va 37-40 ° C haroratdagi suv hammomiga solinadi.
4. 10 daqiqadan so'ng, probirkalarni olinadi, har biriga 2-3 tomchi yod eritmasidan qo'shiladi va suyuqlikning rangi kraxmal gidrolizining darajasiga qarab baholanadi.
5. Kuzatuv natijalari jadvalda keltirilgan. Unda amilaza fermenti uchun optimal pH qiymati haqida xulosa chiqarish mumkin.
Jadval № Amilaza fermenti uchun optimal pH qiymatini aniqash
