Probirka 1500 ayln/daq, 30 daqiqa sentrifuga qilinadi.
Halqa hosil qilib interfazada qolgan limfotsitlarni Paster pipetkasi bilan olinib, ikki marotaba 199 muhitida 800 ayln/daq. 10 daqiqa sentrifugada yuviladi.
Limfotsitlar Gorayeva kamerasida sanaladi va ularning konsentratsiyasi 1 ml da 2 mln. hujayraga yetkaziladi (62-rangli rasm). Limfotsitlarni ishlatishdan oldin ularni yashash faoliyati o'rganiladi. Buning uchun limfotsit suspenziyasi Paster pipetkasida buyum oynasiga bir tomchi olinib, uning ustiga 1% tripan ko'ki eritmasi tomiziladi va ustiga yopqich oynacha qo'yilib, 2-3 daqiqadan keyin mikroskoptla limfotsitlar 100 tagacha sanab chiqiladi (o'lgan limfotsitlar ko'k rangga bo'yaladi). Tirik limfotsitlar 95% kam bo'lmasligi kerak. T-limfotsitlarni qo'y eritrotsitlari bilan E-rozetka hosil qilish usuli yordamida aniqlash. 1.0,1 ml limfotsit aralashmasiga 0,1 ml 1% qo'y eritrotsitlari qo'shiladi, aralashma 5 daqiqa 37°C termostatga qo'yiladi, so'ng 800 ayln/daq., 5 daqiqa sentrifuga qilinadi va 0-4°C muzlatkichda 30-60 daqiqa saqlanadi. 2. Cho'kmaning ustki qismidagi suyuqlik Paster pipetkasi bilan sekin so'rilib tashlanadi, aralashma o'ta ehtiyotkorlik bilan probirkada aralashtiriladi va 2,5% sovutilgan glyutar-aldegid qo'shiladi, ya'ni oxirgi konsentratsiyasi 0.6% bo'lgunga qadar. Xona temperaturasida 10 daqiqa saqlanadi.
Cho'kmadan preparat-surtma tayyorlanib, metil spirtida 10 daqiqa fiksatsiya qilinadi. Surtma Romanovkiy-Gimza usulida bo'yaladi.
Surtma yorug'lik mikroskopida (immersion) ko'riladi, 100-200 tagacha limfotsitlar sanaladi. Rozetka hosil qiluvchi T-limfotsit deb uchta va undan ortiq qo'y eritrotsitlarni o'ziga biriktirib olgan limfotsitlarga aytiladi (63-rangli rasm). Sog'lom odamlarda T-limfotsitlarning bu populyatsiyasi 50- 70 foizni tashkil qiladi.
