Rozdělení antimikrobiáLNÍch látek, vyšETŘOVÁNÍ citlivosti m. Hanslianová

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI

• M.Hanslianová

• Antibiotické středisko

• OKM FN Brno

Antimikrobiální látky

• Antibiotika= léčiva používaná k profylaxi a terapii infekčních onemocnění

• Antimykotika

• Antiparazitika

• Antivirotika

Betalaktamová antibiotika

• Obsahují betalaktamový kruh

• Inhibice syntézy buněčné stěny- baktericidní

• Zanedbatelná toxicita (lze podávat i novorozencům, těhotným a lidem s poruchami orgánových funkcí)

• Alergické reakce, zkřížené alergie

• Peniciliny

• Cefalosporiny

• Karbapenemy

• Monobaktamy

Makrolidy

• Erythromycin, klarithromycin, azithromycin

• Inhibice proteosyntézy- bakteriostatické

• Lék volby u alergiků na penicilinová antibiotika

• Účinek na tzv. „atypické mikroby“(mykoplasmata, ureoplasmata, chlamydie, legionely)

Linkosamidy

• Linkomycin, klindamycin

• Inhibice proteosyntézy- bakteriostatické

• Výborný průnik do kostní tkáně

• Možnost vzniku pseudomembranózní kolitidy vyvolané Clostridium difficile

Tetracykliny

• Tetracyklin, doxycyklin

• Inhibice proteosyntézy- bakteriostatické

• Účinek na tzv. „atypické patogeny“(mykoplasmata, ureoplasmata, chlamydie, legionely)

• KI u dětí do 8 let

• Glycylcykliny- nová řada tetracyklinů- tigecyklin

Aminoglykosidy

• Gentamicin, tobramycin, amikacin

• Inhibice proteosyntézy- baktericidní!

• Pouze parenterální

• Nefrotoxické, ototoxické- nutnost měření hladin

• Prokázaná synergie s betalaktamy

Amfenikoly

• chloramfenikol

• Inhibice proteosyntézy- bakteriostatický

• Výborné průniky do tkání včetně likvoru

• Toxicita, zejména útlum kostní dřeně (reverzibilní, ireverzibilní)

• Omezený pouze na některé indikace

Polypeptidy

• Kolistin

• Porucha funkce buněčné membrány- baktericidní

• Toxické- nefrotoxicita

• V současné době jediné fungující antibiotikum u polyrezistentních kmenů gramnegativních baktérií

Glykopeptidy

• Vankomycin, teikoplanin

• Inhibice syntézy buněčné stěny- baktericidní

• Rezervní antibiotika pro rezistentní stafylokoky a enterokoky

• Nefro-, ototoxicita

Chinolony

• Ciprofloxacin, ofloxacin, norfloxacin

• Inhibice syntézy nukleových kyselin- baktericidní

• Antibiotika ohrožená v současné době výrazným vzestupem rezistence

• Selektory rezistentních kmenů

Ostatní antibiotika

• Ansamyciny- rifampicin

• Sulfonamidy- kotrimoxazol

• Nitroimidazoly- metronidazol

• Nitrofurany- nitrofurantoin

• Streptograminy- Synercid

• Oxazolidinony- Zyvoxid

Vyšetřování citlivosti k antibiotikům

• Disková difuzní metoda

• Stanoví se citlivost nebo rezistence podle toho, zda vyšetřovaná baktérie ve stanovené koncentraci buněk na agarové půdě vytvoří nebo nevytvoří přípustnou inhibiční zónu kolem disku s určitou koncentrací antibiotika po předepsané době inkubace

1) Půdy

• Mueller Hinton agar (MHA)- nejpoužívanější, nízký obsah antagonistů antibiotik

• MHA+ 5% ovčí krve- pro náročnější baktérie (pneumokoky, streptokoky,meningokoky)

• krev- ovlivňuje výsledky citlivosti!

• Obohacené půdy pro některé náročnější baktérie- haemofily- HTM, gonokoky

• Ph půdy, výška půdy

2) Inokulum

• Zásadním způsobem ovlivňuje výsledek diskové difuzní metody

• Koncentrace inokula- 0,5-1 McFarlandova zákalového standardu (1,5-3x 10 na 8 buněk/ml)

• Správné inokulum= splývavý růst kmene

• Očkování na suché půdy vytemperované na pokojovou teplotu

• Očkování přelitím

• Očkování roztěrem

3) Antibiotické disky

• Sestavy antibiotik podle vyšetřované baktérie (doporučené sestavy-NRL pro antibiotika)

• Základní a rozšířené řady

• Sestavy antibiotik podle klinického materiálu

• Terapeutické disky, diagnostické disky

• Inkubace 18-24 hodin při 36 st.C

• Aerobní, anaerobní, mikroaerofilní (5% CO2) prostředí

• Hodnocení inhibiční zóny- porovnání s hraničními hodnotami pro citlivé kmeny

• Kvalitativní a kvantitativní hodnocení

• U některých kmenů a některých materiálů je disková difuzní metoda nedostačující, nutno vyšetřit MIC- minimální inhibiční koncentraci!

• MIC= nejnižší koncentrace antimikrobiální látky, která je schopna zastavit růst baktérie

• MBC= nejnižší koncentrace antibiotika, která je schopna usmrtit baktérii

Vyšetřování citlivosti k antibiotikům

• Diluční mikrometoda

• hodnotí se MIC v jamkách mikrotitrační destičky, které obsahují zvolené koncentrace antibiotik v bujónu

• MIC= první nezkalená jamka mikrotitrační destičky

• Inokulum (ředění 1:10)

• Očkování

• Inkubace

• Sestavy antibiotik

MIC- výhody

• Kvalitativní metoda- číselná hodnota

• Hodnota MIC důležitá pro některé kmeny a diagnózy

• Klinické breakpointy:

• Streptococcus pneumoniae- meningitis x pneumonie

MIC- nevýhody

• Obtížné stanovení různých typů rezistence a produkce betalaktamáz

E test

• Plastikový proužek napuštěný antibiotikem ve stoupající koncentraci

• MIC- odečítá se v místě, kde inhibiční zóna protíná proužek

• Vyšetření citlivosti resp. rezistence k antibiotikům má řadu úskalí a vyžaduje erudici a přesnost

• Ideální je kombinace více metod v laboratoři