215
u В варианте культивирования семядолей арбуза на среде с 3 мг/л БАП
был зафиксирован высокий процент индукции каллусогенеза - 100%, а также
высокие
параметры
развития
каллусной
ткани
480,4±66,0
мм
3
.
Сформированный на данном варианте среды каллус характеризовался при
дальнейшем культивировании высокой регенерационной способностью –
55%. На данном варианте питательной среды образовывались структуры,
состоящие из 7,0 шт. побегов. Побеги
сформировавшиеся на данном
варианте имели высоту 25,3±3,2 мм (рис. 3) и характеризовалась при
дальнейшем
культивировании
высокой
интенсивностью
развития.
Дополнительное введение в состав питательной среды ауксинов в варианте
12 обеспечила не плохие параметры каллусогенеза, до 480,4±66,0 мм
3
, но
негативно повлияло на индукцию органогенеза и
поэтому не может быть
рекомендовано для использования. Увеличение содержания в питательной
среде цитокининов до 4 мг/л (вар. 13-14) также отрицательно повлияло как
на развитие каллусов, так и на формирование адвентивных побегов. Так
частота регенерации на варианте с 4 мг/л БАП снизилась до 13 %, среднее
количество побегов составляло 2,1 шт. на эксплантат,
значительно
уменьшилась высота регенерантов, до 3,5 мм. Поэтому наиболее
оптимальной в эксперименте концентрацией фитогормонов, в индукционной
среде для регенерации адвентивных побегов из семядолей тетраплоидных
форм, была среда MS, дополненная 3 мг/л БАП.
При последующем культивирования на индукционных питательных
средах из регенерировавших методом прямого органогенеза побегов были
получены
растения-регенеранты, которые были размножены в условиях
in
vitrо
в течение 2 пассажей на безгормональной среде MS. Использование
безгормональной среды при дальнейшем размножении позволило
предотвратить возникновение аномальных растений,
среди регенерантов и
тем самым обеспечило максимальную стабильность и однородность
клонированного материала.
Корнеобразования, или ризогенез - один из самых сложных этапов в
культуре
in vitro
арбуза, растения-регенеранты которогона этапе перевода из
условий
in vitro
в условия
in vivo
имеют низкую адаптивную способность.
Поэтому сформированы микропобеги для укоренения были высажены на
среду МS, дополненную 0,5 мг/л ауксина ИУК.
Проведенные исследования
показали, что такая питательная среда обеспечила высокий процент
укоренения растений-регенерантов - 85%.
Полученные в результате проведенных исследований укоренившиеся
растения-регенеранты арбуза были адаптированы (рис. 4) и переданы в
селекцию арбуза для дальнейшего использования.
Таким образом, проведенная оценка морфогенетического потенциала и
регенерационной способности ювенильных проростков арбуза показала, что
культивирование их семядолей на индукционной
питательной среде MS,
модифицированной 3мг/л БАП обеспечивает размножение ценных с
селекционной точки зрения тетраплоидных форм арбуза.