Masarykova univerzita v Brně Lékařská fakulta

4Závěr

V této bakalářské práci byl měřen trombin generační test u pacientů po trombotické příhodě léčených warfarinem. Získané hodnoty jednotlivých parametrů tohoto testu byly porovnány s hodnotou INR Quickova testu. U pacientů, u kterých ještě nebylo dosaženo terapeutického rozmezí INR (2,0-3,0) se hodnoty TGA blížily výsledkům pacientů bez antikoagulační terapie i přesto, že ve většině měření této skupiny se INR již terapeutickému rozmezí blížilo. Po správném nastavení antikoagulační léčby došlo ke statisticky významnému prodloužení času od iniciace koagulace k první detekovatelné generaci trombinu (parametr Lag time) a také času od iniciace koagulace do vytvoření největší koncentrace trombinu (parametr ttPeak) a dále k významnému snížení celkové generace trombinu (ETP) a maximálního množství vytvořeného trombinu (Peak). Parametr startTail TGA nebyl nijak statisticky významný.

Většina parametrů TGA dobře koreluje s hodnotou INR v rámci více vyšetření jednoho pacienta. Mezi jednotlivými pacienty mohou být ale poměrně výrazné rozdíly při stejném INR, které zřejmě odrážejí další současně přítomné odchylky hemostatického systému. Proto je dobré znát hodnoty TGA ještě před zahájením terapie warfarinem.

Výsledky měření prokázaly, že trombin generační test lze využít k monitoraci účinku antikoagulační léčby u warfarinizovaných pacientů. Toto vyšetření je vhodným doplňkovým vyšetřením k hodnotě INR, zejména při diskrepanci mezi laboratorním nálezem a klinickým stavem. Vzhledem ke své nízké dostupnosti, časové i finanční náročnosti ale nemůže nahradit Quickův test.

SEZNAM POUŽITÉ LITERATURY:
1. BAGLIN, T. The measurement and application of thrombin generation. British

Journal of Haematology 2005; 130: 653-661.

2. BERNTORP, E., SALVAGNO, GL. Standardization and clinical utility of thrombin –
generation assays. Semin Tromb Hemost. 2008; 34 (7): 670-82
3. BUTENAS, S., VAN´T VEER, C., MANN, KG. „Normal“ thrombin generation. Blood

1999 Oct 1; 94(7): 2169 – 78.

4. CARR Jr ME, MARTIN, EJ., KUHN, JG. Onset of force development as a marker of

thrombin generation in whole blood: the thrombin generation time (TGT). J Thromb

Haemost 2003; 1: 1977 – 83.

5. DAVÍDEK, J., JANÍČEK, G., POKORNÝ, J. Chemie potravin. Praha: SNTL, 1983; 629 s.
6. GEROTZIAFAS, GT., DEPASSE, F., BUSSON, J., et al. Towards a standardization of

thrombin generation assessment: the influence of tissue factor, plateles and phospholipids

concentration on the normal values of Thrombogram – Thrombinoscope assay. Thromb J

2005; 3: 16.

7. HEMKER, H. C., BEGUIN, S. Phenotyping the clotting system. Thrombosis and

Haemostasis 2000; 84: 747-751.

8. HEMKER H.C., AL DIERI, R., BÉGUIN, S., Thrombin generation assays: accruing

clinical relevance Curr. Opin. Hematol. 2004; 11: 170-175
9. HEMKER, HC., GIESEN, P., ALDIERI, R., et al. The calibrated automated thrombogram

(CAT): a universla routine test for hyper- and hypocoagulability. Pathophysiol Haemost

Thromb 2002; 32: 249 – 3.

10. HIRSH, J., POLLER, L. The international normalized ratio: a guide to uderstanding and

correcting its problems. Arch Intern Med 19974; 154: 282 – 8.
11. HLÚBIK, P., OPLTOVÁ, L. Vitaminy. Grada Publishing, 2004; s. 67-73.
12. HYNIE, S. Speciální farmakologie. Díl 4. Látky ovlivňující kardiovaskulární systém.

Praha: Karolinum, 2001; s. 242-264.

13. CHLUMSKÝ, J. a kol. Antikoagulační léčba. Grada Publishing, 2005; s. 35-43.
14. KOHOUT, P., KESSLER, P., RŮŽIČKOVÁ, L. Dieta při antikoagulační léčbě. Forsapi,

s. r. o. 2007; s. 17-20.

15. KOLDE, H. J. Haemostasis: Physiology, Pathology, Diagnostics: 2nd edition.

Pentapharm Ltd., 2004; p. 5 - 22.

16. MANN, K., BRUMMEL, K. & BUTENAS, S. What is all that thrombin for?.

Journal of Thrombosis and Haemostasis 2003; 1: 1504-1514

17. MANNUCCI, P. The measurement of multifactorial thrombophilia. Thrombosis

and Haemostasis 2002; 88: 1-2

18. MATÝŠKOVÁ, M., ZAVŘELOVÁ, J., HRACHOVINOVÁ, I. Hematologie pro

zdravotní laboranty 2. díl Krevní srážení. Institut pro další vzdělávání pracovníků ve

zdravotnictví, 1999; s. 203.

19. PECKA, M., MALÝ, J., DEJMKOVÁ, J. Přehled laboratorní hematologie III. –

Hemostáza, Imunologie. Galén 1998; s. 9-36.
20. PENKA, M. a kol. Hematologie I, neonkologická hematologie. GRADA publishing

2001; s. 142-149

21. Reference values for nutrient intake. 1^st engl. Ed. Bonn: DGE, 2002; 216 p.
22. VOET, D., VOETOVÁ, J. G.: Biochemie. Victoria publishing. Praha, 1995; s. 1233-

1235.
23. WIELDERDS, S., MUKHERJEE, M., MICHIELS, J., et al. The routine determination of

the endogenous thrombin potential, first results in different forms of hyper- and

hypocoagulability. Thromb Haemost 1997; 77: 629 – 36.

24. http://cs.wikipedia.org/w/index.php?title=Luminiscence&oldid=3640964

25. www.thermo.com/e Thermo/CMA/PDFs/Product/productPDF_26930.pdf
26. www.trombinoscope.com

SEZNAM OBRÁZKŮ:

Obr. č.1: Časový sled v hemostáze

Obr. č. 2: Koagulační kaskáda

Obr. č. 3. Vitamín K

Obr. č. 4: Stokesův pokus

Obr. č. 5: Kalibrační křivka

Obr. č. 6: Měřený signál vs. výsledná křivka

Obr. č. 7: Trombinogram

Obr. č. 8: Fluoroskan Ascent

Obr. č. 9: Průnik paprsku vzorkem

Obr. č. 10: Pipetovací schéma

Obr. č. 11: Průběh měření

Obr. č. 12: Porovnání 2 výsledných trombinogramů

Obr. č. 13: Rozložení analyzovaného souboru

Obr. č. 14: Medián Lag time ke skupinám INR

Obr. č. 15: Medián ETP ke skupinám INR

Obr. č. 16: Medián Peak ke skupinám INR

Obr. č. 17: Medián ttPeak ke skupinám INR

Obr. č. 18: Medián startTail ke skupinám INR

Obr. č. 19: Naznačení přímé úměry u časových parametrů

Obr. č. 20: Naznačení nepřímé úměry u kvantitativních parametrů


SEZNAM TABULEK:
Tabulka č. 1: Koagulační faktory

Tabulka č. 2: Příprava množství FluCa roztoku

Tabulka č. 3: Dívka 17 let

Tabulka č. 4: Chlapec 16 let

Tabulka č. 5: Chlapec 13 let

Tabulka č. 6: Dívka 15 let

Tabulka č. 8: Chlapec 19 let

Tabulka č. 9: Dívka 17 let

Tabulka č. 10: Rozdělení epizod dle hodnoty INR

Tabulka č. 11: Srovnání epizod s různou hodnotou INR

Tabulka č. 12: Korelace parametrů s hodnotou INR
SEZNAM SCHÉMAT:
Schéma č. 1: Trombofilie

Schéma č. 2: Schéma zářivých a nezářivých přechodů fotoluminiscenční molekuly

(Jablonského diagram)

Schéma č. 3: Princip trombin generačního testu

Schéma č. 4: Průběh měření TGA