2. Saytni qayta ishlash. Ishning asosiy maqsadi har xil turdagi protokormlar va balog'atga etmagan o'simliklarning morfologik xilma-xilligini o'rganish bo'lganligi sababli, biz ushbu turlar populyatsiyasining "er usti" qismining zichligi yuqori bo'lgan joylarni tanladik. Dastlab ish uchun tanlangan maydon mikrorelefning protofoodlar va er osti balog'atga etmagan o'simliklarning fazoviy tarqalishiga ta'sirini aniqlash uchun tasodifiy ravishda olingan namunalar tarmog'i bilan qoplangan va qidiruv paytida . - shuningdek, kenopopulyatsiya egallagan hududning chegaralarini aniqlash maqsadida. Keyin qidiruv faqat er osti namunalarini topish imkoniyati mavjud bo'lgan joylarda amalga oshirildi ; Ushbu namunalar keyingi hisob-kitoblarda ishlatilgan.
Namunani tahlil qilish, materialni mahkamlash.Laboratoriyaga o'tkazilgan namuna durbin ostida pinset bilan qismlarga ajratildi. Olingan material 50 ° etanol, sirka etanol (3: 1) yoki Navashin fiksatorida mahkamlangan va 75 ° etanolda saqlanadi. Fikslashda er osti balog'atga etmagan o'simliklarning protokormalari va kurtaklari ba'zi fiksatorlarda kuchli siqilishi va korteks hujayralarining devorlari deformatsiyalanishi mumkinligini hisobga olish kerak edi. Navashinning fiksatori boshqalardan afzalroq bo'lib chiqdi.
Namuna hajmi.Er osti o'simliklarining sonini hisoblash uchun bilvosita ko'rsatkichlar ishlatilgan: er osti namunalarining paydo bo'lish chastotasi - ya'ni er osti o'simliklari topilgan namunalar foizi - va guruhdagi er osti o'simliklarining o'rtacha soni. Namuna hajmi cheklanganligi sababli (saytlarni saqlash zarurati tufayli , pastga qarang) 68,3% ishonch darajasi uchun ishonch oralig'i olindi (Urbach, 1964). Guruhlardagi kichik o'rtacha er osti o'simliklari (1-7 namuna) va er osti o'simliklarining paydo bo'lish chastotasi taxminan 30% , etarli namuna 15-20 namunadir; talab qilinadigan namuna hajmi bir guruhdagi o'simliklarning kamroq paydo bo'lishi va o'rtacha sonining ko'payishi bilan sezilarli darajada oshadi, ammo ish joyini ko'p yillar davomida saqlab qolish uchun maydoni 15x15 sm bo'lgan 30-35 tadan ko'p bo'lmagan namunalar olinadi . Mavsumda o'rganilayotgan maydonning 100-200 m 2 dan taxminan 10 sm qalinlikda olish kerak .
Caípso bulbosa ~ 100 dan ortiq namunalar
Corallorhiza trifida - 99 ta namuna
Dactylorhiza maculala- 107 ta namunalar
Lister ma'lumotlari - 60 ga yaqin namunalar
Malaxis monophyllos - 25 ta namuna.
5. Amalga oshirilayotgan ishlarning aholi holatiga ta'sirini baholash . Noyob, muhofaza qilinadigan turlar bilan ishlashda, bunday ish usuli aholi uchun halokatli emasmi, degan savol tug'iladi; uzoq muddatli kuzatishlar uchun bunday ish kuzatilgan rasmni qanchalik buzganligini aniqlash bir xil darajada muhimdir. A.E. Batalov (1998), proto-ovqatlarning generativ namunalar atrofida fazoviy tarqalishini o'rgangan.Gymnadenia conopsea (L. ) R.Br. topilgan protokormlarni orqaga ekishni tavsiya qiladi. Ishimizning boshida biz transplantatsiya er osti o'simliklarining rivojlanishiga qanday ta'sir qiladi va transplantatsiya qilingan er osti o'simliklari ularning rivojlanishini kuzatish uchun ishlatilishi mumkinmi degan savolni o'zimizga berdik . Shu maqsadda 1996 yilda
18 ta ildiz so'rg'ichlari va yosh o'simliklarL. kordata chizilganidan so'ng , ular 5x5x3 sm o'lchamdagi idishlarga joylashtirildi, 0,8 mm to'r bilan tegirmon gazidan tikildi va ushbu turdagi o'sadigan joylarda tuproqqa ko'mildi . Shuningdek, 1994 yilda biz 15 ta namunani kuzatish uchun joylashtirdik.Corallorhiza trifida sfagnum ichiga, uy issiqxonasida shisha idishga o'tkaziladi. Kuzatishlar shuni ko'rsatadiki, ikkala turning topilgan er osti o'simliklarini vizual o'rganish va eskizdan keyin substratga qaytarishga harakat qilganda, ular odatda nobud bo'ladi yoki rivojlanishini sezilarli darajada sekinlashtiradi; Shunday qilib , bu usul o'zini oqlamaydi. Bundan tashqari, butun to'plangan to'plamni qat'iy belgilangan shaklda saqlash keyinchalik protofoodlar va yosh o'simliklarning morfologik o'zgaruvchanligini to'liqroq tahlil qilish , shuningdek , aholining "er osti" qismining miqdoriy va sifat tarkibi to'g'risida xulosa chiqarish imkonini beradi. va uning dinamikasi. Shuning uchun biz to'lovlarning qolgan qismini saqlab qoldik.
Xuddi shu uchastkalarda ko'p yillik ish tajribasi bizni ishontiradiki, o'rtacha namuna hajmi bilan (yuqoriga qarang), bunday tadqiqotlar kenopopulyatsiya holatiga kam ta'sir qiladi. Shunday qilib, Corallorhisa trífida egallagan hududda to'rt yil davomida namuna olish , bu o'simlikning er osti namunalarini o'z ichiga olgan namunalar ulushi deyarli o'zgarmadi; va 1997 yilda (ishning 3-yilida) uchastkada ommaviy gullash kuzatildi (taxminan 25 ga yaqin maydonda 90 ga yaqin generativ namunalar).m¿ ) . Orkide r-strategiyaning xususiyatlariga ega bo'lgan o'simliklarning vakillari ekanligini hisobga olish kerak ; protokormlar va er osti balog'atga etmagan o'simliklarning tabiiy o'limi ularda juda yuqori. Shunday qilib, masalan, protokormlar va o'smir o'simliklarning o'rtacha soniCorallorhiza trifida ommaviy gullashdan keyingi yil 13,5 * 3,0 ind./namuna bo'lgan va ba'zi namunalarda hatto ellikdan ortiq protokorma va kichik balog'atga etmagan namunalar topilgan bo'lsa, namunada hech qachon generativ kurtaklari bo'lgan uchta katta o'simlik mavjud emas va odatda bir yoki ikkita. Shu sababli , populyatsiyadagi generativ namunalarning zichligi va soni etarlicha yuqori bo'lgan taqdirda, 100-150 ta protofood va er osti balog'atga etmagan namunalarni tanlash hatto o'nta generativ namunani tanlashga qaraganda populyatsiyaga kamroq zarar keltiradi . Biroq, biz yuqorida aytilganlarning barchasiga qaramasdan , bunday tadqiqot usuli faqat tadqiqot hududida keng tarqalgan turlar uchun tavsiya etilishi mumkinligini ta'kidlaymiz. Shuni ham hisobga olish kerakki, uzoq muddatli kuzatishlar davomida oyoq osti qilish o'rganilayotgan kenopopulyatsiya holatiga namuna olishdan ko'ra ko'proq ta'sir qiladi ;