Mavzu: Genomni tahrirlash texnologiyasi Reja. Genom tahrirlash usullari

Mavzu: Genomni tahrirlash texnologiyasi

Reja.

1.Genom tahrirlash usullari

2.Genomni tahrirlashning istiqbollari

• "Tahrirlash" atamasi hozircha mavjud bo'lmagan va hech qachon mumkin bo'lmagan aniqlik darajasini bildiradi. Bu genetik kodni qayta yozish va DNKni kesish va joylashtirish qobiliyatini ko'rsatadi, lekin aslida natijalar hali ham biz tushunmaydigan va nazorat qila olmaydigan jarayonlar bilan belgilanadi.

Genomni tahrirlash - bu genomga maqsadli o'zgarishlarni bevosita tirik hujayrada kiritish.
in vitro manipulyatsiya qilishni o'z ichiga olgan an'anaviy genetik muhandislikka qaraganda ancha qulayroqdir. Chunki DNKni probirkadan olish va qandaydir tarzda tirik organizmga kiritish kerak va bu har doim ham ishlamaydi.

• Genomni tahrir qilish tizimlari molekulyar komponentlardan iborat bo'lib, ular genomning maqsadli joyida o'zgartirish ("tahrir" qilish) uchun dasturlashtirilgan. Genomni tahrir qilishning eng keng tarqalgan usuli bu CRISPR-Cas9 yoki CRISPR, lekin boshqa usullar shunga o'xshash printsiplarga amal qiladi.

Genni nishonga olish
birinchi genom tahrirlash usuli
1980-yillarning boshlarida ishlab chiqilgan. Usulning mohiyati hujayralarni ma'lum bir DNK fragmenti bilan transfeksiya qilishdan iborat bo'lib, u keyinchalik homolog rekombinatsiya yordamida genomning maqsadli hududiga kiritiladi.
DNKning ikki zanjirli uzilishlarini tiklash
Chet DNKsining genomga integratsiyalashuvi faqat genomik DNK uzilishlarini tiklash orqali mumkin. Bunday uzilishlar genomda tasodifiy omillar yoki fermentlar (masalan, topoizomerazlar yoki tuzatish fermentlari) ta'siri natijasida yuzaga keladi, ammo genomning ma'lum bir joyida bu hodisalarning chastotasi juda past.
Genni nishonga olish
Maxsus bo'lmagan o'rnatishga qarshi kurashish usuli*
Qo'shish konstruktsiyasi bitta emas, balki ikkita marker genini o'z ichiga oladi, ikkinchisi gomologik rekombinatsiya joylari orqasida joylashgan. Bunday holda, normal gomologik rekombinatsiya faqat bitta marker genining genomga integratsiyalashuviga olib keladi va keraksiz gomologik bo'lmagan rekombinatsiya (genomning tasodifiy hududiga qo'shilishi) ikkala marker genining integratsiyasiga olib keladi. Shunday qilib, siz faqat kerakli rekombinatsiya hodisasi sodir bo'lgan hujayralarni tanlash imkoniyatiga egasiz.