Amaliy mashg’ulot-13 Immunoelektroforez va shu usul yordamida antigen, antitanalarning o’zaro ta’sirini ko’rish. Immunosorbentlar va ularni olish usullari Mavzuning maqsadi

Amaliy mashg’ulot-13

Immunoelektroforez va shu usul yordamida antigen, antitanalarning o’zaro ta’sirini ko’rish. Immunosorbentlar va ularni olish usullari

Mavzuning maqsadi. Immunoelektroforez usul yordamida antigen va antitanalarning o’zaro ta’sirini ko’rish.Immunosorbentlar haqida tushunchalarga ega bo’lish

Kerakli jihozlar: shtativlar,tablitsa, darslik,atlas, doimiy preparatlar

Ishning tartibi.

1. Immunoelektroforez usul xaqida tushunchaga ega bo’lish.

2. Antigen va antitanalarning o’zaro ta’sirini o’rganish.
Immunoelektroforez

Umumiy tushunchalar.Immunoelektroforetik tahlil - bu immunodiffuziya bilan agar-gel elektroforezining kombinatsiyasi. Immunoelektroforez uchun turli xil variantlar mavjud. Immunoelektroforez (IEF) birinchi marta 1953 yilda Grabar va Uilyams tomonidan tasvirlangan. 1955 yilda Shaydegger oddiy oynali slaydlardan foydalanib ushbu usulni mikromodifikatsiyalashni taklif qildi.

IEF printsipi quyidagicha. Birinchidan, oqsillarni (antigenlarni) elektroforetik ajratish agar buferli gelda amalga oshiriladi; Oqsillarni elektr maydonida harakatlanish yo'nalishi bo'yicha stressdan so'ng, gelda truba ajratiladi, unga cho'ktiruvchi immun zardob kiritiladi. Antigen va antigen gelda bir-biriga qarab tarqaladilar va ularning o'zaro ta'sirida yog'ingarchilik chiziqlari paydo bo'ladi, ularning soni, holati va shakli antigenlarning dastlabki aralashmasining tarkibi to'g'risida tushuncha beradi.

Ushbu usulni klinik immunologiyada qo'llagan holda turli sinfdagi immunoglobulinlarning kontsentratsiyasi yarim miqdoriy jihatdan aniqlanadi, miyeloma oqsillari aniqlanadi. IEF immunitet tanqisligi holatini aniqlashda ham qo'llaniladi. Usul oqsil preparatlarini tozalashni ketma-ket kuzatishda zarurdir. Bundan tashqari, ko'pincha ushbu dorilarning haqiqiyligi va tozaligini nazorat qilish uchun foydalaniladi.

Antigenlarning murakkab aralashmasini ajratish uchun ikki o'lchovli (o'zaro faoliyat) elektroforez qo'llaniladi. Usul ikki bosqichni o'z ichiga oladi. Birinchi bosqichda oqsillar elektr maydoni ta'sirida antitelolarni o'z ichiga olgan agaroza gelida tarqaladi. Ikkinchi bosqichda plastinka 90 ° aylantiriladi va birinchisiga perpendikulyar bo'lgan yo'nalishda takroriy tezlashishga duchor bo'ladi. Shunday qilib, aralashmaning har bir antgenini miqdoriy tavsiflash mumkin. Ushbu usul, xususan, SLE yoki revmatoidli artritli bemorlarning zardobida sinovial suyuqlik bo'lgan qon zardobidagi C3 komplement tizimining oqsilini faol bo'lmagan C3c shakliga o'tkazish darajasini aniqlash uchun ishlatiladi.

Elektroimmun tahlil

Ushbu usul birinchi marta Laurel tomonidan 1966 yilda taklif qilingan. Antitanani o'z ichiga olgan agaroza geli tekis yuzaga tekis taqsimlanadi. Antigeni o'z ichiga olgan preparat turli eritmalarda geldagi ketma-ket quduqlarga kiritiladi. Doimiy elektr tokining ta'siri ostida quduqlardan antigenlar agaroz qatlamiga o'tadi, u yerda immunoglobulinlar bilan o'zaro ta'sirlashadi. Ushbu o'zaro ta'sir natijasida AG-AT cho'kindi hosil bo'ladi va raketaga o'xshash cho'zilgan, uchli shaklga ega bo'ladi. Shunday qilib, usulning yana bir nomi - raketa immunoelektroforezi. Yog'ingarchilik zonasining uzunligi(gel kontsentratsiyasi, gelda antiserum kontsentratsiyasi, gel qatlamining qalinligi, elektroforez rejimi) to'g'ridan-to'g'ri antigen konsentratsiyasiga bog'liq.

Immunosorbentlar.Organizmning ichki muhitini va uning sog'lig'ini saqlash muammosi tibbiy amaliyotda tananing sorbsion detoksifikatsiyasi usullari yordamida hal etiladi Biotexnologiyaning asosiy yo'nalishlaridan biri sorbsiya materiallarini ishlab chiqish va ularni keyinchalik tibbiyot va tibbiyot sanoatida gemo-, limfo-, plazma- va enterosorbsiya uchun ishlatib bo'lmaydigan materiallar sifatida qo'llashni o'z ichiga oladi. . Organizmni sorbsion detoksifikatsiyasining eng istiqbolli usuli gemosorbsiya bo'lib, faol sorbentlarning ma'lum kasalliklarda (onkologik, avtoimmun, yuqumli, allergik va boshqalar) turli xil tabiatdagi zararli moddalarni qondan olib tashlash qobiliyatiga asoslangan

Biotexnologik mahsulotlarning tozaligiga yuqori talablar mavjudligi sababli maqsadli sorbsiya materiallarini, xususan tanlab olingan immunosorbentlarni ishlab chiqish vazifasi tobora dolzarb bo'lib bormoqda. Hozirgi vaqtda markaziy asab tizimining demyelinatsiya qiluvchi kasalliklarini davolashga alohida e'tibor qaratilmoqda, ularning eng ko'p tarqalgani ko'p skleroz bo'lib, asab tolasi qobig'ini tashkil etuvchi miyelinni yo'q qiladigan miyelinni tizimli qon oqimidan otoantikorlarni olib tashlash orqali. Bu masala bo'yicha muhim nuqta miyelin oqsiliga yuqori darajada antikorlarni yetkazib berishga qodir mexanik barqaror sorbentlarni yaratishdir

Olingan ma’lumotlar hulosalaniladi.
Nazorat savollari

1. IEF printsipi qanday bo’ladi.

2. Elektroimmun tahlil.

3. Immunoelektroforez usul.