9
Yupqa qatlam xromatografiyasi
Yupqa qatlamli xromatografiya usuli 1938 yilda N.A. Izmailov va M.S. Shreyber
tomonidan yaratilganiga qaramay, u faqat so'nggi yillarda keng tarqaldi.
Yupqa qatlamli xromatografiya usuli murakkab ob'ektlardagi
noorganik va organik
moddalarning tarkibini aniqlash va ularning miqdorini aniqlash uchun ishlatiladi.
Tahlil bir necha bosqichda amalga oshiriladi:
1.Namuna va plastinkani jarayonga tayyorlash; xromatografik kamerani
tayyorlash;
2.Namuna komponentlarini bir-biridan ajratib olish;
3.Plastinka yuzasidan elyuentni yo’qotish; detektorlash;
4.Sifat va miqdor analizini amalga oshirish.
Yupqa qatlamli xromatografiya (YuQX) usuli yuqori sezuvchanlikka ega va
hozirgi vaqtda oddiyligi, tezligi va iqtisodiy afzalliklari tufayli farmatsevtika sohasida
keng qo'llaniladi.
Bu usul kapillyar kuch ta'sirida
sorbent bilan qoplangan shisha, folga, plyonka
yuzasida moddaning harakatlanishi natijasida moddalarni ajratishga asoslangan. U
nozik qatlamli xromatografiya yordamida moddalarning haqiqiyligini, tozaligini va
miqdorini aniqlash uchun ishlatiladi.
Bu usul ko'pincha harakatlanuvchi
faza sifatida suvdan, ba'zan esa boshqa
organik erituvchilar yoki ularning aralashmalaridan foydalanadi. Mobil faza statsionar
fazada ushlangan namunalar aralashmasini eritib yuboradi va uning turli masofalarda
turli tezliklarda tarqalishiga olib keladi.
Yupqa qatlamli xromatografiyada ishlatiladigan erituvchilar aralashmasini tanlash
juda muhimdir. Bunda birikmalar xromatogrammada
simmetrik joylashishi va
moddalarning Rf qiymati 0,5 ga yaqin bo'lishi kerak.
10
Yupqa qatlamli xromatografiyada statsionar qattiq faza sifatida - sorbent, maxsus
tayyorlangan silikagel, alyuminiy oksidi, KSM markali silikagel, silikagel va alyuminiy
oksidi aralashmasi, sellyuloza, kizelgur, poliamidlar ishlatiladi.
Sorbent tanlashda
moddaning xossalari va aniqlangan funksional guruhlar soni ham katta ahamiyatga ega.
Yupqa
qatlamli
xromatografiya
usuli
-
sorbent
mustahkamlangan
va
mustahkamlanmagan plastinkalarda amalga oshiriladi. Xromatografik plastinkaning
sorbentini mustahkamlash uchun 5±20% gacha bog'lovchi moddalar qo'shiladi.
Qo'shilgan bog'lovchi ajralish jarayoniga ta'sir qilmasligi kerak. Bog’lovchi modda
sifatida Gips, kraxmal, agar-agar kabilardan foydalaniladi.
Sorbenti mustahkamlangan yupqa qatlamli plastinka tayyorlash uchun 5 g KSM
silikagel, 0,2 g kalsiy sulfat va 12 ml suv aralashmasi shisha
tayoqcha bilan chinni
hovonchada bir xil quyuqlik hosil bo'lguncha aralashtiriladi Tayyorlangan aralashma
13x18 (14x16; 8x15) sm o'lchamdagi shisha plastinka ustiga yotqiziladi va bir xil
qalinlik (250-500 mkg) olinmaguncha mahsus moslama bilan tekislanadi.
Kiyen plastinka gorizantal holatda quritish shkafida 1200° C 1 soat mobaynida
quritiladi. Tayyorlangan plastinkalar suvsiz kalsiy xlorid bo'lgan eksikatorda saqlanadi.
Xromatografik kamera sifatida og’zi oyna yoki ishlov berilgan qopqoq bilan
berkitilgan tubi yassi shisha idishlardan foydalaniladi. Kamera hajmi 5-8 mm ga
harakatchan faza- eroituvchilar aralshmasi solinadi.
Xromotografik kamerani
to’yintirish maqsadida kamera devoriga erituvchi bilan ho’llangan filtr qog’oz
joylashtiriladi.
Namunani plastinkaga tomizishdan avval plastinka chetidan 2 sm masofada
qalam yoki igna orqali dog'larning boshlang'ich chizig'i belgilab olinadi. Plastinkaning
qarama-qarshi chekkasida namuna nomi yoziladi. Namuna mikropipetka yoki
mikroshpris yordamida plastinkaga tomiziladi.
11
Namunalarning sifati tahlilini olib borishda kapillyarlardan foydalaniladi.
Tekshirilayotgan namunalar start chizig`iga diametri 3-4 mm bo`lgan dog’lar
ko`rinishida tomiziladi. Namuna plastinkaning ostki qismidan 2
sm masofada, yon
tomondan 2 sm masofada tomiziladi. Agar xromatografik plastinkaga bir nеchta
namunalar tomizilsa, ularning orasidagi masofa 2 sm dan kam bo`lmasligi kerak.
Dostları ilə paylaş: