Jadval 3.1
SephadexG-25 mikrokolonkasida gel filtrlashdan so'ng tritiy bilan nishonlangan drotaverinni aniqlash aniqligi
Drotaverin
|
|
Namuna nomeri
|
Nazorat, imp/min
|
1 fraksiya 300 mkl, imp/min
|
2 fraksiya 300 mkl, imp/min
|
3
fraksiya 300 mkl, imp/min
|
Summa fraksiya 300 mkl, imp/min № 1-3,
|
umumiy aniqlash %
|
1
|
510
|
276
|
36
|
188
|
492
|
98,04%
|
2
|
20772
|
306
|
150
|
20356
|
20812
|
100,19%
|
3
|
390
|
246
|
18
|
134
|
398
|
102,05%
|
4
|
1032
|
324
|
42
|
655
|
1021
|
98,93%
|
5
|
966
|
360
|
40
|
558
|
958
|
99,17%
|
6
|
1176
|
768
|
54
|
363
|
1184
|
100,68%
|
O'rtacha % aniqlash qiymati
|
99,84%
|
SD
|
1,51
|
Р=0,05, %RSD
|
1,51
|
Jadval 3.2
SephadexG-25 mikrokolonkasida gel filtrlashdan so'ng tritiy bilan nishonlangan drotaverinni aniqlash aniqligi
Furosemid
|
|
Namuna nomeri
|
Nazorat, imp/min
|
1 fraksiya 300 mkl, imp/min
|
2 fraksiya 300 mkl, imp/min
|
3
fraksiya 300 mkl, imp/min
|
Summa fraksiya 300 mkl, imp/min № 1-3,
|
umumiy aniqlash %
|
1
|
75540
|
5124
|
648
|
69198
|
74430
|
98,53%
|
2
|
40386
|
4878
|
864
|
34290
|
40032
|
99,12%
|
3
|
38472
|
9042
|
966
|
28260
|
38268
|
99,47%
|
4
|
64344
|
12246
|
1068
|
50766
|
64080
|
99,59%
|
5
|
79152
|
29034
|
1110
|
48168
|
78312
|
98,94%
|
6
|
74370
|
25680
|
1008
|
47928
|
74616
|
100,33%
|
O'rtacha % aniqlash qiymati
|
99,33 %
|
SD
|
0,64
|
Р=0,05, %RSD
|
0,64
|
Olingan natijalar tritiy bilan nishonlangan preparatlar soni bo'yicha qayta hisoblab chiqilgan (ma'lumotlar 3.1-rasmda keltirilgan).
Olingan ma'lumotlar (3.1 va 3.2-jadvallar va 3.1-rasm) inson qon zardobining turli namunalarida sintilatsiyani hisoblash "so’ndirish" effektining mavjudligini ko'rsatadi. Bu ta'sir, ehtimol, inson zardobida turli xil organik birikmalar mavjudligidan kelib chiqadi. Shu bilan birga, olingan ma'lumotlar shuni ko'rsatadiki, oqsil fraktsiyasini zardobdan ajratishda barcha fraktsiyalarda so’ndirish ta'siri o'zgarishsiz qoladi. Ushbu natijalarga asoslanib, aniq ishonch bilan aytish mumkinki, ichki standartdan foydalanish (fraksiyasiz qo'shimcha nazorat namunasini qo'llash) qon zardobi oqsillari bilan bog'liq bo'lgan tritiy bilan nishonlangan dori miqdorini aniq aniqlash imkonini beradi.
Keyinchalik, bog'langan nishonlangan preparatni hisoblash uchun quyidagi sxema qo'llanildi: nazorat namunasidagi impulslar / min da sintilatsiya soni 100% sifatida qabul qilindi va dori tarkibi nazorat namunasi foizidan hisoblab chiqildi.
Rasm. 3.1. Gel filtrlashdan keyin SephadexG-25 mikrokolonkalaridan yuvilgan uchta fraksiyada 6 xil qon zardobi bilan inkubatsiya qilingan tritiy bilan nishonlangan preparatlar soni
§ 3.4. Qon zardobi oqsillari bilan tritiy bilan nishonlangan dorilarning raqobatbardosh bog'lanishini aniqlash
Qon zardobi oqsillarining nishonlanish qobiliyatini aniqlash uchun biz tritiy bilan nishonlangan dori va nishonlanmagan asosiy dori oqsillari bilan turli konsentratsiyalarda raqobatbardosh bog'lanishni o'rgandik. Bunday test, shuningdek, nishonlangan dori va nishonlanmagan asosiy dori identifikatorining qo'shimcha isbotidir. Bundan tashqari, bunday tajriba natijalari dori kontsentratsiyasining o'lchangan diapazonida usulning chiziqliligini tekshiradi.
Biz tritiy bilan nishonlangan dori vositalarining bog'lanishini aniqlash bo'yicha tajribalar o'tkazdik.
6 ta sog'lom ko'ngillilardan olingan qon zardobining 6 ta namunasi tahlil qilindi.
Qon zardobi №1 (erkak, 25 yosh, umumiy oqsil = 74 g/l, albumin = 54% (39,96 g/l)).
Qon zardobi №2 (erkak, 25 yosh, umumiy oqsil = 78 g/l, albumin = 57% (44,46 g/l)).
Qon zardobi №3 (erkak, 29 yosh, umumiy oqsil = 78 g/l, albumin = 62% (48,36 g/l)).
Qon zardobi №4 (erkak, 31 yosh, umumiy oqsil = 80 g/l, albumin = 60% (48,0 g/l)).
Qon zardobi №5 (erkak, 33 yosh, umumiy oqsil = 75 g/l, albumin = 62% (46,5 g/l))
Qon zardobi №6 (erkak, 28 yosh, umumiy oqsil = 82 g/l, albumin = 62% (50,84 g/l))
Har bir nishonlangan dori ( drotaverin va furosemid) uchun 6 xil qon zardobi bilan 4 ta namuna tayyorlandi:
Nazorat - 20 mkl qon zardobi + 10 mkl (1 mkg) nishonlangan dori + 270 mkl 10 mM Tris-HCl, 0,14 MNaCl, pH 7,4
Namuna. № 1 20 mkl qon zardobi + 10 mkl (1 mkg) nishonlangan preparat + 270 mkl 10 mM Tris-HCl, 0,14 MNaCl, pH 7,4
Namuna. № 2 20 mkl qon zardobi + 10 mkl (1 mkg) nishonlangan dori + 10 mkl (1 mkg) nishonlanmagan dori + 270 mkl 10 mM Tris-HCl, 0,14 MNaCl, pH 7,4
Namuna. № 3 20 mkl qon zardobi + 10 mkl (1 mkg) nishonlangan dori + 20 mkl (2 mkg) nishonlanmagan dori + 270 mkl 10 mM Tris-HCl, 0,14 MNaCl, pH 7,4
Namunalarga nishonlangan preparatlar qo'shilgandan so'ng, namunalar xona haroratida 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Shundan so'ng, namunalar SephadexG-25 mikrokolonkalariga qo'llanildi, 300 mkl ning birinchi fraktsiyalari yig'ildi va qon zardobi oqsillari bilan bog'liq faollik o'lchandi. Radioaktivlik RZhS-05 hisoblagichida toluol sintillyatorida (1 litr toluolda 4 g PPO va 0,05 g POPOP) o'lchandi.
Tritiy bilan nishonlangan dorilarning qon zardobi oqsillari bilan raqobatbardosh bog'lanishini aniqlash natijalari 3.3 - 3.4 jadvallarda keltirilgan.
Jadval 3.3
Tritiy bilan nishonlangan drotaverinning qon zardobi oqsillari bilan raqobatbardosh bog'lanishini aniqlash
Qon zardobi namunasi
|
Nazorat, imp/min
(100% radioaktiv-lik)
|
Namuna. № 1, imp/daq
(qo'llaniladigan radioaktivlik foizi)
|
Namuna. № 2, imp/daq
(qo'llaniladigan radioaktivlik foizi)
|
Namuna. № 3, imp/daq
(qo'llaniladigan radioaktivlik foizi)
|
1
|
510
|
276(54,12%)
|
136 (26,67%)
|
96(18,82%)
|
2
|
2077
|
306(14,73%)
|
151 (7,27%)
|
99 (4,77%)
|
3
|
390
|
246(63,08%)
|
145 (37,18%)
|
80 (20,51%)
|
4
|
1032
|
324 (31,39%)
|
158 (15,31%)
|
111 (10,75%)
|
5
|
966
|
360 (37,27%)
|
176 (18,22%)
|
123 (12,73%)
|
6
|
1176
|
768 (65,31%)
|
380 (32,31%)
|
251 (21,34%)
|
Jadval 3.4
Tritiy bilan nishonlangan furosemidning preparati qon zardobi oqsillari bilan raqobatbardosh bog'lanishini aniqlash
Qon zardobi namunasi
|
Nazorat, imp/min
(100% radioaktiv-lik)
|
Namuna. № 1, imp/daq
(qo'llaniladigan radioaktivlik foizi)
|
Namuna. № 2, imp/daq
(qo'llaniladigan radioaktivlik foizi)
|
Namuna. № 3, imp/daq
(qo'llaniladigan radioaktivlik foizi)
|
1
|
75540
|
5124(6,78%,)
|
2543 (3,37%)
|
1726 (2,28%)
|
2
|
40386
|
4878(12,08%)
|
2490 (6,16%)
|
1710(4,23%)
|
3
|
38472
|
9042 (23,50%)
|
4502 (11,96%)
|
2946 (7,66%)
|
4
|
64344
|
12246(19,03%)
|
6042 (9,39%)
|
4206(6,54%)
|
5
|
79152
|
29034(36,68%)
|
13176 (16,65%)
|
9870(12,45%)
|
6
|
74370
|
25680(34,53%)
|
12606 (16,95%)
|
8706(11,71%)
|
Olingan ma'lumotlarga asoslanib, ikkita dori uchun raqobatbardosh bog'lanish egri chiziqlari tuzilgan. 1-namuna ma'lumotlari 100% deb olindi, 2 va 3 namunalar ma'lumotlari mos ravishda qayta hisoblab chiqildi.Grafiklar 3.2-rasmda keltirilgan.
Rasm. 3.2. Tritiy bilan nishonlangan drotaverine va furosemidlarning raqobatbardosh bog'lanish grafigi.
Shunday qilib, olingan natijalar asl nishonlanmagan dorilarning turli konsentratsiyalari bilan suyultirilganda barcha ikkita tritiy bilan nishonlangan dorilarning raqobatbardosh bog'lanishining yaxshi chiziqliligini ko'rsatadi. Olingan ma'lumotlar, shuningdek, nishonlangan dori va nishonlanmagan asosiy dori identifikatorining qo'shimcha dalillarini beradi.
Dostları ilə paylaş: |