Mundarija kirish 1-bob. Adabiyot sharhi

3.3. Biologik namunalarda tritiy radioaktivligini sintillyatsion hisoblash
Tritiyning asosiy kamchiligi b-nurlanishning past energiyasi tufayli uni aniqlash va miqdoriy o'lchashning qiyinligi. Tritiy faolligini o'lchashning eng samarali usuli suyuqlik sintilatsiyasini hisoblashdir. Suyuq sintillyatsiyani hisoblash uchun bir jinsli va geterogen sintillash tizimlari qo'llaniladi. Sintillyatorda namunalar to'liq eriganida bir hil sintillyatsion tizimlar hosil bo'ladi. Bir hil aralashmalarda o'lchovlar eng aniq hisoblanadi. Bu, ayniqsa, past energiyali b-nurlanish ³H o'lchovlari uchun to'g'ri keladi. Namuna sintilatorga kiritilganda, suyuqlik sintillyatorining yorug'lik chiqishining pasayishiga olib keladigan turli jarayonlar sodir bo'ladi. Hodisaning mexanizmi adabiyotlarda batafsil bayon etilgan [136; 182, 128-betlar]. Suyuq sintilatorga kiritilishi kerak bo'lgan eritmalarda mavjud bo'lgan har xil turdagi moddalarning so’ndirish xususiyatlari to'g'risidagi ma'lumotlarning xilma-xilligini hisobga olgan holda, tajriba materialini tasniflashga urinishlar qilindi. Shunday qilib, [137; bet. 49-53] “ssintilatsiyani susaytirish koeffitsienti” parametri taklif qilingan bo'lib, u 1 mmol so’ndirish agenti kiritilishi bilan sintillyatorning yorug'lik chiqishining nisbiy pasayishiga mos keladi. Aromatik galogenidlar (xloroform, trikloroetan, xloro-n-ksilen va boshqalar) uchun sintillyatorning yorug'lik chiqishining susaytirish koeffitsienti molekuladagi xlor ulushi ortishi bilan ortadi, shuningdek, xlorning xlordagi holatiga bog'liq. Söndürme agenti molekulasi. Spirtli ichimliklar söndürücü sifatida ishlatilsa, u holda uglerod zanjirining uzunligi bilan söndürme ta'siri ortadi. Ultrabinafsha nurlar ta'sirida qo'zg'atilgan nurning so'nishi b-nurlanish ta'sirida qo'zg'atilgan nurning so'nishiga to'g'ri kelmaydi [135; 131-bet].
Ma'lumki, namunadagi ko'p miqdorda suv ham sintilatsiyani zaiflashtiradi. O'lchangan biologik namunada oqsillar, tuzlar va past molekulyar og'irlikdagi organik birikmalarning mavjudligi sintilatsiyani o'chirish effekti tufayli sintilatorning yorug'lik chiqishini sezilarli darajada kamaytirishi mumkin.
O'lchangan biologik namunalardagi tritiy miqdorini optimal o'lchash uchun biz adabiyot ma'lumotlarini tahlil qildik va eksperimental ravishda sintilatorning quyidagi tarkibini tanladik: 1 litr toluolda 4 g PPO va 0,05 g POPOP) [138; 183-bet].
Biologik namunalarda tritiy radioaktivligini o'lchash sintilatsiyani o'chirish effekti tufayli juda murakkab. Ma'lumki, suv va past molekulyar og'irlikdagi organik birikmalar kuchli sintilatsiyani o'chiruvchilardir. Tajribalarimizda suvli eritma ishlatilganligi va qon zardobi namunalarida ko'p miqdorda past molekulyar og'irlikdagi organik birikmalar bo'lishi mumkinligi sababli, sintilatsiya sonini so’ndirish ta'sirini aniqlash kerak edi. Qon zardobining individual namunalarini o'lchashda biz tritiy radionuklidini hisoblash samaradorligi juda katta farq qilishini aniqladik. Shubhasiz, bu turli zardob namunalarida ssintilatsiya nurini so'ndiruvchi bir yoki bir nechta omillarning mavjudligi bilan bog'liq. Bizning usulimizni ishlab chiqish uchun, bu namunani SephadexG-25 kolonnasida gel filtrlash orqali fraksiyalanganda, alohida qon zardobi namunasida sintilatsiyani o'chirish effekti qanchalik o'zgarishini tekshirish kerak edi.
6 ta sog'lom ko'ngillilardan olingan qon zardobining 6 ta namunasi tahlil qilindi. Har bir nishonlangan dori uchun ( drotaverin va furosemid) 6 xil qon zardobi bilan 2 ta namuna tayyorlandi:
1. Nazorat: 20 mkl qon zardobi + 10 mkl (1 mkg) nishonlangan drotaverin + 270 mkl 10 mM Tris-HCl, 0,14 MNaCl, pH 7,4
2. Gel filtrlash: 20 mkl qon zardobi + 10 mkl (1 mkg) nishonlangan drotaverin + 270 mkl 10 mM Tris-HCl, 0,14 MNaCl, pH 7,4
Namunalarga nishonlangan preparat qo'shilgandan so'ng, namunalar xona haroratida 30 daqiqa davomida inkubatsiya qilindi. Shundan so'ng, 6 ta qon zardobidan har birining bitta namunasi SephadexG-25 mikrokolonkalariga qo'llanildi, bufer eritmasi bilan tozalandi va 300 mkl ning elutsiya qilingan fraktsiyalari yig'ildi. Har bir gel filtrlashdan uchta fraktsiya yig'ildi. Birinchi fraktsiyada yuqori molekulyar og'irlikdagi oqsillar bog'langan dori bilan, ikkinchi fraktsiyada past molekulyar og'irlikdagi oqsillar va uchinchi fraktsiyada kichik molekulyar og'irlikdagi birikmalar, shu jumladan erkin nishonlangan dori mavjud edi. Nazorat namunasi va har bir fraksiyaning faolligi RZhS-05 hisoblagichida toluol sintilatorida o‘lchandi (1 litr toluolda 4 g PPO va 0,05 g POPOP). 3 ml toluol sintillash eritmasi va 300 mkl o'lchangan eritma sintilatsiyani hisoblash uchun flakonlarga qo'shildi. Eritmani muvozanatlash uchun kolbalar qorong'i joyda 20 daqiqa davomida saqlanadi. Shundan so'ng radioaktivlik RZHS-05 hisoblagichida o'lchandi. Olingan ma'lumotlar 3.1 - 3.2-jadvallarda keltirilgan.