27
boshlagandan so‘ng, yig‘gich almashtiriladi va eritmaning sathi tamponning yuqori
qismiga yetguncha suyuqlik quyiladi. So‘ngra
p
–nitroanilinni yuvib chiqarish
uchun kolonkaga dietil efir 5 ml li qismlarga bo‘lib–bo‘lib quyiladi (umumiy hajmi
40 ml). Ikkala elyuatni (azobenzol va o–nitroanilinning dietil efirdagi eritmalarini)
aralashtirmay, ikkita kichikroq Vyurs kolbasida yoki xona haroratida vakuumda
har birining hajmi 2–3 ml dan qolguncha haydaladi. Undan so‘ng tozalab olingan
moddalarning massasi va ularning suyuqlanish harorati aniqlanadi. Azobenzolning
suyuqlanish harorati 68
o
C, o–nitroanilin suyuqlanish harorati 71
o
C.
Qog‘oz
xromatografiyasi.
Taqsim-lanish
xromatografiyasining
bu turi murakkab moddalarni, ayniqsa
oqsillar, uglevodlar, yog‘lar, antibiotiklar,
gormonlar,
glyukozidlar, alkaloidlar va boshqa tabiiy moddalarni analiz
qilishda keng qo‘llaniladi. Bu xromatografiya uchun maxsus
filtr qog‘ozlar ishlatiladi. Qog‘oz xromatografiyasida, qog‘oz
adsorbent
vazifasini
bajaradi.
Oldindan
suv
bilan
to‘yintirilgan erituvchilar yoki erituvchilar aralashmasi ham
suriluvchi faza hisoblanadi.
Qog‘oz xromatografiyasini erituvchi-ning yo‘nalishiga
qarab yuqoriga va pastga suriluvchi,
ikki tomon-lama hamda
gorizontal–aylanma xromatografiya kabi har xil turlari
mavjud. Quyida biz amalda keng qo‘llaniladigan yuqoriga
so‘riluvchi qog‘oz xromatografiyasining ish texnikasi bilan tanishib chiqamiz.
Maxsus xromatografik qog‘oz eni xromatografiya uchun ishlatiladigan silindrning
diametridan biroz kichik, uzunligi 40–60 sm oralig‘ida
qirqib olinadi va
qog‘ozning pastki qismidan 2–4 sm yuqorida qalam bilan gorizontal chiziq
o‘tkaziladi. So‘ngra qog‘ozdagi bu chiziqqa (2–2,5 sm oraliqda) tekshirilayotgan
aralashmalarning eritmalaridan va shu aralashmada bo‘lishi taxmin qilingan aniq
toza moddalar eritmasidan kichkina shisha kapillyar
yordamida bir necha tomchi
tomiziladi. Qog‘oz quritilib, ichida erituvchilar sistemasi bo‘lgan maxsus
xromatografiya uchun ishlatiladigan silindrga tushirilib, qog‘oz silindr devorlariga
tegmaydigan qilib shisha qisqichga osib qo‘yiladi. Qog‘ozning moddalar
aralashmasi tomizilgan dog‘lardan pastroq qismi
erituvchilar sistemasiga tegib,
erituvchi qog‘ozga shimiladi va ma’lum balandlikka ko‘tarilgach, xromatogamma
kameradan olinadi va erituvchi yetib borgan yuqori chegara belgilanadi. Shundan
keyin, qog‘oz quritilib, purkagich (pulverizator) yordamida maxsus tanlab olingan
rang beruvchi moddalar bilan ishlanadi. Buning natijasida xromatografik qog‘ozda
har xil rangli dog‘lar hosil bo‘ladi. Bu dog‘lar xromatogamma deb ataladi (19–
rasm). Xromatogammada hosil bo‘lgan dog‘larni tezda qalam bilan doira shaklida
belgilab olish lozim, chunki bu dog‘lar vaqt o‘tishi bilan yo‘qolishi mumkin. Tek-
shirilayotgan toza modda yoki moddalar aralashmasini hosil bo‘lgan
xromatogammada identifikatsiya-lashda uchun shu moddalar uchun ishlatiladigan
erituvchilar sistemasidagi taqsimlanish koeffisienti
Dostları ilə paylaş: