O‘zbekiston respublikasi oliy va o‘rta maxsus ta’lim vazirligi andijon davlat universiteti

 

 

3. TUXUM ALBUMININI TUZ BILAN CHO‘KTIRISH ORQALI AJRATIB 

OLISH.  

KAZEINNI IZOELEKTRIK NUQTASINI ANIQLASH. 

 

Darsning maqsadi: Talabalarni oqsillarning cho‘ktirish jarayonlari bilan 

tanishtirish, oqsillarning ayrim fizik -kimyoviy xossalarini o‘rganish va tajribalar 

o‘tkazish malakasini rivojlantirish. 

 

Darsning rejasi: 1. Mashg‘ulotning nazariy qismini takrorlash. 

                             2. Tajribalarni bajarish 

                             3. Tajribalar natijalarini muhokama qilish. 

 

 

 Dars  uchun  kerakli  jixozlar:  100  ml  hajmli  o‘lchovli  silindr,  stakan, sentrifuga 

(vakuum-filtrlagich  qurilmasi),  SF-26,  ammoniy  sulfat,  bitta  tovuq  tuxumi,  dializ 

membranasi, 2 l hajmli dializ kamerasi. 

 

                                  Nazariy  qism. 

 

Oqsillar har  xil  birikmalar,  masalan  kislotalar, spirtlar,  metallarning    ionlari  bilan 

ta’sirlashadi,  shuningdek,  erituvchi  molekulasi  uchun  raqobatlashadi.  Aksariyat 

holatlarda bunday ta’sirlashuv natijasida oqsillar cho‘kmaga tushadi. 

---

Amfoter  elektrolit  sifatida  oqsillar  musbat  va  manfiy  guruhlarga  dissotsiyalanadi. 

rN  ning  ma’lum  qiymatlarida  oqsil  eritmasidagi  ionlangan  guruhlarning  nisbati 

tenglashadi  va  eruvchanligi  minimal  bo‘ladi.  Mana  shu  qiymat  oqsilning 

izoelektrik nuqtasi hisoblanadi. 

Ishning  umumiy  izohi.  Tuxum  oqsilidan  bosqichma-bosqich  tuz  bilan  cho‘ktirish 

orqali  (oldindan  50%  li  to‘yintirilishdan  tushgan  cho‘kmani  olib  tashlab),  hamda 

dializ yo‘li bilan albumin qismi ajratiladi. 

Ishning  borishi.  Tuxum  oqsili  sarig‘idan  ajratiladi  va  silindrga  solinadi,  so‘ngra 

uning hajmi suv bilan 50 ml ga yetkaziladi, hosil bo‘lgan oqsil eritmasiga 15,65 gr 

quruq  ammoniy  sulfat  asta  sekin  aralashtirib  qo‘shiladi.  Tuzning  hammasi 

erigandan  so‘ng  yarim  to‘yingan  tuz  eritmasidan  tushgan  globulinlar  cho‘kmasi 

sentrifugaga  qilinib  (minutiga  3000-5000  ayl.)  yoki  qalin  qog‘ozda  filtrlanib 

ajratiladi. Filtrat silindrga yig‘iladi, hajmi o‘lchanib tuz erishi qulay bo‘lishi uchun 

stakanga  o‘tkaziladi  va  eritmada  ammoniy  sulfatning  miqdori  70  %  gacha 

yetkaziladi. Tuzning miqdori quyidagi formula bo‘yicha hisoblanadi: 

 

X= [0,515



V



(c

2 

–c

1

)] : [1 – (0,272 



 c

2

)] 

Bu yerda X-berilgan to‘yinish darajasi uchun olingan tuzning miqdori, gr da; 

   V-oqsil eritmasining hajmi, ml da; 

   S

1

-tuzning dastlbki to‘yinish darajasi % da ; 

   S

2

-tuzning berilgan to‘yinish darajasi. 

Kerakli miqdordagi ammoniy sulfat erigandan so‘ng loyqalangan aralashma 

cho‘kma  hosil  bo‘lishi  bo‘lishi  uchun  30-40  minut  qoldiriladi.  Ovalbumin 

cho‘kmasi globulinlar kabi ajratib olinadi. Cho‘kma (agar filtrlash qo‘llanilsa filtr 

qog‘oz  bilan  birgalikda)  oz  hajmdagi  suv  bilan  aralashtirilib  dializ  qopchasiga 

solinadi  va  tuzni  chiqarib  yuborish  uchun  dializ  qilinadi.  Buning  uchun  dializ 

qopchasi iliq suv bilan ho‘llanib bir uchi bog‘lanadi va voronka yordamida oqsil 

eritmsi  bilan  to‘ldiriladi.  Dializ  4  marta  20  mM  pH  7,4  bo‘lgan  fosfat  bufer 

eritmasida, har galgi almashinish bir soatdan kam bo‘lmagan holda olib boriladi. 

Dializning dastlabki ikki soatini suv bilan olib borish mumkin. Dializatdagi 

ovalbuminning  konsentratsiyasi  260  va  280  nm  da  yutilishi  bo‘yicha 

nomogrammaga asosan aniqlanadi.