31
7. Azot gazi yordamida (azot gazini bosim ostida to‘yintiriladi
keyin keskin bosim pasaytiriladi. Natijada azot hujayrani oson
parchalab oqsilni eritmaga o‘tkazadi).
Yuqoridagi usullar bilan hosil qilingan gomogenatdan oqsillarni
ajratib olish uchun ekstraksiya usulidan foydalaniladi. Olingan
gomogenatni 8-10% li tuz eritmasida eritiladi. Oqsillarni
ekstratsiyalash uchun ko‘pincha ma’lum pHga ega bo‘lgan bufer
eritmalardan, organik erituvchilardan va ionsiz detergentlardan
foydalaniladi. Bu maqsadda organik moddalardan ko‘pdan beri ishlatib
kelinadigan eritmalar – glitserinning suvdagi eritmasi, saxaroza
eritmasi, limon kislota va borat bufer aralashmalar, tris-bufer
eritmalardan foydalaniladi.
Qon zardobi oqsilini ajratish uchun etil spirti, atseton, butil spirti
ta’sirida cho‘ktiriladi. Gomogenatdan toza holda oqsillarni olish uchun
har xil detergentlar ishlatiladi. Ular oqsil-yog‘ kompleksini va oqsil-
oqsil bog‘larini yaxshi parchalaydi. Oqsillarni (fermentlarni)
tozalashda mitoxondriya biomembranasi bilan yoki hujayra
organoidlari bilan mustahkam birikadigan modda triton X-100, natriy
dodetsilsulfat va natriy dezoksixolat ishlatiladi. Bu detergentlar oqsil-
oqsil komplekslarini parchalaydi va oqsillarning to‘rtlamchi
strukturasini buzadi.
Dostları ilə paylaş: