Tomat dengan menggunakan solven campuran

2.5.2. Kriteria solven 

Untuk  memperoleh  hasil  sebaik  –  baiknnya  dalam  ekstraksi,  kita  tidak 

dapat  menggunakan  sembarang  solven.  Namun  solven  tersebut  harus  dipilh 

dengan pertimbangan sebagai berikut : 

1.

 

Mempunyai  keemampuan  melarutkan  solute  tetapi  sedikit  atau  tidak 

sama sekali melarutkan diluent. 

2.

 

Mempunyai perbedaan titik didih yang cukup besar dengan solute. 

3.

 

Tidak beeraksi dengan solute maupun diluen. 

17 

 

4.

 

Mempunyai keemurnian tinggi. 

5.

 

Tidak beracun. 

6.

 

Tidak meninggalkan bau. 

7.

 

Mudah  direcovery. 

8.

 

Mempunyai perbedaan densitas yang tinggi dengan diluen. 

 

2.6. Spektrofotometri 

Spektrofotometri  merupakan  suatu  metode  analisa  kimia  yang  didasarkan 

pada  pengukuran  serapan  relatif  sinar  monokromatis  oleh  suatu  lajur  larutan 

dengan  menggunakan  prisma  atau  kisi  difraksi  sebagai  monokromator  dan 

detector fotosel. 

Dalam  spektrofotometri,  intensitas  sinar  datang  yang  dipantulkan  atau 

diteruskan oleh medium merupakan fungsi eksponensial dari konsentrasi dan tebal 

laju  larutan  yang  ddilalui  sinar.  Pernyataan  ini  dikenal  dengan  Hukum  Lambert 

Beer. 

A = a. b. c 

Dimana    

A = Absorban 

 

a = absorbisity molar 

 

b = Tebal laju larutan 

 

c = Konsentrasi 

Spektrofotometri  merupakan  alat  yang  digunakan  untuk  mengukur  %  T 

atau absorban (A) suatu cuplikan sebagai fungsi panjang gelombang. 

T= P / Po 

A = log 1 / T 

Pada  metode  spektrofotometri,  sample  menyerap  radiasi  elektromaagnetis  yang 

pada  panjang  gelombang  tertentu  dapat  terlihat.  Dengan  metode  ini  sample 

dengan  konsentrasi  yang  sudah  diketahui  di  ukur  absorbansinya  sehingga 

diperoleh  kurva  standar  padatan  versusu  absorbansi.  Kurva  ini  digunakan  untuk 

mencari konsentrasi sample yang belum diketahui. 

 

 

18 

 

BAB III 

METODOLOGI PENELITIAN 

 

3.1. Rancangan Penelitian 

3.1.1. Metode Penelitian 

Pada  penelitian  ini  dilakukan  pemisahan  antioksidan  dari  buah  tomat 

dengan  metoda  ekstraksi  cair  –  cair,  menggunakan  etanol,  heksan,  dan  aseton 

sebagai  solven.  Buah  tomat  dihaluskan  dengan  blender  sampai  diperoleh  cairan 

buah tomat (juice). 

Penelitian  yang  dlakukan  meliputi  dua  tahapan,  yaitu  tahapan  penentuan 

waktu  reaksi  optimal  yang  dilanjutkan  dengan  tahapan  penentuan  perbandingan 

jumlah  feed  dan  perbandingan  solven  optimal.  Selanjutnya  penentuan  kadar 

antioksidan  dilakukan  dengan  menggunakan  metode  analisa  spektrofotometri 

pada panjang gelombang 471 nm. 

 

3.1.2. Penetapan Variabel 



 

Variabel tetap : 

1.

 

Juice 

                        :  buah tomat  

2.

 

Solvent 

 

 

: Hexana : Aseton : Ethanol ( 2: 1: 1 ) 

3.

 

Kecepatan pengadukan 

:  skala 6 



 

Variabel berubah : 

1.

 

Perbandingan F/S 

: (1:1 , 1:2 , 1:3 , 1:4 , 1:5) 

2.

 

Suhu ekstraksi T  

: (30 , 40 , 50 ,60 , 70, 80) 

o

C. 

3.

 

Waktu ekstraksi t 

: 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120 

   Menit 

 

3.1.3. Alat Yang Digunakan 

1.

 

Beaker glass 

 

8.   Corong gelas 

2.

 

Labu takar 

 

9.   Piknometer 

3.

 

Erlenmeyer 

 

10. Pipet tetes 

19 

 

4.

 

Gelas ukur 

 

11. Corong pemisah 

5.

 

Timbangan 

            12. Aluminium foil 

6.

 

Stirrer 

 

 

13. Kertas saring 

7.

 

Spektrofotometer 

 

3.1.4. Gambar Rangkaian Alat      

 

Gambar 3. Rangkaian Alat Utama proses ekstraksi lycopene 

Keterangan : 

1.

 

Statif dan klem 

2.

 

Pendingin balik 

3.

 

Motor penggerak 

4.

 

Propeller 

5.

 

Labu leher tiga 

6.

 

Thermometer 

7.

 

Water bath 

 

3.1.5. Bahan 

1.

 

Jus buah tomat 

2.

 

Etanol   

1 

2 

3 

4 

5 

6 

7 

20 

 

3.

 

Aseton  

4.

 

Heksana 

 

3.2. Prosedur Kerja 

3.2.1. Penanganan Awal Buah Tomat 

1.

 

Membersihkan buah tomat dari kotorannya. 

2.

 

Menghaluskan buah tomat dengan blender (juice). 

 

3.2.2. Penentuan Density Solven (Etanol, Aseton, dan Heksana) 

1.

 

Menimbang piknometer kosong. 

2.

 

Mengisi piknometer dengan aquadest dan menimbangnya. 

3.

 

Mengukur volume aquadest. 

4.

 

Mengeringkan piknometer. 

5.

 

Mengisi  piknometer  dengan  masing  –  masing  solven  (etanol,  aseton,  dan 

heksana) dan menimbangnya. 

6.

 

Mengukur  volume  masing  –  masing  solven  (etanol,  aseton,  dan  heksana) 

yang ada dalam piknometer. 

7.

 

Menghitung density masing – masing solven (etanol, aseton, dan heksana). 

 

3.2.3

 

Menentukan Perbandingan F/S dan Suhu Ekstraksi Optimal.  

1.

 

Masukkan  larutan  umpan  dengan  solvent  yang  sudah  dibuat   

perbandingannya f/s (1:1 , 1:2 , 1:3 , 1:4 , 1:5). 

2.

 

Atur  suhu  pemanasan  sesuai  variabel  yang  diinginkan  (30  ,  40  ,  50  ,60  , 

70, 80)

 o

C, kemudian jalankan proses ekstraksi ( selama 1 jam ) untuk tiap 

variabel suhu. 

3.

 

Tampung hasil  ekstraksi pada erlenmeyer, kemudian tambahkan aquadest 

untuk proses pencucian. 

4.

 

Memisahkan  ekstrak  dan  rafinat  dengan  corong  pemisah.Tambahkan  10         

ml aquadest kemudian dikocok lagi selama 15 menit. 

21 

 

5.

 

Pisahkan  lapisan  polar  dan  lapisan  non  polar,  ambil  semua  lapisan  atas   

(non  polar)  masukkan  dalam  labu  ukur  100  ml  tambahkan  etanol  sampai 

tanda batas.  

6.

 

Tentukan  kadar  likopen  total  dari  lapisan  non  polar  (bagian  atas)  dengan 

spektrofotometer UV – Vis pada panjang gelombang maksimum 470 nm. 

7.

 

Menentukan    perbandingan  feed  dan  solven,  serta  suhu  operasi  yang 

terbaik dari hasil analisa. 

 

3.2.4.

 

Menentukan Waktu Ekstraksi 

1.

 

Masukkan  larutan  umpan  dengan  solvent  yang  sudah  dibuat 

perbandingannya f/s ( 1:4 ). 

2.

 

Atur  suhu  pemanasan  sesuai  suhu  optimal  operasi  (70

  o

C),  kemudian 

jalankan  proses  ekstraksi  (  pada  waktu  30,  40,  50,  60,  70,  80,  90,  100, 

110, 120 menit ). 

3.

 

Tampung hasil ekstraksi pada erlenmeyer, kemudian tambahkan aquadest 

untuk proses pencucian. 

4.

 

Memisahkan  ekstrak  dan  rafinat  dengan  corong  pemisah.Tambahkan  10         

ml aquadest kemudian dikocok lagi selama 15 menit. 

5.

 

Pisahkan  lapisan  polar  dan  lapisan  non  polar,  ambil  semua  lapisan  atas   

(non polar) masukkan dalam labu ukur 100 ml tambahkan etanol sampai 

tanda batas.  

6.

 

Tentukan kadar likopen total dari lapisan non polar (bagian atas) dengan 

spektrofotometer UV – Vis pada panjang gelombang maksimum 470 nm. 

7.

 

Tentukan  hasil  ekstraksi  dengan  di  plotkan  pada  kurva  standart  untuk 

mengetahui kadar lycopene yang terekstrak. 

8.

 

Menentukan waktu operasi optimal. 

 

3.2.4. Penetapan Kadar Antioksidan dengan Analisa Spektrofotometri 

1.

 

Kalibrasi alat 



 

Menghubungkan spektronik UV-VIS dengan sumber arus listrik 



 

Menghidupkan spektronik UV-VIS dengan tombol A. 

22 

 



 

Dengan  tombol  C,  atur  skala  sampai  pembacaan  absorbansi  tak 

terhingga ( transmitasi = 0 ) 



 

Memasukkan  aquadest  dalam  cuvet  dan  menempatkannya  dalam 

alat D 



 

Mengatur tomol B sampai skala yang ditunjukkan absorbansi 0 



 

Spektronik siap dipakai 

 

2.

 

Pengukuran absorbansi sample 



 

Ambil 5 ml sampel yang telah bebas endapan. Encerkan dengan N-

Hexana sampai 25 ml 



 

Masukkan hasil pengenceran ke dalam cuvet 



 

Analisa  sampel  menggunakan  spektronik  C-20  pada  panjang 

gelombang 470 nm. 



 

Dengan  bantuan  kurva  standar,  kalibrasi  data  absorbansi  dalam 

kadar larutan likopen standar. 

 

3.3. Respon Atau Pengamatan 

Pengamatan  pada  penelitian  ini  diarahkan  pada  kadar  lycopene  hasil 

ekstraksi dengan spektrofotometri dan pengamatan terhadap perbandingan jumlah 

larutan  umpan  dengan  solven  serta  perubahan  suhu  operasi  pada  ekstraksi  untuk 

mendapatkan kondisi operasi ekstraksi lycopene yang optimum. 

 

3.4. Analisa Data 

Hasil  penelitian  berupa  data  kenaikan  kadar  antioksidan  (likopen)  yang 

terekstrak  dari  juice  buah  tomat,  disajikan  dalam  bentuk  tabel.  Selanjutnya  data 

tersebut  diplotkan  dalam  bentuk  titik  –  titik  pada  grafik.  Titik  –  titik  tersebut 

dibentuk  suatu  kurva  untuk  mempermudah  penentuan  kecenderungan  variabel 

yang ada. 

 

 

23 

 

BAB IV 

HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN 

 

4.1. Hasil Percobaan 

Dengan menggunakan alat spektrofotometer pada panjang gelombang                  

471 nm diperoleh data absorbansi sebagai berikut : 

Juice Buah Tomat : 



 

Pada panjang gelombang  471 nm : 0,996 



 

Kadar total likopen : 12,8 mg/100 gram 

Tabel 3.1. Data absorbansi lycopene dengan F/S (1:1)  

No. 

Temperatur 

( 

o

C ) 

Absorbansi 

(471 nm) 

Kadar total lycopene yg 

terekstrak (mg/100gr) 

Persentase kadar 

Lycopene (%) 

1. 

30 

0.21 

1,91 

14,9 

2. 

40 

0.212 

1,95 

15,2 

3. 

50 

0.214 

1,98 

15,5 

4. 

60 

0.217 

2,03 

15,85 

5. 

70 

0.22 

2,07 

16,17 

6. 

80 

0.2145 

1,99 

15,54 

 

Tabel 3.2. Data absorbansi lycopene dengan F/S (1:2) 

No. 

Temperatur 

( 

o

C ) 

Absorbansi 

(471 nm) 

Kadar total  lycopene yg 

terekstrak (mg/100gr) 

Persentase kadar 

Lycopene (%) 

1. 

30 

0.240 

2,4 

18,75 

2. 

40 

0.243 

2,45 

19,14 

3. 

50 

0.241 

2,42 

18,9 

4. 

60 

0.26 

2,73 

21,13 

5. 

70 

0.261 

2,75 

21,48 

6. 

80 

0.258 

2,7 

21,09 

24 

 

Tabel 3.3. Data absorbansi lycopene dengan F/S (1:3) 

No. 

Temperatur 

( 

o

C ) 

Absorbansi 

(471 nm) 

Kadar total lycopene 

yg terekstrak (mg/100gr) 

Persentase kadar 

Lycopene (%) 

1. 

30 

0.3 

3,38 

26,4 

2. 

40 

0.301 

3,4 

26,56 

3. 

50 

0.3 

3,38 

26,4 

4. 

60 

0.309 

3,54 

27,65 

5. 

70 

0.317 

3,67 

28,67 

6. 

80 

0.312 

3,58 

27,96 

 

Tabel 3.4. Data absorbansi lycopene dengan F/S (1:4) 

No. 

Temperatur 

( 

o

C ) 

Absorbansi 

(471 nm) 

Kadar total lycopene 

yg terekstrak (mg/100gr) 

Persentase kadar 

Lycopene (%) 

1. 

30 

0.301 

3,41 

26.64 

2. 

40 

0.33 

3,87 

30,23 

3. 

50 

0.36 

4,36 

34.6 

4. 

60 

0.3659 

4,46 

34.85 

5. 

70 

0.369 

4,51 

35,23 

6. 

80 

0.366 

4,47 

34,92 

 

Tabel 3.5. Data absorbansi lycopene dengan F/S (1:5) 

No. 

Temperatur 

( 

o

C ) 

Absorbansi 

(471 nm) 

Kadar total lycopene 

yg terekstrak (mg/100gr) 

Persentase kadar 

Lycopene (%) 

1. 

30 

0.331 

3,88 

30,31 

2. 

40 

0.3315 

3,89 

30,39 

3. 

50 

0.33 

3,87 

30,23 

4. 

60 

0.315 

3,63 

28,36 

5. 

70 

0.302 

3,57 

27,89 

6. 

80 

0.296 

3,33 

26,01 

 

25 

 

Tabel 3.6. Data absorbansi lycopene dengan F/S (1:4) dan Suhu 70 

o

C  

No. 

Waktu 

( menit ) 

Absorbansi 

(471 nm) 

Kadar total lycopene 

yg terekstrak (mg/100gr) 

Persentase kadar 

Lycopene (%) 

1. 

30 

0,353 

4,25 

33,2 

2. 

40 

0,3617 

4,39 

34,29 

3. 

50 

0,3647 

4,44 

34,87 

4. 

60 

0,368 

4,5 

35,46 

5. 

70 

0,370 

4,57 

35,7 

6. 

80 

0,376 

4,63 

36,17 

7. 

90 

0,4076 

5,14 

40,15 

8. 

100 

0,411 

5,2 

40,6 

9. 

110 

0,416 

5,29 

41,32 

10. 

120 

0,423 

5,3 

41,4 

 

4.2. Pembahasan 

4.2.1 Pengaruh perbandingan F/S terhadap kadar total lycopene 

 

Gambar 4. Grafik Perbandingan F/S  Vs  Kadar total Lycopene 

 

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

4,5

5

1/0

1/2

1/4

1/6

Ka

d

ar 

to

ta

l l

yc

o

p

ee

 m

g/1

00

gra

m

perbandingan F/S

kurva randemen

26 

 

Pada perbandingan F/S (1:1), diperoleh rendemen (1,91; 1,95; 1,98; 2,03; 

2,07, 1,99) mg/100gr, kondisi ini belum optimal, karena jumlah bahan (jus tomat) 

lebih  banyak  daripada  jumlah  pelarutnya  sehingga  jumlah  pelarut  belum  cukup 

untuk  berpenetrasi  ke  dalam  bahan  akibatnya  tidak  semua  lycopene  dapat 

dilarutkan  oleh  pelarut.  Demikian  juga  pada  variabel  perbandingan  F/S  1:2  dan 

1:3  yang menghasilkan rendemen (2,4; 2,45; 2,42; 2,73; 2,75, 2,6) mg/100gr dan 

(3,38; 3,4; 3,38; 3,54; 3,67, 3,58) mg/100gr jumlah pelarut belum cukup optimal 

untuk berpenetrasi ke dalam bahan. 

Pada  perbandingan  F/S  (1:4)  diperoleh  rendemen  (3.41;  3.87;  4.36;  4.46; 

4.51,  4,47)  mg/100gr  yang  merupakan  puncak  dari  kurva  perbandingan  F/S  vs 

kadar  likopen  yang  menunjukan  kondisi  untuk  variabel  perbandingan  F/S 

optimum. Hal  ini disebabkan karena perbandingan  jumlah  bahan (jus tomat) dan 

jumlah pelarutnya sudah  cukup, sehingga pelarut dapat berpenetrasi dengan  baik 

ke dalam bahan akibatnya lycopene dapat dilarutkan oleh pelarut. 

Sedangkan pada saat penggunaan perbandingan  F/S (1:5) randemen  yang 

dihasilkan (3,38; 3,89; 3,87; 3,63; 3,43, 3,33) mg/100gr, hasilnya menurun karena 

volume  pelarut  yang  digunakan  semakin  besar  akibatnya  semakin  banyak 

impuritas  yang  ikut  terlarut  dan  waktu  yang  digunakan  untuk  pencucian  pelarut 

semakin  lama.  Hal  ini  akan  menyebabkan  terjadinya  perubahan  sifat  komponen 

dari  lycopene.  Inilah  yang  menyebabkan  lebih  sedikitnya  kadar  lycopene  yang 

diperoleh setelah perbandingan F/S yang optimal. Penggunaan pelarut yang terlalu 

banyak juga tidak efektif dan efisien karena jumlah pelarut yang diperlukan juga 

tergantung  pada  jumlah  solute  yang  terdapat  pada  larutan.  Pada  penelitian  ini 

menunjukkan bahwa kondisi perbandingan F/S yang baik pada perbandingan F/S 

(1:4). 

 

 

 

 

 

 

27 

 

4.2.2   Pengaruh Kenaikan Suhu Terhadap Kadar Total Lycopene 

 

Gambar 5. Grafik Suhu  Vs  Kadar total Lycopene 

Ekstraksi dilakukan pada suhu 30, 40, 50, 60, 70, 80 

o

C . Pada suhu 30 

o

C 

menghasilkan rendemen yaitu:(1,91; 2,4; 3,38; 3,41; 3,88) mg/100gr, pada kondisi 

suhu  ini  belum  menunjukan  kondisi  yang  optimum  hal  ini  di  sebabkan  karena 

likopen masih terikat dengan struktur sel tomat.  

Perubahan  suhu  dalam  proses  pengolahan  dapat  melepaskan  likopen  dari 

struktur sel tomat. Likopen  meningkat setelah dilakukan pemasakan,  jadi produk 

olahan  tomat  seperti  saus,  jus  dan  saus  pizza  memiliki  lebih  banyak  likopen 

dibandingkan tomat segar. Demikian juga pada variabel suhu 40 

o

C, 50

 o

C, 60 

o

C 

dengan  hasil  rendemen  yaitu:(1,95;  2,45; 3,4; 3,87; 3,89)  mg/100gr;  (1,98; 2,42; 

3,38;  4,51;  3,87)  mg/100gr;  (2,03;  2,73;  3,54;  4,46;  3,63)  mg/100gr,  likopen 

masih  cukup  banyak  terikat  dengan  struktur  sel  tomat  karena  perubahan  suhu 

dalam  proses  pengolahan  belum  cukup  optimal  untuk  dapat  melepaskan  likopen 

dari struktur sel tersebut. 

Pada suhu 70 

o

C diperoleh kondisi optimal dari grafik maupun perhitungan 

pada  suhu  ekstraksi  70 

o

C  yaitu  masing-masing  dengan  randemen  :  (2.07;  2.74; 

3.67;  4.51;  3,43)  mg/100gr.  Hal  ini  disebabkan  karena  likopen  telah  dapat 

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

3,5

4

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

ka

d

ar 

to

ta

l l

yc

o

p

en

e 

(m

g/1

00

gr

am

)

suhu (

o

C)

kurva rendemen

28 

 

dipisahkan dari struktur sel tomat, perubahan suhu dalam proses pengolahan telah  

optimal untuk dapat melepaskan likopen dari struktur sel tersebut. 

Namun pada suhu 80

 o

C menghasilkan rendemen yang cenderung menurun 

yaitu:  (1,99  ;  2,6;  3,58;  4,47;  3,33)  mg/100gr,  karena  kenaikan  suhu  akan 

menyebabkan  dekomposisi  dari  komponen  lycopene  yang  menyebabkan 

komponen  baru  lebih  rendah  dari  titik  didih  komponen  sebelumnya  sehingga 

menjadi  lebih  mudah  menguap.  Pada  penelitian  ini  menunjukkan  bahwa  kondisi 

suhu ekstraksi yang baik pada suhu 70 

o

C. 

4.2.2