Page 404
nishonga olishda TALEN texnologiyasiga qaraganda yuqori samaradorlikka ega
ekanligini ko'rsatdi. Di shuningdek, bir nechta GmU6 promotrlarini soya va Arabidopsis
thaliana o’simliklari tukli ildizlarida sgRNK ekspressiyasini boshqarish uchun mos
bo'lganlarni topish maqsadida qo’shimcha tadqiqot o’tkazdi. Tadqiqot natijasida GmU6-
8 va GmU6-10 promotrlarini gen tahrirlash samaradorligini oshirish uchun yuqori
faollikka ega ekanligini aniqlandi [21]. Bundan tashqari, soya zaxira oqsili genlari Li
tomonidan va nodulyatsiyaning o'ziga xosligini nazorat qiluvchi nomzod genlari Tang
tomonidan CRISPR / Cas9 tizimi hamda hairy-root transformatsiya tizimi bilan
birgalikda o’tkazilgan tadqiqotlarda tahrirlangan va yaxshi o'rganilgan.
Cai va Do tomonidan olib borilgan tadqiqotlar soyadagi bir xil xromosomada
ikkita qo'shni lokusni ajratish uchun dual-sgRNK yordamida katta genom o'chirish hosil
bo'lishi mumkinligini ko'rsatdi [24,25]. Bu orqali Dual-sgRNA dizayni nafaqat ikki
tomonlama tahrir qilish qobiliyati tufayli gen mutatsiyalari chastotasini oshirishi, balki
nishonlangan genni to'liq ochirilishini ta'minlash uchun katta fragmentlar deletsiyasini
ham hosil qilishi mumkin ekanligi ochib berildi. So’ngi yillardagi tadqiqotlar natijasi
o’laroq Mengyan tomidan optimallashtirilgan ko'p bosqichli jarayonlar bilan
birlashtirilgan CRISPR-Cas9 platformasi ishlab chiqildi. Ushbu platformadan
foydalangan holda, 100 dan ortiq nomzod genlarga mo'ljallangan multipleks
mutagenezli soya populyatsiyasi yaratildi [26].
Yuqoridagi tadqiqotlarning ahamiyati shundaki, har bir tadqiqot soya o’simligini
tadqiq qilishda CRISPR/Cas texnologiyasiga asoslangan samarali tizimni yaratish
uchun muhim manba bo’lib xizamat qiladi. Soya genomini maqsadli tahrirlashdagi
bunday muvaffaqiyatli dasturlar uni sanoat miqyosida yetishtirishda CRISPR / Cas9
tizimining o’rni muhimligini ko'rsatadi.
O’zbekiston Respublikasi Fanlar Akademiyasi Genomika va bioinformatika
markazida olib borayotgan tadqiqotlarda ham aynan CRISPR/Cas tizimi orqali soya
o’simligini qurg’oqchilikka chidamliligini oshirishga e’tibor qartilgan. Adabiyotlar
asosida soya o’simligida qurg’oqchilikka aloqador genlar har tomonlama chuqur
o’rganildi. Qurg’oqchilikka chidamli bo’lgan soya liniyalarini olish borasidagi
taqdiqotlar uchun nisbatan kam o’rganilgan, qurg’oqchilikka aloqador bo’gan E-1 geni
tanlab olindi va ushbu gen asosida CRISPR/Cas9li genetic vector konstruksiya hosil
qilindi. Ushbu genetik konstruksiya bir nechta bosqichli reaksiyalar asosida E.Coli
bakteriyasining maxsus shtamlariga transformasiya qilindi. Bakteriya genomida ushbu
konstruksiyaning ekspressiyasini tekshirish maqsadida maxsus praymerlar yordamida
sekvens qilindi. Shuningdek, o’simlikka transformasiya qilish uchun Agrobakterium tumifaciens bakteriya shtammlaridan foydalanildi.