Barg tarkibidagi oqsillarni rangli reaksiyalar yordamida M.X.Chaylaxayn usulida aniqlash.
Asbob va reaqtivlar: 5% li CuSO4, spirtning 96% li ertmasi 10% li natriy ishkori, 1: 1 nisbatda suv bilan suyultirilgan ammiak ertmasi, g’o’za, lavlagi, karom va boshqa o’simliklarning bargi.
Bu mashgulot quydagi tartibda olib boriladi.
G’o’za yoki biror boshqa o’smlikning bargi qaynab turgan suvga botiriladi va 1-2 minutdan keyin suvdan olib, 96% li spirt quyilgan kolbaga solinadi. Kolba og’ziga sovitkich ornatiladi. So’ngra kolbani suv xammomiga qo’yib, 30-60 minut isitiladi.Bunda barg tarkibidagi yashil va sariq pigmentlar, erkin aminokislotalar va suvda eriydigan oqsil albuminlar spirtda to’planadi.
Rangsizlangan barglarni kolbadan olib distillangan suvga botirib olinadi va har qaysisi aloxida yassi idishga yoyiladi. Yassi idishlarda quyidagi reaksiyalar o’tkaziladi:
1. Biuret reaksiyasi. Petriy Idishidagi yoki boshqa bir likopchadagi barg ustiga mis kuporosi CuSO4 ning 5% li ertmasini quyib bir soat saqlanadi. So’ngra bargni eritmadan olib distillangan suvda chayiladi va 10% li natriy ishqori NaOH solingan idishga botirib qoyib unda ham bir soat saqlanadi. Bunda barg toqimasini binafsha rangga kirishining tarkibidagi oqsil va peptid bog’lari bolgan pepton poliptidlar borligini ko’rsatadi.
2. Ksantoprotein peaksiyasi. Bunda konsentrlangan nitrat kislota 1:1 nisbatda suv bilan aralashtiriladi. Rangsizlantirilgan barg shu eritmaga 10-15 minut solib qoyilgandan so’ng sariq rangga kiradi. Agar uni ikkinchi idishga solib ustiga 1 : 2 nisbatda suv bilan suyultirilgan ammiak quyilsa barg zarg’aldoq rangga kiradi. Lekin protaminlar gruppasidagi oqsillarni ksantoprotein reaksiya yordamida aniqlab bolmaydi.
3. Millon reaksiyasi. Rangsizlantirilgan barg Millon reaktivida 30, 60 minut saqlanganida qizg’ish rangga kiradi. Bu hodisa barg tarkibida oqsillar borligini ko’rsatadi.
Eslatma: Rangning To’q va Och bolishiga karab oqsil miqdorini 5 balli sistema bilan baholash mumkun. Masalan: oqsil juda oz bo’lsa 1, oz bo’lsa 2, urtacha 3, kop bolsa 4, juda kop bolsa 5 ball bilan baholanadi.
№ 20 Laboratoriya ishi
Dostları ilə paylaş: |
