“Fitopreparatlar texnologiyasi” fanidan o„quv –uslubiy majmua 83
4– Laboratoriya ishi
Ammiak bilan reaktsiya. Chinni idishchada olingan flyuvanoidlarning spirtdagi eritmasiga
ammiak eritmasidan qo‘shib, suv xammomida bir oz qizdiriladi. Reaktsiya natijasida flavonlar,
flavonollar, flavononlar, flavonononlar eritmasi zarg‘aldoq yoki qizil rangga o‘tadigan sariq rang xosil
qiladi. Xalqonlar va auronlar eritmasiga ammiak eritmasi yoki to‘q qizil rang xosil bo‘ladi.
Antatsianlar esa ammiak eritmasi ta‘sirida zangori yoki binafsha rangga bo‘yaladi. Bu reaktsiyani
ishqor eritmalari bilan qilinsa xam yuqoridagiga o‘xshash natija olish mumkin.
5 – Laboratoriya ishi
Qo‘rg‘oshin atsetati bilan reaktsiya. Flavonoidlarning chinni shishachada olingan spirtli
eritmasiga qo‘rg‘oshin (II) – atsetat spirtli eritmasidan qo‘shib aralashtiriladi. V xalqada bo‘sh xolda
ortiogidroksil guruhi bo‘lgan flavonlar, xalqonlar va auronlar qo‘rg‘oshin (II) – atsetat eritmasi bilan
tiniq sariq yoki qizil rangli cho‘kma xosil qiladi. Agar qo‘rg‘oshin (II) – atsetat o‘rnida qo‘rg‘oshin (II)
– gidroatsetat eritmasi qo‘llanilsa, flavonoidlarning qariyb xamma rangli cho‘kma beradi. Bu
reaktsiyada antotsionlar qizil yoki ko‘k rangli cho‘kma xosil qilishi mumkin.
6 – Laboratoriya ishi
Mineral kislotalar bilan reaktsiya. Chinni idishchadagi flavonlarning spirtli eritmasiga xlorid
kislota ta‘sir ettirilsa, flavonoidlarning xamma guruxlari (katexinlardan tashqari) rangli reaktsiya
beradi: flavonlar va flavonollar tiniq sariq, flavononlar zarg‘aldoq pushti qizil, antotsianlar zarg‘aldoq
yoki qizil rangga bo‘yaladi. Xalqonlar va auronlar kislotaning kontsentrlangan eritmasi bilan oksoniy
tuzlar xosil bo‘lishi xisobiga qizil rang xosil qiladi. Xlorid kislota o‘rniga kontsentrlangan sulfat
kislota olingan taqdirda katekinlar, antotsionlar va flavononlar qizil, flavonlar va flavonollar tiniq
sariqdan zarg‘aldoq ranggacha bo‘yaladi.
7 – Laboratoriya ishi
Alyuminiy xlorid bilan reaktsiya. Chinni idishchadagi flavonlarning spirtdagi 5 ml eritmasiga
(yoki o‘simlikdan tayyorlangan flavonoidlarning 5 ml spirtdali ajratmasiga) alyuminiy xloridning
spirtdagi 5 ml eritmasidan bir necha tomchi tomizilsa, ko‘pchilik flavonoidlar sariq rang xosil qiladi.
8 – Laboratoriya ishi
Temir (II) – xlorid bilan reaktsiya. Chinni idishchadagi flavonoidlarning spirtdagi 5 ml
eritmasida (yoki o‘simlikdan tayyorlangan flavonoidlarning 5 ml spirtli ajratmasiga) temir (II) –
xloridning spirtdagi 5% li eritmasidan bir necha tomchi qo‘shilsa, to‘q zangori, to‘q binafsha, to‘q
yashil yoki yashil rang xosil bo‘ladi. Temir (III) – xlorid eritmasi bilan flavonoidlarning xamma
guruxlari rangli reaktsiya beradi.
9 – Laboratoriya ishi
Vanilin bilan reaktsiya. Chinni idishchadagi vanilinning kontsentrlangan xlorid kislotadagi 1%
li eritmasiga katexinlardan qo‘shilsa, qizil rang xosil bo‘ladi.
10 – Laboratoriya ishi
Flavonoidlarning xromatografik analizi O‘simliklardan tayyorlangan ajratmada qancha
flavonoid birikmalar borligi va ularning chinligini taxminiy aniqlashda (identifikatsiya qilishda)
taqsimlanish (bo‘linish) xromatografik usulidan (qog‘ozda – QX yoki BX va yupqa qavatda – YuQX
yoki TSX) keng foydalaniladi. Xromatografik taxlil uchun o‘simlikdan spirtli ajratma tayyorlanadi.
Buning uchun yapon saforasining maydalangan gulidan 1g ni 25 ml xajmli kolbaga solib, ustiga 10 ml
spirt quyiladi. Kolbaga tik sovutgich o‘rnatib, suv xammomida 10 min qaynatiladi. Ajratma
sovugandan so‘ng qog‘oz filtri orqali filtrlanadi.
0,1 ml filtratni va «guvox» flavonoidlarnning spirtli eritmasidan «Silufol» plastinkasining start
chizig‘iga kapilyar naycha yoki maxsus tomizgich yordamida bir-biridan 2 sm masofada tomiziladi va
xavoda quritiladi. So‘ngra plastinkani ichiga n-butanol-sirka kislotasi – suv (4:1:5 nisbatida) yoki
sirka kislotasini 15% li eritmasi quyilgan xromatografik kolonkaga joylashtirib, 30-40 minut
xromatografiya qilinadi. Keyin plastinka olinib, xavoda quritiladi va UF-nurida ko‘riladi, dog‘lar
aniqlanadi (flavonoidlar jigarrang, sariq, zarg‘aldoq rangli bo‘lib tovlanadi). So‘ngra plastinkaga
alyuminiy xloridning spirtli eritmasi (yoki sirkoniy xlor oksid, temir (III) – xlorid eritmalari) purkab,
quritib yana UF – nurida ko‘riladi. Dog‘larni Rf lari hisoblanadi. Bu Rf lar «guvox» flavonoidlar Rf