15
Ishning bajarilishi:
Bug’doydan suvda eruvchi oqsillarni ajratish.
2 g bug’doy unini chinni hovonchada maydalab 10 ml distillangan suv qo’shiladi.
Hosil
bo’lgan aralashma 2-3 minut davomida tindiriladi va filtrdan o’tkaziladi. Filtr qog’ozda qolgan
un qoldig’ini 2 marta oz-ozdan distillangan suv qo’shib, yuviladi, buni bug’doydan globulinlarni
ajratish uchun qoldiriladi. Hosil bo’lgan filtrat albumin oqsillarini eruvchanligini tekshirish
uchun ishlatiladi.
Albuminli oqsil fraktsiyasi filtratiga maydalangan ammoniy sulfat kukunidan qo’shib,
to’liq to’yinguncha 40
С dan yuqori bo’lmagan haroratda qizdiramiz. Tushgan cho’kmani
filtrdan o’tkazamiz. Filtr qog’ozda qolgan cho’kmani 1 ml distillangan suvda eritamiz. Hosil
bo’lgan eritmada oqsil bor-yo’qligini 1 ml biuret reaktivi qo’shib tekshiramiz.
Bug’doy unidan tuzda eruvchi oqsillarni ajratish
Suv bilan yuvilgan un qoldig’ini (albuminli oqsil fraktsiyalarini ajratilgandan so’ng)
chinni
hovonchada 10 ml 10 % li NaCl eritmasiga qo’shib 2-3 minut tindiriladi va filtrlanadi.
Filtr qog’ozda qolgan un qoldig’ini 2 marotaba yangi tayyorlangan NaСl eritmasi bilan
yuvib, keyingi bajariladigan ish uchun olib qo’yiladi.
Bug’doy unidan ishqorda eruvchi oqsillarni ajratish
Un qoldig’ini (albumin va globulin oqsil fraktsiyalarni ajratilgandan so’ng) chinni
hovonchada maydalab 10 ml 0,2 % NaOH eritmasi qo’shib 2-3 minut tindirib qo’yamiz va
filtrlaymiz. Olingan filtratga 1 tomchidan 0,1 n sirka kislotasi eritmasi qo’shiladi. Hosil bo’lgan
cho’kmada glyutelin hosil bo’ladi.
Bug’doy unidan spirtda eruvchi oqsillarni ajratish
1 g bug’doy unini chinni hovonchada maydalab unga 5 ml 70 % li etil spirti qo’shamiz.
Hosil bo’lgan suspenziyani tindirib, so’ngra filtrlaymiz. Hosil bo’lgan cho’kmada prolamin hosil
bo’ladi.
No’xotdan suvda eruvchi oqsillarni ajratish
Bu usul bug’doy uni albuminni ekstraktsiya qilish bilan bir xil.
No’xotdan tuzda eruvchi oqsillarni ajratish (legumin)
No’xot uni tarkibida globulinli oqsil legumin bo’ladi.
Bu oqsil suvda erimaydi, lekin
neytral tuzlar eritmasida eriydi. Leguminni ajratish uchun 5 g no’xot uniga 20 ml 10 % li
ammoniy sulfat eritmasini quyamiz, 30
С haroratda 20 minut davomida termostatda ekstraktsiya
qilamiz (aralashtirib turilgan holda). Hosil bo’lgan eritmani tuzli eritma
bilan namlangan filtr
qog’ozda filtrlanadi. Hosil bo’lgan filtrat no’xot unining globulinli oqsilli eruvchanligini
tekshirish uchun ishlatiladi.
Buning uchun 1 ml filtratga 1 ml NaCl eritmasini qo’shamiz. Cho’kmaga
tushgan
leguminni filtrlaymiz, filtr qog’ozda qolganini 1 ml 10 % NaCl eritmasida eritamiz.
Shundan
so’ng biuret reaktivi bilan reaktsiya o’tkazamiz. Olingan natijalar quyidagi jadvalga to’ldiriladi.
2.1-jadval
Tekshirilayotgan oqsilning fraktsion tarkibini sifat analizi natijalari
Tekshirayotg
an
material
Erituvchi
Eruvchan
oqsilning
nomlanishi
Qanday
erituvchidan
olinadi
Oqsil
reaktsiyasi
Nazorat savollari: