Microsoft Word Materiallar Full Mənim gənclərə xüsusi
II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS
Yüklə 10,69 Mb. Pdf görüntüsü
|
- Bu səhifədəki naviqasiya:
- II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS
- NEW INSIGHTS INTO THE INHIBITION OF beta-GLUCURONIDASE Shukufa JABBAROVA, Romy MASSFELLER, Khayala MAMMADOVA
- GƏMİRİCİLƏRDƏ BAĞIRSAQ KOKSİDİLƏRİNİN (APICOMPLEXA,COCCIDIA )MÜASİR MOLEKULYAR METODLAR VASİTƏSİ İLƏ TƏDQİQ EDİLMƏSİNİN ÜSTÜNLÜKLƏRİ HAQQINDA
|
II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS 159
Qafqaz University 18-19 April 2014, Baku, Azerbaijan reaksiya zəncirlərinin qarşısını alan maddələrinin mövcudluğunu bildirir. Elmi dəlillər təklif edir ki, antioksidantlar, xərçəng, kardiovaskulyar, neyrodegenerativ Altshaymer xəstəliklər kimi xroniki xəstəliklərə tutulma, allergik reaksiyaların baş vermə riskini azaldır. Təbii halda mövcud olan antioksidantların əsas mənbəyi bütün taxıl bitkiləri, meyvələr və tərəvəzlərdir. Antioksidantın əsas xarakteristikası onun sərbəst radikalları söndürmə qabiliyyətidir. Sərbəst radikalların miqdarının həddən artıq olması düzgün olmayan qidalanma, pis ekoloji şərait, stresslər, siqaret çəkmək və s. nəticəsində baş verir. Qida məhsullarının tərkibində antioksidantların aktivliyini müəyyən edib müqayisə etmək üçün müxtəlif tədqiqat üsulları istifadə olunmuşdur: EPR, xemilüminessensiya metodları, inqibitorların köməyi ilə və s. Bu işdə şirin biyan bitkisinin kökünün, yarpaqlarının, meyvəsinin (Glycyrrhiza glabra), boymadərən bitkisinin (Achillea millefolium), dəvətikanı bitkisinin çiçəklərinin (Alhagi pseudalhagi) ekstraktında antioksidant aktivliyi müəyyən olunmuşdur. Müasir təbabətdə şirinbiyan ekstraktlarından ədviyyat kimi və öskürək, soyuqdəymə əleyhinə vasitə kimi istifadə olunur. Bitkinin tərkibindəki natural polifenol izoflavon glabridin və hispa glabridin A və B çox yaxşı antioksidant xüsusiyyətinə malikdir. İzoflavonlar metabolik və antikonserogen xüsusiyyətə malik olub, ürək-damar sisteminə və dəriyə yaxşı təsir edir. Boymadərən bitkisi tibb sahəsində qanaxmanın qarşısının alınmasında, mədə-bağırsaq xəstəliklərinin, iltihab proseslərinin, hemoroid, dispepsiya, dismenoreya, qastrit və qızdırma əleyhinə geniş istifadə olunur. Bakteriosid xassəyə malikdir. Bitkinin tərkibindəki fenollu birləşmələr güclü antioksidant kimi çıxış edir. Təbabətdə dəvətikanından soyuqdəymələrdə hərarətisalıcı, mədə və on iki barmaq bağırsaq xorasında yarasağaldıcı, babasil xəstəliyində iltihabı aradan qaldırmaq, qanı kəsmək və sidikqovucu vasitə kimi işlədilir. Bitki ekstraktının tərkibindəki flavanoid birləşmələri antioksidant kimi fəaliyyət göstərməni təmin edir. Adları çəkilən bitkilərin antioksidant aktivliyini müəyyən etmək üçün sərbəst radikalların spektrofotometriya üsulundan istifadə olunmuşdur. Bu üsul, antioksidant nümunəsi (AH) ilə metanolda həll olunmuş stabil sərbəst radikal nümunəsi olan reaksiyasına əsaslanır. Reaksiyanın sxemi: DPPH*+AH → DPPH-H +A* Reaksiyaya isə 517 nm-də optiki sıxlığın dəyişməsində spektrofotometriya metodu vasitəsi ilə nəzarət olunur. DPPH (stabil radikal) metodundan əldə olunan nəticələri aydınlaşdırmaq üçün “səmərəli konsentrasiya” və ya İC 50 qiymətindən istifadə olunur. Tədqiq olunan substratın antioksidant qabiliyyəti standart antioksidant Troloksla müqayisə olunur. Tədqiqat nəticəsində müəyyən olundu ki, troloks İC 50
qiymətini 0,006μM qatılığında göstərmişdir. Tədqiq olunan bitki ekstraktlarının troloksa nisbətən effektivlik ardıcıllığı belə təsvir olunur: dəvətikanı bitkisi→ şirinbiyan bitkisinin kökü → şirinbiyan bitkisinin meyvəsi → boymadərən bitkisi→ şirinbiyan bitkisinin yarpaqları. Antioksidant aktivliyinin tədqiqinin nəticəsində aydın oldu ki, şirinbiyan bitkisinin kökünün, yarpaqlarının, meyvəsinin (Glycyrrhiza glabra), boymadərən bitkisinin (Achillea millefolium), dəvətikanı bitkisinin çiçəklərinin (Alhagi pseudalhagi) ekstraktları sərbəst radikalları söndürmə effektinə malikdir və bunların arasında dəvətikanı, şirinbiyan bitkisinin kök və meyvəsinin ekstraktı antioksidant kimi ən güclü aktivlik göstərdi.
γ-ŞÜALANMANIN SİNİR TOXUMASINDA YARATDIĞI FƏSADLARIN KORREKSİYASINDA ZƏFƏRAN EKSTRAKTININ ROLU Sevinc MƏMMƏDOVA AMEA, Fiziologiya İnstitutu ecolog84@rambler.ru
Müasir dövrümüzdə ətraf mühitdə ilbəil artan radiasiya şüalanması mənbələrinin canlı orqanizmlər üçün real təhlükə yaratdığını nəzərə alsaq, bu sahədə aparılan tədqiqatların böyük aktuallıq kəsb etdiyini görmək çətin deyil. İonlaşdırıcı şüalanma nəticəsində oksidant-antioksidant sistemində yaranan disbalans canlı orqanizm hüceyrələrinin normal fəaliyyətinin pozulmasına və immunitetin zəifləməsinə səbəb olur, hansı ki, bu da öz növbəsində xroniki xəstəliklərin inkişafına təkan verir. Antioksidant (AO) maddələrin oksidləşdirici stresi ləngitmək, yaxud da qarşısını almaqla oksidləşdirici zədələnmələrin nəticəsi olaraq meydana çıxan əksər xəstəliklərin profilaktika və müalicəsində əvəzsiz rolu danılmazdır. Orqanizmin lazımi AO-larla təmin olunmasında qida məhsullarının və qida əlavələrinin əhəmiyyəti çox böyükdür. Bir neçə minilliklər boyu ədviyyat kimi istifadə olunan zəfəranın (Crocus sativus L.) xalq təbabətində geniş istifadəsi öskürək əleyhinə, yaddaş gücləndirici, antiişemik, antidepressant, antivirus, antioksidant və s. kimi əhəmiyyətli farmakoloji təsirlərə malik olmasından irəli gəlir. Aparılan müasir tədqiqatlar nəticəsində zəfəranın bir sıra bioloji aktiv maddələrin bitki kompleksi olduğu sübuta yetirilmişdir. Zəfəran dərman bitkisi kimi soyuqdəymə, astma, göz və ürək- II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS 160
Qafqaz University 18-19 April 2014, Baku, Azerbaijan damar xəstəliklərinin müalicəsində istifadə olunmuşdur. Bütün bu müalicəvi xüsusiyyətlərin əsasında zəfəranın dişicik ağızcıqlarının kimyəvi tərkibinin zənginliyi durur. Belə ki, tədqiqatlar bu tərkibə karbohidratlar, minerallar, vitaminlər, karotin, flavonoidlər, amin turşular və zülallar kimi bioloji aktiv komponentlərin daxil olduğunu göstərmişdir. Bütün bunları nəzərə alaraq tədqiqat obyekti kimi seçdiyimiz zəfəranın ionlaşdırıcı şüaların AO sistemdə yaratdığı fəsadlara təbii AO kimi təsirini tədqiq etmişik. Tədqiqatlar 180±20 q çəkidə olan 30 fərd ağ laborator siçovullar üzərində, onların 3 qrupa bölünməsi ilə aparılmışdır: I qrup – kontrol; II qrup – γ-şüalanma; III qrup – zəfəran ekstraktı + γ-şüalanma. γ-şüalanmanın ümumi dozası 4 Qr-dir. Heyvanlara şüalanmadan əvvəl 21 gün müddətində per os yolu ilə 120 mq/kq dozada zəfəran ekstraktı verilib. Göstəricilər şüalanmadan 1 saat, 3 və 6 gün sonra təyin edilmişdir. LPO məhsullarının (hidroperoksid - HP, malondialdehidi - MDA) miqdarı Asakava T. və Matsuşita S. (Asakawa T. and Matsushita S., 1980) metodu ilə müəyyən olunmuşdur. Tədqiqatlardan alınan nəticələr göstərir ki, γ-şüalanmanın 4 qr dozasında heyvanlara təsir etdikdə LPO məhsullarının qatılığı beyin strukturlarının hamısında kəskin artır. Uzunsov beyində şüalanmadan 1 saat sonra kontrol göstəricilərlə müqayisədə artım HP-də 21%, MDA-da isə 28,6% təşkil edir. Artım tendensiyası 3-cü günə qədər davam edir. Belə ki, bu artım kontrol qrup heyvanlara nisbətən HP-də 26%, MDA-da isə 34% olur. Bunu orqanizmin endogen AO ehtiyatının yenidən formalaşması üçün sintez prosesinin tam bərpa olunmamağı və plazmatik membranların struktur-funksional pozğunluqları ilə izah etmək olar. 6-cı gündə isə LPO məhsullarının intensivləşməsi dayanır və 3-cü gün üçün əldə olunmuş göstəriciyə nisbətən azalır. HP və MDA qatılığının bu şəkildə dəyişməsi tendensiyası təcrübələrin aparıldığı digər strukturlarda da (beyincik, görmə və sensomotor qabığı) öz əksini tapmışdır. Zəfəran ekstraktının 21 gün müddətində per os üsulu ilə heyvanlara verilməsindən sonra şüalanmanın elə ilk saatında LPO məhsullarının səviyyəsi müəyyən qədər aşağı düşür: şüalanmadan sonra uzunsov beyində HP–2,54±0,12 nis.vah., MDA–2,25±0,07 nmol/mq zülal olduğu halda, zəfəran almış heyvanlarda bu göstəricilər uyğun olaraq 2,20±0,11 nis.vah. və 2,05±0,06 nmol/mq zülal
təşkil edir. 3-cü gündə bu azalma təqribən HP-də 9%, MDA-da isə 10% olur. 6-cı gündə isə dəyişilmə demək olar ki, baş vermir. Belə ki, HP–2,25±0,08 nis.vah., MDA–2,00±0,08 nmol/mq zülal təşkil etmişdir. Göstəricilərin bu şəkildə dəyişməsi zəfəran ekstraktının uzun müddətli stabil AO xüsusiyyətindən xəbər verir. Analoji vəziyyət həm görmə, həm də sensomotor qabığında müşahidə edilir.
NEW INSIGHTS INTO THE INHIBITION OF beta-GLUCURONIDASE Shukufa JABBAROVA, Romy MASSFELLER, Khayala MAMMADOVA Baku State University, Medical University xayale81@yahoo.com, jabbarova.shukufa@mail.ru β-Glucuronidase (β-D-glucuronide glucuronosohydrolase, (EC 3.2.1.31), belongs to the family of enzymes catalyzing the hydrolyses of glycosaminoglycans. The enzyme occurs in animal cells and their body fluids as well as in bacterial cells.Inhibition of β-glucuronidase has attracted considerable attention due to a number of diseases and disorders associated with its elevated activity. Consequences of elevated levels of β–glucuronidase are numerous and have been observed at urinary diseases, epilepsy, and rheumatoid arthritis, in some hepatic diseases, AIDS, and different neoplastic conditions. Additionally, inhibition of symbiotic bacterial (E.coli) β-glucuronidase may alleviate cancer drug toxicity in colon cancer therapy since the bacterial glucuronidase in the gut is responsible for the side effects of commonly used colon cancer chemotherapeutics. Therefore, it is believed that the development of specific human and / or bacterial β – glucuronidase inhibitors is of great importance for pharmacology. Obviously, the identification of new inhibitors of β- glucuronidase and in silico design of new potent inhibitors need more insights for the mechanisms of β-glucuronidase inhibition. In this work 58 individual compounds, acylhydrazide Schiff bases (class I, 12 compounds), unsymmetrically disubstituted ureas (class II, 10 compounds), aromatic sulfonyl hydrazides (class III, 28 compounds), and aromatic sulfones (8 compounds) have been synthesized and screened for β-glucuronidase in vitro inhibition. 31 out of 58 compounds of I-III showed inhibitory effect with IC 50 values in the range 2.3 - 155.8 μM. No effective inhibitors were found among aromatic sulfones screened. Molecular docking studies have been performed using Autodock-Vina software. The studies reveal two principal binding modes of the inhibitors. Binding mode 1, characteristic for most inhibitors, occurs within the enzyme substrate pocket and involves interactions with the enzyme amino acid residues Glu413, Glu504 and Tyr472. Dissimilarly, binding of N-(3-chlorophenyl)-N’-(8-quinolinyl) urea (inhibitor II-4) occurs in the area adjacent, but beyond the canonical active center of β-glucuronidase (binding mode 2). Binding mode 2 involves interactions with the residues His162, Val446, Met447, Ser557 and other different from the residues forming the substrate binding pocket.Unusual binding of compound
II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS 161
Qafqaz University 18-19 April 2014, Baku, Azerbaijan II-4 is relevant to β-glucuronidase active center structure and therefore should be considered in future enzyme targeted structure-based drug design. To assess structure – activity relationships a ligand based pharmacophore model of the identified inhibitors have been elaborated. Pharmacophore groups of most effective inhibitors were pairwise aligned using PharmaGist web server tool. Although classified formally as different chemical classes the inhibitors are o the similar chemical scaffold : two aromatic/hydrophobic centers linked by two other centers providing hydrogen bond donor and hydrogen bond acceptor. Thus, a four-point pharmacophore model of β-glucuronidase inhibitors is presented to aid future in silico investigations. The binding modes of compounds I-3, II-4, and III-24 are relevant to β-glucuronidase active center structure and therefore should be considered in the enzyme targeted structure-based drug design. The study presents several new potent E. coli β- glucuronidase inhibitors having significant interest in pharmacology, provides new insights into β-glucuronidase active site and enhance the dataset for its future in silico investigations.
GƏMİRİCİLƏRDƏ BAĞIRSAQ KOKSİDİLƏRİNİN (APICOMPLEXA,COCCIDIA)MÜASİR MOLEKULYAR METODLAR VASİTƏSİ İLƏ TƏDQİQ EDİLMƏSİNİN ÜSTÜNLÜKLƏRİ HAQQINDA Türkan QURBANOVA AMEA, Zoologiya İnsitutu turkan.qurbanova@gmail.com Apicomplexa tipinin ən geniş yayılan qruplarından biri Eimeriida dəstəsidir. Bu dəstəyə aid olan birhüceyrəli ibtidailərin əksəriyyəti bağırsaq parazitləridir. Eimeriida dəstəsinin 12 fəsiləsi vardır ki, onların içərisindən Eimeriidae fəsiləsi cinslərinin sayının çoxluğuna görə üstünlük təşkil edir. Eimeriidae fəsiləsinə aid olan koksidilərin ayrı-ayrı cinsləri bir-birindən oosistaların quruluşuna, sporosista və sporozoitlərinin sayına görə fərqlənirlər. Belə ki, bu fəsilənin daha geniş yayılmış cinslərindən Caryospora cinsinə aid olan oosistaların daxilində 1 sporosista, Cyclospora və Dorisa cinsinə aid olan oosistaların daxilində 2 sporosista, Eimeria cinsinə aid olan oosistaların daxilində 4 sporosista, Octosporella və Gousseffia cinsinə aid olan oosistaların daxilində 8 sporosista olur. Eimeriida dəstəsinin digər daha geniş yayılmış fəsilələrindən biri də Cryptosporidiidae fəsiləsidir. Bu fəsilə bir cins- Cryptosporidium cinsi ilə təmsil olunur. Bu cinsə daxil olan növlərin oosistalarında sporosista yoxdur, 4 sporozoit sərbəst şəkildə yerləşir.İqtisadi ədəbiyyatda insan kapitalına fərqli təriflər verilmişdir. Bu təriflər ümumiləşdiriləcək olursa, insan kapitalı istehsal prossesində yer alan əmək amilinin sahib olduğu və digər istehsal amillərindən daha səmərəli istifadə edilməsinə gətirib çıxaran bilik, bacarıq, təcrübə, peşəkarlıq, sağlamlıq səviyyəsinə bağlı olaraq yaratdığı əlavə dəyər olaraq ifadə edilə bilər. Eimeriida dəstəsinə daxil olan cinslərdən Eimeria və Cryptosporidium cinsinə aid olan koksidilər heyvanlarda ciddi fəsadlarla nəticələnən xəstəliklərə səbəb olduğundan onlar daha geniş şəkildə öyrənilmişdir. Xüsusən Cryptosporidium cinsindən olan parazitlər zoonoz təbiətə malik olduğundan, yəni insan və heyvanlar üçün ümumi parazitlər olduğundan onların hərtərəfli öyrənilməsi mühüm əhəmiyyət kəsb edir. Son dövrlərə qədər bu koksidilərin tədqiq edilməsi zamanı oosistaların mikroskopiya metodu vasitəsi ilə əldə edilmiş morfoloji göstəriciləri əsas götürülürdü. Lakin bağırsaq koksidilərinin, xüsusən vəhşi heyvanların, bizim tədqiqatlarımız zamanı isə gəmiricilərin koksidilərinin ancaq mikroskopiya metodundan istifadə etməklə öyrənilməsi bir sıra çətinliklərə gətirib çıxarır. Belə ki, eyni sahibin fekal nümunəsində aşkar edilmiş oosistaların morfoloji quruluşu və ölçüləri onların xaric olunma vaxtından, patent dövrün başlanğıcı və ya sonundan asılı olaraq kəskin şəkildə fərqlənə bilər. O cümlədən, bir sıra tədqiqatçılar tərəfindən gəmiricilər dəstəsinin bir neçə növü üzərində bir sahibə xas olan eymeriya növlərinin digər sahibi yoluxdurmasını sübut edən çarpaz yoluxdurma təcrübələri aparılması tərəddüdlərin yaranmasına səbəb olur. Bağırsaq koksidilərindən İsospora cinsinə daxil olan parazitlərin təyin edilməsində də aydın olmayan məqamlar vardır. Belə ki, gəmiricilərin fekal nümunələrində aşkar olunan izosporid struktura malik oosistların, çox vaxt, onların orqanizminə quşlardan tranzit yolla keçdiyi qeyd edilir. Gəmiricilərin və o cümlədən digər heyvanların koksidilərinin təyini zamanı yaranan bütün bu qaranlıq məqamları həll etmək üçün hal-hazırda müasir molekulyar metodlardan geniş şəkildə istifadə edilir. Bu metodlardan DNT amplifikasiyası, PZR, DNT sekvinasiyası daha çox yayılmışdır. DNT amplifikasiyası - dezoksiribonuklein turşusunun (DNT) hər hansı bir geninin kopyalarının orqanizmdən kənarda dəfələrlə artırılmasıdır. Polimeraz zəncir reaksiyası (PZR) — molekulyar biologiyanın eksperimental metodu olub, bioloji materialda DNT-nin müəyyən fraqmentlərinin kiçik konsentrasiyalarının dəfələrlə artırılması üsuludur. Metod DNT-nin müəyyən region və ya regionlarının orqanizmdən kənarda (in vitro) DNT polimeraz fermenti vasitəsilə müəyyən nahiyəni seçərək süni şəraitdə təkrar təkrar kopyalanması prinsipinə əsaslanır. Bu zaman yalnız verilmiş şərtlərə II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS 162
Qafqaz University 18-19 April 2014, Baku, Azerbaijan müvafiq olan və tədqiq olunan nümunədə mövcud olan regionların kopyalanması baş verir. PZR metodu tədqiq olunan nümunədə hər hansı bir xəstəliyin törədicilərinin və ya hər hansı bir parazitin DNT-sindən bir neçə molekul olsa belə onların mövcudluğunu müəyyən etməyə imkan verir. DNT sekvinasiyası (latın dilindən sequentum — ardıcıllıq) nukliotidlərin dəqiq ardıcıllığının müəyyən edilməsi metodudur. Yuxarıda qeyd olunan müasir metodların tətbiqinə qədər Cryptosporidium cinsinə daxil olan və gəmiricilərdə geniş yayılmış C. parvum növü 20-dən çox sahibdə parazitlik edən eyni növ kimi qəbul edilirdi. Lakin PZR və DNT sekvinasiyası kimi metodların tətbiqindən sonra aydın oldu ki, bu növün ən azı iki genotipi vardır. Onlardan biri yalnız insan və bəzi primatlar üçün xarakterik olan genotip I və ya C.hominis, digəri isə iri buynuzlu mal-qara və insan üçün xarakterik olan genotip II və ya “öküz genotipi”dir. Spesifik praymerlərdən istifadə etməklə nukliar 18S rDNA (*1500 bp), plastid ORF 470 (*700 bp) və mitoxondrial I (COI; *400 bp) genlərini PZR vasitəsi ilə amplifikasiyası metodu ilə Eimeria cinsinə aid olan koksidilərin təsnifatda yerini dəqiqliklə müəyyən etmək mümkündür. Tədqiqatlarımız zamanı gəmiricilər dəstəsinə daxil olan Kiçik Asiya dağ ərəbdovşanının (Allactaga williamsi), boz siçovulların (Rattus norvegicus), ev siçanlarının (Mus musculus) və qırmızıquyruq qum siçanlarının (Meriones libycus), o cümlədən Bakı heyvanat parkında saxlanılan gəmiricilərin mikroskopiya metodundan istifadə etməklə bağırsaq koksidiləri ilə yoluxması tədqiq edilmişdir. Tədqiqat işi nəticəsində gəmiricilərdə parazitlik edən Eimeria, Cryptosporidium və İsospora cinslərinə daxil olan koksidilərin morfolometrik göstəricilərinə əsasən onların növ mənsubiyyəti təyin edilmiş və əldə olunmuş nəticələr hal-hazırda molekulyar metodlardan istifadə etməklə təsdiq edilmə mərhələsindədir.
Бакинский Государственный Университет anar.biochemistry@gmail.com
Ксантиноксидаза (КО,К 1.1.3.22) молибденсодержащий флавопротеид, участвующий в гидроксилировании ксантина в мочевую кислоту, который происходит на молибденптериновом центре. При этом на флавинадениндинуклеотид кофакторе образуются активные формы кислорода, которые приводят к окислительному стрессу, способствующему развитию патологических заболеваний. Данный фермент имеет очень важное клиническое значение. Ингибиторы КО, например, аллопуринол, фебуксостат, фитиевая кислота и др., используются при лечении гиперурикемии, подагры, образование почечных камней и других заболеваний для предотвращения накопления мочевой кислоты в мягких тканях и суставах. Помимо этого ингибиторы КО широко используются при лечении и других нарушений, таких как, ишемии сердца, синдрома лизиса опухоли, инсульте, хронической сердечной недостаточности. Однако, эти препараты, в частности аллопуринол проявляет много побочных эффектов, например, головокружение, желудочно-кишечный дистресс, диарея, аллергия, покраснение кожи и др. Поэтому на сегодняшний день поиск новых эффективных ингибиторов КО без побочных воздействий, которые могли бы служить прототипом для разработки новых лекарственных препаратов для лечения заболеваний, связанных с гиперактивностью КО, является очень актуальной проблемой[5] .
которые проявляют ингибиторные свойства в отношении КО. Нгуен и сотрудники установили, что 5,7-дигидрокси- 2-(3,4-дигидрокси-фенил)-хроман-4-он (ериодиктиол) ингибирует ферментативную активность КО со значением КИ 50
(гесперетин) и 3,5,7-тригидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-хроман-4-он (тахифолин) подавляют образование мочевой кислоты со значением КИ 50 0.27 и более 100 мкМ, соответственно[3]. Согласно работам Дью и сотрудников, 5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-хроман-4-он (нарингинин) является также ингибитором КО, и для понижения скорости ферментативной реакции в два раза необходимо приблизительно 77.4 мкМ этого соединения.[2] Мы уже сообщали об ингибиторной активности 12 синтетически полученных бромпроизводных хромана. Было установлено, что 5-бром-2-(2-этил-6-метил-3,4-дипропилфенил)-6, 7, 8-триметилхроман-4-он, 5-бром-2-(2,4-диэтил- 6-метил-3-пропилфенил)-6, 7, 8-триметилхроман-4-он, 5-бром-2-(2, 4-диэтил-3-пропилфенил)-6, 7, 8- триметилхроман-4-он и 6-бром-2-(3, 4, 5-триметилфенил)-хроман-4-он сильно подавляют каталитическую
II INTERNATIONAL SCIENTIFIC CONFERENCE OF YOUNG RESEARCHERS 163
Qafqaz University 18-19 April 2014, Baku, Azerbaijan активность КО. Сообщалось, что значения КИ 50 для этих этих соединений равнялся 15, 11, 47 и 23 мкМ, соответственно.[1] Определение типа ингибирования очень важно для определения механизма ингибирования и место связывания ингибитора с ферментом. Для определения механизма ингибирования нами были определены кинетические параметры ингибиторов, такие как, Vmax, Vmax кажущееся, Km, Km кажущееся, Ki и Vmax/Km (наклон). Расчет величин максимальной скорости реакции (Vmax) и константы Михаэлиса (Km) графическим методом Лайнуивера - Берка и Эди-Хофсти. Кривая Эди-Хофсти дает более точные значения Vmax и Km, так как в этом случае полученные точки не оказываются сконцентрированными в одном месте. Значение Ki (константа ингибирования) определяли по методу Диксона, в котором по оси абсцисс размещали значение концентраций ингибитора, а по оси ординат обратное значение начальных скоростей. Точка пересечения кривых с осью абсцисс соответствовала Ki. Установлено, что все исследованные бромпроизводные хромана подавляли активность КО по типу неконкурентного ингибирования, то есть они связывались как с фермент-субстратным комплексом, так и со свободным ферментом. Это подтверждают полученные кинетические параметры исследованных ингибиторов. Для данных ингибиторов были рассчитаны константы ингибирования, которые ранялись 13.27, 15.01, 45.5, 22.75 мкМ, соответственно.
Yüklə 10,69 Mb. Dostları ilə paylaş:
|